一四二团规模化猪场PRDC相关的四种病毒性疾病的流行病学调查

发布时间：2020-05-07 12:01

【摘要】：PRDC是猪呼吸道疾病综合征的缩写,是一种由多因子引起的疾病,主要是由病毒、细菌、支原体、寄生虫、不良的饲养管理条件及易感动物的免疫水平等多种综合因素相互作用引起的疾病症候群。本题通过研究石河子市一四二团11个规模化猪场4种PRDC相关的病毒病,在猪群中的免疫抗体水平、野毒感染抗体情况及病料组织中病原检测的情况,了解石河子市一四二团规模化猪场这四种病的流行特点,可进一步促进石河子市一四二团生猪规模化养殖场PRDC的防控,为顺利实现国家中长期动物疫病防控目标提供理论支持。为石河子市一四二团生猪规模化养殖场有效防控猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪瘟、猪伪狂犬、猪圆环病毒病提供参考依据。本题于2015年-2016年间通过对石河子市一四二团11个规模化猪场的走访调查,详细了解11个规模化猪场的建场时间,饲养情况、发病情况及死亡情况,并分别采集健康猪群5个不同年龄阶段的血清样本455份,采集患病或疑似患病猪群4个不同年龄阶段的血清样本297份,使用ELISA方法进行PRRSV、CSFV、PRV-gB/gE和PVC-2的抗体检测。采集猪群组织样本149份,使用PCR和RT-PCR的技术方法,进行PRRSV、CSFV、PRV和PVC-2这4种抗原的检测。并利用现有的PCR技术,分别设计合成PRRSV、CSFV、PRV和PCV2的特异性引物,构建多重PCR技术,通过血清学检测结果分析:健康猪群的各抗体的阳性率分别是87.25%、91.87%、47.69%、23.29%和18.9%,而患病猪群的各抗体的阳性率分别是91.25%、97.64%、58.59%、29.97%和24.92%。表明了猪繁殖与呼吸障碍综合征和猪瘟免疫抗体均达到了国家要求的水平,而猪伪狂犬免疫效果较差,一四二团使用的PRV疫苗为gE缺失苗,并且未进行PCV2的免疫,因此表明一四二团规模化猪场中伪狂犬和圆环2型病毒野毒感染情况较严重;通过对患病动物与健康动物抗体检测结果进行对比,患病动物各阶段的抗体阳性均大于健康动物,因此表明一四二团各规模场中普遍存在这四种病原的野毒感染。通过病原学检测结果分析:11个规模化猪场,有10个为PRDC阳性场,在采集的149份组织病料中检出PRDC阳性样品107份,阳性率为71.81%,其中单独或者混合感染PRRSV、CSFV、PRV和PCV-2的阳性率分别为57.05%、26.17%、34.90%和39.60%。从感染的类型上看,107份阳性样品中,仅有25份为单纯感染,占23.36%,混合感染82份,占76.64%。从混合感染的类型上看,在82份混合感染的样品中,两种病原共同侵染的组织病料48份,占58.53%,三种病原共同侵染的组织病料22份,占26.83%,上述四种病原共同存在的组织病料12份,占14.63%。从检测结果来看一四二团规模化猪场的RPDC感染情况较为严重,主要遭受病毒侵染的模式为两种病毒的共同侵染,尤其是PRRSV+PRV和PRRSV+PCV2的共同侵染。构建的PRDC相关的4中病毒病的多重PCR快速检测方法,通过特异性试验,敏感性试验和一致性试验,证实了构建的这种快速诊断方法,完全适用于与PRDC相关的PRRSV、CSFV、PRV和PCV2四种病毒病的病原的快速诊断及流行病学调查。并对142团11个规模化猪场2015-2016年间采集的149份组织样品进行检测,其结果与单重PCR检测的结果一致,表明一四二团规模化猪场的PRDC感染情况较为严重,只要表现为PRRSV+PRV和PRRSV+PCV2的二重感染。通过对石河子市一四二团11个规模化猪场进行血清抗体检测、病原学检测及使用多重PCR技术进行检测,结果表明石河子市一四二团11个规模化养殖场PRRSV和CSFV的免疫抗体合格,PRV免疫抗体不合格,且四种病原存在着野毒感染的情况,且主要是PRRSV+PRV和PRRSV+PCV2的二重感染。
【图文】：

示意图,基因组结构,模式,示意图

1951 年成功研制出了猪瘟病毒灭活苗，1954 年又成功研制出了 54-Ⅲ系猪瘟兔化弱毒的猪瘟脾淋源疫苗，成功的控制住了猪瘟疫情。2.2.1 猪瘟病原学特性CSF 的病原是 CSFV（Classical swine fever virus，CSFV），是一种外层有囊膜结构的单条正旋链的 RNA 病毒，国际病毒分类委员会上将 CSFV 定义为黄病毒科瘟病毒属与 CSFV 同属一科的病毒还有 BVDV， BDV 以及暂定为瘟病属的一些病毒[23]。早在1833 年就在美国发现了 CSF，但是一直被认为 CSF 的病原是细菌，直到 1903 年美国科学家 Alexander deSchwernitz 和 Marion Dorset 通过 6 年的实验终于证实了 CSF 的病原体不是细菌而是 RNA 病毒。CSFV 形态特征。CSFV 病毒粒子为球形，大小为 40-60nm，表面有 3nm 厚的囊膜内部是 CSFV 的核衣壳，呈对称的二十面体，直径为 30nm。病毒粒子表面具有 6-8nm的流苏样结构，通过电镜观察，CSFV 与其它瘟病毒的形态结构一致，很难分辨。CSFV 基因组结构。CSFV 的核心 RNA 长度为 12.3kb，仅有一个很大的 ORF，编码 3898 个氨基酸[24]，其基因组顺序为 5 NTR-ORF-3 NTR。即从 5 开始依次是一个 373 个碱基的非编码区，其后是一个编码含有 3898 个氨基酸的 4 个结构蛋白、8 个非结构蛋白的开放阅读框，最后是 243 个碱基的 3 端非编码区。

模式图,粒子结构,模式图,蛋白

图 1-4：CSFV 粒子结构模式图Fig.1-4 Schematic diagram of the genome organization of CSFV（1）Npro 蛋白Npro 蛋白分子量为 23kD，包含 168 个氨基酸。 Npro 蛋白相对于保守，，通过研究发现，瘟病毒属成员中氨基酸序列的对比发现，基因序列的同源性大于 70%。Npro 基因是一种毒力相关因子，但是却不能对 CSFV 毒株的毒力起到决定作用。Npro 蛋白能够对参与 INF-ａ/β 转录的干扰素调节因子 3（IRF-3）起到抑制作用，拮抗 IFN-ａ/β 的产生[45]。（2）C 蛋白C 蛋白也叫做 P14 蛋白，是核心蛋白，为 CSFV 的衣壳蛋白，是 CSFV 编码的第一个结构蛋白，分子量为 14kD，含有 98 个氨基酸。C 蛋白的关键部分非常保守，主要具有保护 RNA 和转录调节的作用。（3）Erns 蛋白Erns 蛋白曾经被称为是 E0 蛋白，是一种高度糖基化蛋白，有 9 个糖基化位点，其分子量为 44-48kD，含有 227 个氨基酸。含有二硫键，通过二硫键的链接，可以形成同源二聚体，其二聚体的分子量为 97kD。Erns 蛋白具有 RNA 酶活性，能够降解病毒和细
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S858.28

【参考文献】