铜对大鼠脑微血管内皮细胞的氧化应激损伤

发布时间：2020-01-18 18:02

【摘要】：选用浓度为30,60,120,180,240μmol/L的氯化铜(CuCl_2)作用于原代大鼠脑微血管内皮细胞(BMEC)12h,测定细胞活力、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的变化。结果显示:与对照组相比,细胞活力明显降低,30μmol/L浓度组SOD的活性变化不明显,60μmol/L和120μmol/L浓度组SOD的活性升高,而180μmol/L和240μmol/L浓度组SOD的活性降低,CAT的活性均明显降低,iNOS的活性均明显升高。结果表明:铜过量可致BMEC损伤,而氧化应激是其中一个重要因素。
【图文】：

线的回归方程得到细胞数，细胞活力＝（试验组细胞数／对照组细胞数）×１００％。１．５氧化应激指标的检测ＢＭＥＣ经不同浓度的ＣｕＣｌ２处理１２ｈ后，进行消化收集和超声破碎，用ＢＣＡ法测定蛋白浓度，余下按ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＮＯＳ分型试剂盒说明书操作检测。１．６统计学分析数据用ｘ—±ｓ表示，应用ＳＰＳＳ软件对数据进行单因素方差统计分析。２结果２．１原代培养ＢＭＥＣ免疫荧光鉴定结果见图１，Ⅷ因子阳性细胞百分数达到９８％。图１原代培养ＢＭＥＣ免疫荧光鉴定图（１００×）Ａ．明场视野；Ｂ．ＦＩＴＣ标记的Ⅷ因子抗体在胞质呈绿色荧光；Ｃ．ＤＡＰＩ衬染的胞核呈蓝色荧光；Ｄ．同一视野荧光双标合并１４５中国兽医学报２０１７年１月第３７卷第１期ＣｈｉｎＪＶｅｔＳｃｉＪａｎ．２０１７Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．１

２．２铜对ＢＭＥＣ细胞活力的影响以细胞数目为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线（图２），，求得回归方程ｙ＝７×１０－６ｘ＋０．１９（Ｒ２＝０．９９０）。经不同浓度的ＣｕＣｌ２处理后的ＢＭＥＣ存活率变化见图３，与对照组相比，随着铜浓度的升高，ＢＭＥＣ的存活率均极显著降低（Ｐ＜０．０１），且整体呈下降趋势。图２ＢＭＥＣ－ＭＴＳ标准曲线图３ＢＭＥＣ的细胞活力变化（ｎ＝４，＊＊示与对照组相比Ｐ＜０．０１）２．３铜对ＢＭＥＣ氧化应激的影响经不同浓度的ＣｕＣｌ２处理１２ｈ后，ＢＭＥＣ的ＳＯＤ活力、ＣＡＴ活力和ｉＮＯＳ活力变化见表１。随着Ｃｕ２＋浓度的升高，与对照组相比，细胞内ＳＯＤ活力在６０μｍｏｌ／Ｌ和１２０μｍｏｌ／Ｌ浓度组均显著升高（Ｐ＜０．０５），随后均显著降低（Ｐ＜０．０５），细胞内ＣＡＴ活力均显著降低（Ｐ＜０．０１），细胞内ｉＮＯＳ活力均显著升高（Ｐ＜０．０５）。表１不同铜浓度对ＢＭＥＣ氧化应激的影响（ｎ＝４）Ｕ／ｍｇ组别ＳＯＤＣＡＴｉＮＯＳ对照组８６．０４±３．８０１４３．７４±４．７４７．７８±０．１４３０μｍｏｌ／ＬＣｕ２＋８８．３０±１．７９１２６．３８±８．０８＊＊７．９７±０．１１＊６０μｍｏｌ／ＬＣｕ２＋９３．７６±３．２８＊１０１．０４±８．３７＊＊８．３１±０．２４＊＊１２０μｍｏｌ／ＬＣｕ２＋１００．２２±６．１０＊＊１０４．５７±７．４１＊＊８．３６±０．２５＊＊１

【相似文献】

相关期刊论文 前1条

1 王艳霞;张伟;韩东宁;张源淑;;血管紧张素转化酶2(ACE2)对大鼠肾氧化应激损伤的保护作用及其机制[J];农业生物技术学报;2011年05期

相关会议论文 前10条

1 颜建英;;子痫前期与氧化应激损伤[A];中华医学会第三次全国妊娠期高血压疾病学术研讨会论文汇编[C];2011年

2 王咏波;王茜;于振乾;杜建玲;;窖蛋白-1在波动性高糖诱导的内皮细胞氧化应激损伤中的作用及机制[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年

