伊维菌素微乳中伊维菌素的含量测定方法研究

发布时间：2019-09-17 13:29

【摘要】：为建立伊维菌素微乳中伊维菌素含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法,选用Hypersil ODS2(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱,流动相为甲醇∶乙腈∶水为35∶60∶5(V/V/V),检测波长为244nm,柱温为30℃,流速为1mL/min进行测定。结果显示,伊维菌素在该色谱条件下,系统适应性良好,在80~320μg/mL浓度范围内线性关系良好,回归方程为:Y=22 700X+2 510,R~2=0.9998,总平均回收率为101.90%±2.94%,RSD为2.88%,对中试生产的3批伊维菌素微乳进行含量测定,RSD为1.86%。表明该含量测定方法准确可靠,重现性好,可用于伊维菌素微乳中伊维菌素含量的测定,并为该新型制剂的质量标准的制定和质量评价提供依据,也为后期的临床安全应用提供可靠的参考。
【图文】：

色谱图,伊维菌素,紫外扫描,图谱

每天同一时间测定，求得日间精密度。１．２．９回收率试验制备伊维菌素微乳浓度８０％、１００％、１２０％的伊维菌素微乳溶液，每个浓度制备３份供试品，测定样品中伊维菌素的含量，并与真实值比较，计算回收率和相对标准偏差。进样前，经０．２２μｍ滤膜滤过，滤液进样量为１０μＬ。１．２．１０样品测定将各批次的伊维菌素微乳制剂按照上述的色谱条件及方法进行测定，每个批次平行测定３次。２结果２．１伊维菌素检测波长的确定伊维菌素甲醇溶液的紫外扫描图谱见图１。由图１可知，伊维菌素在２００～８００ｎｍ的波长范围内的最大吸收波长在２４４ｎｍ处，因此确定２４４ｎｍ作为ＨＰＬＣ的检测波长。图１伊维菌素的紫外扫描图谱Ｆｉｇ．１ＵＶｓｃａｎｎｉｎｇｓｐｅｃｔｒｕｍｏｆｉｖｅｒｍｅｃｔｉｎ２．２系统适应性由图２可知，将配制好的伊维菌素标准品溶液进样１０μＬ，伊维菌素Ｈ２Ｂ１ｂ的保留时间为６．２ｍｉｎ，Ｈ２Ｂ１ａ的保留时间为７．０ｍｉｎ，Ｈ２Ｂ１ｂ与Ｈ２Ｂ１ａ的分离度为３．３１，Ｈ２Ｂ１ａ的理论塔板数为４２５９５，符合《中国兽药典》中“伊维菌素Ｈ２Ｂ１ｂ与Ｈ２Ｂ１ａ的分离度应不小于３．０，理论塔板数按Ｈ２Ｂ１ａ峰计算应不低于２０００”的要求。图２伊维菌素标准品色谱图Ｆｉｇ．２Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｏｆｉｖｅｒｍｅｃｔｉｎｒｅｆｅｒｅｎｃｅ１８６３

色谱图,伊维菌素,标准品,色谱图

１０μＬ。１．２．１０样品测定将各批次的伊维菌素微乳制剂按照上述的色谱条件及方法进行测定，每个批次平行测定３次。２结果２．１伊维菌素检测波长的确定伊维菌素甲醇溶液的紫外扫描图谱见图１。由图１可知，伊维菌素在２００～８００ｎｍ的波长范围内的最大吸收波长在２４４ｎｍ处，因此确定２４４ｎｍ作为ＨＰＬＣ的检测波长。图１伊维菌素的紫外扫描图谱Ｆｉｇ．１ＵＶｓｃａｎｎｉｎｇｓｐｅｃｔｒｕｍｏｆｉｖｅｒｍｅｃｔｉｎ２．２系统适应性由图２可知，将配制好的伊维菌素标准品溶液进样１０μＬ，伊维菌素Ｈ２Ｂ１ｂ的保留时间为６．２ｍｉｎ，Ｈ２Ｂ１ａ的保留时间为７．０ｍｉｎ，Ｈ２Ｂ１ｂ与Ｈ２Ｂ１ａ的分离度为３．３１，Ｈ２Ｂ１ａ的理论塔板数为４２５９５，，符合《中国兽药典》中“伊维菌素Ｈ２Ｂ１ｂ与Ｈ２Ｂ１ａ的分离度应不小于３．０，理论塔板数按Ｈ２Ｂ１ａ峰计算应不低于２０００”的要求。图２伊维菌素标准品色谱图Ｆｉｇ．２Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｏｆｉｖｅｒｍｅｃｔｉｎｒｅｆｅｒｅｎｃｅ１８６３
【作者单位】：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室;甘肃农业大学动物医学院;
【基金】：国家现代农业肉牛牦牛产业技术体系建设专项资金(CARS-38) 公益性行业(农业)科研专项经费(301303038-4)
【分类号】：S859.1

【参考文献】