利用Label-free蛋白质组学鉴定雄激素调控鹿茸再生的关键调控因子

发布时间：2020-03-21 08:38

【摘要】：背景:鹿茸是唯一可以完全再生的哺乳动物附属器官,其每年基于角柄骨膜(PP)细胞的增殖与分化周期性再生。PP由生茸区骨膜(AP)发育而来的,AP主要存在于仔公鹿额外脊处,移植AP到鹿体上的其他部位时可以诱导异位鹿茸形成。PP根据其与皮肤接触的紧密程度,分为致敏区和休眠区,致敏区与紧覆于其上的皮肤相互作用,使鹿茸干细胞发育成完整的鹿茸。因此,致敏区与休眠区差异蛋白质组必定于再生过程中起重要作用。鹿茸为研究哺乳动物的器官再生提供了绝佳的模型。先前的研究表明,PP细胞开始鹿茸的再生是由睾酮(T)的减少引发的。睾酮水平对角柄的生长有积极作用,但对鹿茸的生长有负面影响。方法:两只公鹿,每隔两周定时采集血样。在第一次采血后进行阉割,然后比较鹿茸再生前后的睾酮水平。给一只鹿施用外源睾酮,另外一只则作为对照。在鹿茸发起再生前收集致敏区PP和休眠区PP组织,使用放射免疫测定法分析雄激素水平,然后用Label-free方法检测差异蛋白质点,进行质谱分析以获得肽质量指纹印迹。通过Kobas.3等软件探索蛋白质的信号转导途径。最后用qRTPCR法验证一些关键的差异表达蛋白(DEPs)。结果:在再生与非再生组共检测到2956个差异表达蛋白。在再生组中,有243种显著上调,98种显著下调;有2615种在两组中并未达到显着水平。我们通过KEGG(P0.05)鉴定了与雄激素相关的信号转导途径,例如雌激素信号转导途径,内质网蛋白质加工和焦点粘连等。DEPs的Gene Ontology(GO)注释分为生物过程、细胞成分和分子功能。在所有这些GO-term注释中,我们根据差异显著性排名选择显示前十位(P0.05)。讨论:睾酮可能在鹿茸再生中发挥了关键作用。发现一些鉴定的DEP和信号传导途径与雄激素有关,雄激素可能参与鹿茸再生。鹿茸作为生物医学研究模型,对其再生过程进行各个层面(发育、细胞更新和修复机制)的探索,会对人类组织和器官的疾病或损伤有很大的益处。
【学位授予单位】：中国农业科学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S825

【相似文献】