绵羊痘病毒的检测与遗传进化分析

发布时间：2019-11-18 22:29

【摘要】：羊痘是全球最严重的动物传染性痘病。近年来,羊痘病毒在非洲北部和中部、中东、亚洲大部分地区广泛流行,给养殖业带来巨大的经济损失。论文对4只疑似羊痘病毒感染绵羊进行诊断,通过临床观察,病理剖检,病理组织学观察,实验室检测,确定该病为绵羊痘,并对分离的病毒主要基因进行PCR扩增及遗传进化分析,发现此毒株属于亚洲系,且我国流行株基因比较稳定,变异不大。这不仅为绵羊痘病的诊断提供了技术手段,还丰富了我国羊痘病毒感染的流行病学资料,为进一步研究羊痘病毒的变异等提供数据支持。
【图文】：

临床症状,病理变化

Ａ５程序以Ｈａｓｅｇａｗａ－Ｋｉｓｈｉｎｏ－Ｙａｎｏ和Ｔａｊｉｍａ－Ｎｅｉ模型构建ＭａｘｉｍｕｍＬｉｋｅｌｉｈｏｏｄ进化树，进化树的拓扑结构以１０００的Ｂｏｏｔｓｔｒａｐ进行分析。２结果２．１临床症状的观察通过临床症状观察，发现发病绵羊具有以下的共同临床特征：体温升高，脉搏和呼吸加速，精神萎靡，废食，，喜卧。眼结膜潮红、肿胀、鼻液黏稠。部分病羊无毛或毛少的部位出现红色圆形斑点，有的已经变成黄豆或蚕豆大的丘疹，触感较硬，甚至结痂成黑色（图１Ａ），或破溃脱痂，形成红色溃疡（图１Ｂ）。进一步对病死绵羊剖检观察，发现患病绵羊的主要病变集中于胃部和肺部。具体来说，胃浆膜上出现了大量的黄豆粒乃至扁豆大的白色结节，触感坚硬，突出表面（图１Ｃ）。肺部表面亦有多量灰白色豌豆大小的痘斑，突出表面，触感坚硬，同时肺部局部严重出血（图１Ｄ）。其余部位，如心、肝、脾、肠等部位未见明显异常，以上病变均为绵羊痘的典型病理变化。２．２病理组织切片根据临床症状及剖检变化，初步怀疑并死绵羊源于羊痘病毒感染。为进一步验证我们的判断，我们取典型病变部位病健交界处组织，制作病理切片，通过ＨＥ染色，镜检，我们发现病死绵羊肺泡内多量炎性细胞渗出，肺泡壁明显增生，肺泡结构消失（图２Ａ）；肺出血、水肿（图２Ｂ）；在皮下组织出现多量炎性细胞渗出、聚集，此外皮肤结节典型的组织病理变化（图２Ｃ）。Ａ．口鼻部位结痂；Ｂ．尾部痘疹、溃疡；Ｃ．胃部多量结节；Ｄ．肺结节及出血Ａ．Ｓｃａｂｏｎｍｏｕｔｈａｎｄｎｏｓｅ；Ｂ．Ｐｏｘｏｎｔａｉｌ；Ｃ．Ｎｏｄｕｌｅｓｉｎｓｔｏｍａｃｈ；Ｄ．Ｎｏｄｕｌｅｓａｎｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｉｎｌｕｎｇｓ图

羊病,组织切片

的白色结节，触感坚硬，突出表面（图１Ｃ）。肺部表面亦有多量灰白色豌豆大小的痘斑，突出表面，触感坚硬，同时肺部局部严重出血（图１Ｄ）。其余部位，如心、肝、脾、肠等部位未见明显异常，以上病变均为绵羊痘的典型病理变化。２．２病理组织切片根据临床症状及剖检变化，初步怀疑并死绵羊源于羊痘病毒感染。为进一步验证我们的判断，我们取典型病变部位病健交界处组织，制作病理切片，通过ＨＥ染色，镜检，我们发现病死绵羊肺泡内多量炎性细胞渗出，肺泡壁明显增生，肺泡结构消失（图２Ａ）；肺出血、水肿（图２Ｂ）；在皮下组织出现多量炎性细胞渗出、聚集，此外皮肤结节典型的组织病理变化（图２Ｃ）。Ａ．口鼻部位结痂；Ｂ．尾部痘疹、溃疡；Ｃ．胃部多量结节；Ｄ．肺结节及出血Ａ．Ｓｃａｂｏｎｍｏｕｔｈａｎｄｎｏｓｅ；Ｂ．Ｐｏｘｏｎｔａｉｌ；Ｃ．Ｎｏｄｕｌｅｓｉｎｓｔｏｍａｃｈ；Ｄ．Ｎｏｄｕｌｅｓａｎｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｉｎｌｕｎｇｓ图１患病羊临床症状与病理变化Ｆｉｇ．１ＴｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｓｙｍｐｔｏｍｓａｎｄｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｌｅｓｉｏｎｓｏｆｔｈｅｓｉｃｋｓｈｅｅｐＡ．肺泡壁增生；Ｂ．肺水肿；Ｃ．皮肤结痂Ａ．Ｔｈｉｃｋｅｎｅｄａｌｖｅｏｌａｒｗａｌｌｓ；Ｂ．Ｐｕｌｍｏｎａｒｙｅｄｅｍａ；Ｃ．Ｓｃａｂｏｎｓｋｉｎ图２患病羊病理组织切片Ｆｉｇ．２Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｓｉｃｋｓｈｅｅｐ２．３羊痘病毒基因检测根据剖检症状及组织病理学观察，初步诊断并死绵羊为羊痘病毒感染。之后，采集典型病变部位病健交界处组织，提取病毒基因组ＤＮＡ，进一步验１０动物医学进展２０１７年第３８卷第１２

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