3 吕萍萍;范莹;陈莹莹;朱立;沈岳良;;环加氧酶2抑制剂对抗心肌氧化应激损伤中的作用及机制[A];浙江省生理科学会2006年学术年会论文汇编[C];2006年

4 胡凯骞;张龙泽;陈春英;孙宝云;邢更妹;赵保路;赵宇亮;聂广军;;功能化富勒烯衍生物效应探索:延长线虫寿命和保护氧化应激损伤的分子机理研究[A];第十一次中国生物物理学术大会暨第九届全国会员代表大会摘要集[C];2009年

5 韩婧;李学军;;姜黄素通过诱导人内皮细胞产生自噬抗氧化应激损伤[A];全国第十二届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2011年

6 方朝晖;鲍陶陶;章小平;;2型糖尿病中医辨证与氧化应激损伤相关性的研究[A];第九次全国中医糖尿病学术大会论文汇编[C];2006年

7 张铭;陈怀生;杨大春;曾智;余敏;;同型半胱氨酸对血管内皮细胞的氧化应激损伤及对IL-8分泌的影响[A];全国第九届心脏学会第十二届心功能学会《心脏杂志》编委会联合学术会议论文集[C];2005年

8 王艳霞;刘仪;张伟;韩东宁;张源淑;;血管紧张素转化酶2(ACE2)对大鼠肾氧化应激损伤的保护作用及其机制[A];中国生理学会消化内分泌生殖代谢生理专业委员会2011年消化内分泌生殖学术会议论文摘要汇编[C];2011年

9 张婷;王凡;朱俊东;易龙;付钰洁;糜漫天;;染料木黄酮对人血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用[A];重庆市营养学会学术会议论文汇编[C];2010年

10 齐华林;王俊;江薇;严海东;;瘦素在诱导血管内皮细胞氧化应激损伤中的作用[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年

相关重要报纸文章 前3条

1 张中桥;复方丹参注射液对EPC氧化应激损伤有保护作用[N];中国中医药报;2007年

2 记者 衣晓峰;我国首设中医神志病学博士后科研工作站[N];中国中医药报;2014年

3 张中桥;复方丹参注射液对内皮前体细胞氧化应激损伤有保护作用[N];中国医药报;2006年

相关博士学位论文 前10条

1 孔宁;下调miR-100对RGC-5的作用及相关机制研究[D];南方医科大学;2015年

2 贾济;神经元还原稳态减轻氧化应激损伤的新机制[D];第四军医大学;2015年

3 徐建雄;不同断奶日龄仔猪的氧化应激损伤及其机理研究[D];南京农业大学;2014年

4 关鑫磊;内源性小分子二甲基硫醚对氧化应激损伤的作用及机制研究[D];华中科技大学;2015年

5 李扬雪;MiR-210在过氧化氢诱导大鼠心肌细胞氧化应激损伤中的作用及其机制研究[D];吉林大学;2016年

6 伟伟;基于调节SIRT1维生素C保护视网膜色素上皮免受氧化应激损伤[D];武汉大学;2014年

7 刘静;氧化应激损伤在赭曲霉毒素A诱导细胞周期阻滞中的作用及其可能机制的研究[D];河北医科大学;2012年

8 易龙;黄酮类植物化学物抑制内皮细胞氧化应激损伤的结构—效应关系研究[D];第三军医大学;2010年

9 张立超;抗氧化剂在梗阻性黄疸大鼠中枢神经系统氧化应激损伤中的应用研究[D];河北医科大学;2015年

10 符晓华;含二氟亚甲基异黄酮类化合物的合成及抗血管内皮氧化应激损伤活性测定[D];中南大学;2006年

相关硕士学位论文 前10条

1 周浩;Exendin-4减轻脂肪来源间充质干细胞氧化应激损伤的机制研究[D];中国人民解放军医学院;2015年

2 李贞;枸杞多糖对视网膜神经节细胞氧化应激损伤的保护作用[D];宁夏医科大学;2015年

3 张亚卓;小麦低聚肽对体外氧化应激损伤肠上皮细胞保护作用及其机制的探讨[D];河北农业大学;2015年

4 宋少练;芍药苷对晚期氧化蛋白产物诱导人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的干预作用[D];南方医科大学;2015年

5 王晓燕;干扰小分子蛋白Sulfiredoxin-1对大鼠星形胶质细胞氧化应激损伤影响的初步研究[D];重庆医科大学;2015年

6 周思蕾;RACK1对肝细胞基本功能以及肝细胞氧化应激损伤的影响[D];河南大学;2015年

7 余贵泉;可变铁池：细胞氧化应激损伤与心血管疾病[D];重庆医科大学;2015年

8 夏宁;肝再生增强因子在细胞线粒体氧化应激损伤中的作用研究[D];重庆医科大学;2015年

9 王笑宇;龙血素A抗心肌细胞氧化应激损伤的研究[D];大连医科大学;2015年

10 张晗;新型壳聚糖-Trolox纳米颗粒对于过氧化氢诱导SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的保护作用与机制研究[D];吉林大学;2016年

本文编号：2570933