苘麻叶总黄酮对小鼠急性肺损伤的保护作用
发布时间：2020-04-24 16:57
【摘要】：急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是由多种因素导致的上皮细胞及毛细血管内皮细胞损伤,其典型的病理变化是弥漫性肺间质和肺泡水肿,临床症状主要表现为低氧性呼吸功能不全,病情严重时死亡率可达到50%。临床上主要采用抑制炎症因子、改善氧合、纠正缺氧等治疗方案。近年来,也有研究表明中药具有较好的缓解和治疗ALI的作用,且治疗效果较为理想。黄酮类化合物是一类广泛存在于多种中药中的活性成分,具有降压、改善血管微环境、抗氧化、抗菌、抗炎等药理作用。苘麻为锦葵科苘麻属一年生草本植物,其叶中含有较丰富的黄酮类化合物。本研究将以苘麻叶总黄酮(Total flavonoids of Abutilon theophrasti Medic.Leaves,TFE)为试验对象,采用LPS诱导的小鼠急性肺损伤炎症模型,研究苘麻叶总黄酮的体内抗炎作用。试验中采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠肺组织匀浆上清液中PGE_2的含量及小鼠肺灌洗液(BALF)中TNF-α、IL-6、IL-10及IL-1β的含量,采用Griess法检测小鼠肺组织匀浆上清液中NO的含量,评价TFE对炎症因子和炎症介质分泌的影响;应用荧光定量PCR法考察TFE对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶2(COX-2)及炎症信号通路中ERK1/2、p38α、p65、JNK和IκB的mRNA水平的影响;应用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测TFE对炎症介质和炎症信号通路中iNOS、COX-2、ERK1/2、p38α、p65、JNK和IκB蛋白水平的影响。试验结果表明,TFE极显著地降低了LPS诱导小鼠急性肺损伤产生的NO、PGE_2、TNF-α、IL-6及IL-1β的含量,同时极显著增加了IL-10的含量;在基因水平上,TFE显著地降低iNOS、COX-2、ERK1/2、p38α、p65、JNK的表达量,同时增加了IκB的表达量;在蛋白水平上,苘麻叶总黄酮显著降低了COX-2的表达量并且极显著抑制ERK1/2、p38α、p65、JNK蛋白的磷酸化。研究证实TFE通过降低LPS诱导的急性肺损伤肺小鼠肺组织灌洗液中炎症因子(TNF-α,IL-6和IL-1β)和炎症介质(NO、PGE_2)的含量直接发挥抗炎作用;同时还通过降低iNOS、COX-2 mRNA水平和蛋白水平发挥抗炎作用;在调控信号通路方面,通过调控IκB和p65的mRNA水平和蛋白磷酸化水平,从而抑制LPS诱导的NF-κB信号转导通路的激活;应一方面TFE也通过抑制ERK1/2、JNK和p38的mRNA水平和蛋白磷酸化水平,阻止MAPK信号转导通路的激活。综上所述,本研究通过采用小鼠急性肺损伤模型,较为全面地评价了TFE的体内抗炎作用,并进一步揭示了TFE可以通过调控NF-κB和MAPK两条信号转导通路抑制炎症因子的表达,发挥抗炎效果,为兽医临床有效防治炎症提供了参考,为绿色兽药的研发提供了新的思路。
【图文】：
图 1-3 TFE 对 ALI 小鼠的最适作用浓度筛选结果Fig. 1-3 The result of the optimum concentration TFE in ALI mice3 可知，苘麻叶总黄酮提取物处理浓度为 250、500、1000mg/kg.b.w 时，TN量依赖性，随着药物浓度增加，TNF-α 含量降低。 HE 染色结果ikawar 等（Mikawar K.et al.，，2003）的方法对以下各组肺组织病理切片对照组小鼠肺组织形态完整，肺泡壁薄，有极少的炎症细胞浸润，肺泡 A）；LPS 对照组组小鼠肺组织结构模糊，肺泡腔内可见大量炎症细胞浸完整，肺部炎症明显为“+++”级（图 B）；苘麻叶总黄酮高剂量组肺部炎少量炎症细胞浸润为“+”级（图 C）；苘麻叶总黄酮中、低剂量组肺部炎显为“++”级（图 D 和 E）；阳性对照组小鼠肺组织结构完整，与空白对炎症细胞为“一”（图 F）。
图 1-3 TFE 对 ALI 小鼠的最适作用浓度筛选结果Fig. 1-3 The result of the optimum concentration TFE in ALI mice3 可知，苘麻叶总黄酮提取物处理浓度为 250、500、1000mg/kg.b.w 时，TN量依赖性，随着药物浓度增加，TNF-α 含量降低。 HE 染色结果ikawar 等（Mikawar K.et al.，2003）的方法对以下各组肺组织病理切片对照组小鼠肺组织形态完整，肺泡壁薄，有极少的炎症细胞浸润，肺泡 A）；LPS 对照组组小鼠肺组织结构模糊，肺泡腔内可见大量炎症细胞浸完整，肺部炎症明显为“+++”级（图 B）；苘麻叶总黄酮高剂量组肺部炎少量炎症细胞浸润为“+”级（图 C）；苘麻叶总黄酮中、低剂量组肺部炎显为“++”级（图 D 和 E）；阳性对照组小鼠肺组织结构完整，与空白对炎症细胞为“一”（图 F）。
【学位授予单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S853.74
【图文】：
图 1-3 TFE 对 ALI 小鼠的最适作用浓度筛选结果Fig. 1-3 The result of the optimum concentration TFE in ALI mice3 可知，苘麻叶总黄酮提取物处理浓度为 250、500、1000mg/kg.b.w 时，TN量依赖性，随着药物浓度增加，TNF-α 含量降低。 HE 染色结果ikawar 等（Mikawar K.et al.，，2003）的方法对以下各组肺组织病理切片对照组小鼠肺组织形态完整，肺泡壁薄，有极少的炎症细胞浸润，肺泡 A）；LPS 对照组组小鼠肺组织结构模糊，肺泡腔内可见大量炎症细胞浸完整，肺部炎症明显为“+++”级（图 B）；苘麻叶总黄酮高剂量组肺部炎少量炎症细胞浸润为“+”级（图 C）；苘麻叶总黄酮中、低剂量组肺部炎显为“++”级（图 D 和 E）；阳性对照组小鼠肺组织结构完整，与空白对炎症细胞为“一”（图 F）。
图 1-3 TFE 对 ALI 小鼠的最适作用浓度筛选结果Fig. 1-3 The result of the optimum concentration TFE in ALI mice3 可知，苘麻叶总黄酮提取物处理浓度为 250、500、1000mg/kg.b.w 时，TN量依赖性，随着药物浓度增加，TNF-α 含量降低。 HE 染色结果ikawar 等（Mikawar K.et al.，2003）的方法对以下各组肺组织病理切片对照组小鼠肺组织形态完整，肺泡壁薄，有极少的炎症细胞浸润，肺泡 A）；LPS 对照组组小鼠肺组织结构模糊，肺泡腔内可见大量炎症细胞浸完整，肺部炎症明显为“+++”级（图 B）；苘麻叶总黄酮高剂量组肺部炎少量炎症细胞浸润为“+”级（图 C）；苘麻叶总黄酮中、低剂量组肺部炎显为“++”级（图 D 和 E）；阳性对照组小鼠肺组织结构完整，与空白对炎症细胞为“一”（图 F）。
【学位授予单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S853.74
【参考文献】
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5 冯伟;张p苊
本文编号：2639174
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