姬松茸多糖对镉致鸡肝脏损伤的颉颃作用

发布时间：2019-10-08 10:40

【摘要】：本试验旨在研究姬松茸多糖对镉诱导的鸡肝脏损伤的颉颃作用。将80只7日龄海兰白雄性雏鸡随机分成空白组、中毒、治疗组以及多糖组4组,每组20只。空白组雏鸡饲喂正常全价饲料,同时每只每天通过灌胃方式给予生理盐水0.2 m L;中毒组雏鸡饲喂混有140 mg/kg CdCl2的正常全价饲料,并且每只每天通过灌胃方式给予生理盐水0.2 mL;治疗组雏鸡饲喂混有140mg/kg Cd Cl2的正常全价饲料,同时每只每天灌胃30 mg/m L姬松茸多糖溶液0.2 mL;多糖组雏鸡饲喂正常全价饲料,同时每只每天灌胃30 mg/m L姬松茸多糖溶液0.2 mL,动物试验持续60d。分别在试验第20、40和60d时,从每组雏鸡中随机选取5只雏鸡,称重后心脏采血处死,快速采取肝脏,称重。采用HE染色法制作肝脏病理组织学切片,观察雏鸡肝脏病理学变化;生物化学试剂盒检测肝脏抗氧化酶(SOD和GSH-PX)活力、肝脏主要转氨酶(ALT和AST)活力以及MDA含量;实时荧光定量法检测肝脏中炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)和热休克蛋白(HSP27、HSP40、HSP60、HSP70和HSP90)mRNA水平;ELISA法检测肝脏中炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)蛋白表达水平;Western blot法检测肝脏中热休克蛋白(HSP60、HSP70和HSP90)的蛋白表达水平。结果发现,与空白组相比,中毒组雏鸡持续的摄入镉,引起镉在肝脏中的蓄积,导致肝脏肿胀、细胞变性坏死,发生炎症反应,并降低肝脏ALT和AST活力,此差异具有统计学意义(P0.05);显著抑制肝脏内抗氧化酶(SOD、GSH-PX)活性,提高MDA含量,差异具有统计学意义(P0.05);显著提高肝脏中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的m RNA和蛋白表达,差异具有统计学意义(P0.05);明显提高肝脏中热休克蛋白HSP27、HSP40、HSP60、HSP70和HSP90的mRNA水平,以及HSP60、HSP70和HSP90的蛋白表达水平,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗组雏鸡与中毒组相比,镉在肝脏中的蓄积量明显降低,抗氧化酶(SOD、GSH-PX)活性明显提高,MDA含量明显降低,且差异均具有统计学意义(P0.05);与中毒组相比,治疗组雏鸡肝脏炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6 m RNA和蛋白的表达量均显著降低,并且差异具有统计学意义(P0.05);肝脏中热休克蛋白HSP27、HSP40、HSP60、HSP70和HSP90的mRNA水平,以及HSP60、HSP70和HSP90的蛋白表达水平亦显著降低,且差异具有统计学意义(P0.05)。多糖组雏鸡肝脏以上指标与空白组雏鸡相比均无显著差异。实验结果表明,雏鸡每日口服姬松茸多糖对长期摄入镉引起的肝脏损伤有明显的保护作用。为进一步揭示姬松茸多糖对镉导致禽类肝损伤的颉颃作用机制的研究和禽类养殖过程中防治镉中毒提供理论依据。
【图文】：

标准曲线,标准曲线,雏鸡,精神状态

3 结果3.1 姬松茸多糖提纯结果葡萄糖标准品标准曲线绘制如图3-1，姬松茸多糖提取纯化结果如表3-1。图3-1 葡萄糖标准品标准曲线Fig.3-1 The standard curve of glucose表3-1 多糖提取纯化结果表3-1 The result of purification待测样品所取体积（mL）吸光度值多糖含量0.3 0.153 88.5%0.4 0.185 87.3%0.5 0.225 90.4%平均 88.7%根据标准曲线计算可得，待测样品多糖含量是88.7%。3.2 临床表现空白组、治疗组和多糖组三组雏鸡生长情况较佳，，精神状态良好，采食量正常，被毛整齐有光泽；中毒组精神状态较亢奋，采食量明显减少，对灌胃给药抗拒明显，被毛凌乱无光泽，个体发育较小。3.3 雏鸡体重和肝脏系数由图3-2可知，在同一取样时间，与空白组雏鸡相比，中毒组的雏鸡平均体重在各个取样时间点均明显低于空白组（P<0.05），而治疗组雏鸡体重则显著高于中毒组（P<0.05）

雏鸡,体重,肝脏系数

鸡的肝脏系数（P<0.05），治疗组雏鸡的肝脏系数显著高于中毒组（P<0.05），多糖组与空白组雏鸡的肝脏系数并无显著差异（P>0.05）。图3-2 雏鸡体重图3-3 雏鸡肝脏系数Fig. 3-2 Weight of chicken Fig. 3-3 Liver index注：同一时间点以空白组作为基准，不同字母代表差异显著（P<0.05）,每组数据以均值±标准差表示，以下同。Note：Group Control were used as the reference values at the same sampling time. Differentletters indicated that there were significant differences (P<0.05) between any two groups. Eachvalue was represented in the format of the mean ± SD. The following Fig.ures are the same as here.3.4 雏鸡肝脏中镉含量图3-4显示了不同采样时间、不同组别雏鸡的肝脏中镉含量。同一取样时间，中毒组雏鸡肝脏内镉的含量与空白组、多糖组雏鸡相比明显增高（P<0.05），治疗组雏鸡肝脏中镉的含量与中毒组雏鸡相比明显降低（P<0.05），多糖组与空白组相比虽无显著差异，但同一时间点多糖组雏鸡镉含量均低于空白组（P>0.05）。图3-4 雏鸡肝脏镉含量Fig. 3-4 Content of Cd
【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S859.8

【参考文献】