硒缺乏对鸡树突状细胞成熟分化及功能的影响

发布时间：2020-04-08 16:19

【摘要】：硒是动物机体中重要的的微量营养元素,它能参与动物机体内多种生物学功能,主要参与动物机体内的免疫调节、肌肉代谢、生殖、氧化还原反应、延缓衰老、细胞分化等多种功能。硒对免疫系统具有多方面的重要作用,有研究表明硒缺乏能够导致人、鼠、鸡等多种动物的免疫组织发育迟缓或免疫反应异常,还会抑制免疫细胞活性降低,削弱机体非特异性免疫、细胞免疫和体液免疫的功能。树突状细胞是目前已知抗原提呈功能最强的免疫细胞,它连接了先天免疫和适应性免疫。树突状细胞摄取不同类型的抗原,通过细胞的吞噬将特异性的靶位暴露出来,未成熟树突状细胞不具有抗原提呈功能只能吞噬抗原,成熟的树突状细胞在淋巴结和脾脏中能够特异性的呈递抗原。此外,成熟树突状细胞能够特异性的刺激幼稚T细胞,使其增殖分化,所以树突状细胞的成熟分化就显得十分重要。目前硒对鸡树突状细胞在成熟分化及免疫功能中的作用尚不清楚。本试验在复制缺硒肉鸡模型的基础上,分析硒缺乏与树突状细胞成熟分化及免疫功能的相关性,明确硒在树突状细胞成熟分化及功能中的作用。结果表明:1.在复制缺硒鸡模型的基础上,成功诱导出鸡外周血源树突状细胞,通过镜下超微结构观察发现诱导培养的细胞具备树突状细胞典型特点;2.通过检测树突状细胞表面标志CD11c鉴定鸡外周血源树突状细胞的纯度,同时经过流式细胞术分析正常及低硒状态下树突状细胞免疫标志MHC II,CD40,CD86表达情况,证明硒缺乏抑制了树突状细胞的抗原提呈能力;3.通过脾脏混合淋巴细胞的提取后,我们分离了T淋巴细胞,同时检测了正常及低硒状态下树突状细胞对T细胞的刺激能力,结果证明硒缺乏抑制了树突状细胞促T细胞增殖能力;4.应用ELISA及实时荧光定量PCR检测了树突状细胞分泌IL-10、IFN-γ、IL-12p40的能力,以及细胞中IL-10、IFN-γ、IL-12p40的含量,证实硒缺乏诱导Th1/Th2平衡的飘移;5.应用实时荧光定量PCR检测树突状细胞中21种硒蛋白的表达情况,缺硒使得硒蛋白的表达下降。6.通过主成分分析得出,SelW、SelI、Sepx-15、Gpx1与树突状细胞表面标志具有较高的向关性综上所述,本研究发现缺硒抑制了树突状细胞的成熟分化及免疫功能,这可能与SelW、SelI、Sepx-15、Gpx1表达的下降有着密切联系。本研究为进一步研究硒缺乏对树突状细胞的作用机制奠定了基础,也为比较医学提供借鉴。
【图文】：

形态学特点,树突状细胞,树突细胞,表面标志

3 d 6 d 9 d图 3-1 不同时间点鸡树突状细胞形态学特点Figure 3-1 Morphological characteristics of chicken DCs at different culture times.1.2 不同时间点树突细胞表面标志变化

树突状细胞,表面标志,形态学比较,细胞形态学

图 3-2 不同时间点两组鸡树突状细胞表面标志表达情况-2 Expression of chicken DCs surface markers at different time points in tw树突状细胞形态学比较观察不同时间点各组细胞形态学变化。试验以外周血单核细胞为诱导前体
【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S852.4

【参考文献】