蓝刺头多糖B对INS-1细胞氧化损伤、凋亡及胰岛素分泌影响的研究

发布时间：2020-05-08 00:26

【摘要】：前期试验证明蓝刺头多糖B(ETPB),对糖尿病模型动物具有改善胰腺损伤,提高胰岛素分泌、改善胰岛素抵抗的作用。本试验通过培养INS-1胰岛β细胞,探究ETPB直接作用于胰岛β细胞,对细胞氧化损伤、凋亡及胰岛素分泌功能的影响及机理;为ETPB对2型糖尿病防控的相关研究提供理论依据。结果显示:1、ETPB使用MTT法确定最大安全浓度为250μg/mL,ETPB作用48h后与H_20_2模型组相比可提高细胞存活率(P0.05);提高SOD活性(P0.05),降低MDA含量(P0.05)。2、ETPB处理后进行AO-EB染色,ETPB组凋亡细胞少于模型组;使用RT-qPCR检测mRNA表达,ETPB可提高Bcl-2表达(P0.05),降低Bax表达(P0.05)。使用Western Blot检测相关蛋白表达,ETPB可提高Bcl-2表达,降低Bax、Cytc、caspase-3表达。3、ETPB处理后使用放射免疫检测胰岛素分泌量,可提高葡萄糖刺激胰岛素分泌量,其中对正常糖浓度培养BIS效果明显,对高糖浓度培养GSIS效果明显;可提高mRNA水平PDX-1、IRS-2表达。结论:1、ETPB可通过提高SOD活性、降低MDA含量起到保护INS-1细胞氧化损伤的作用。2、ETPB可通过调控线粒体凋亡通路相关基因从而抑制由H_20_2引起的细胞凋亡。3、ETPB可促进INS-1细胞胰岛素分泌,提高PDX-1、IRS-2表达。
【图文】：

mol/L） - 100μL 100μL - 液 200μL 200μL 行重复性实验，所得结果以 x±s 表示。采用 SP用单因素方差分析，组间差异进行多重比较，不显著。形态 1，形状不规则，，贴壁集聚生长，呈现连接成片光性好，周围出现光晕，与 INS-1 细胞相关研究

图 2 不同浓度 H202对 INS-1 细胞活性的影响Fig.2 The effect of different concentrations of H202on the activity of NS-1 cells ETPB 对 H202损伤 INS-1 细胞保护作用的结果图 3、图 4 可知，与空白组相比模型组在 24h、48h 均可抑制细胞增殖P<0.05），与 2.3.3 试验结果相符。ETPB 作用 24h 与模型组相比 25/mL、62.5μg/mL，可促进细胞增殖，差异显著（P<0.05）；31.3μg/mL、15.mL、3.9μg/mL、1.9μg/mL，可促进细胞增殖，差异不显著（P>0.05）。 与模型组相比 250g/mL、125μg/mL、3.9μg/mL、1.9μg/mL，可促进细显著（P>0.05）；62.5μg/mL、31.2μg/mL、15.6μg/mL、7.8μg/mL，可促差异显著（P<0.05）。果表明 ETPB 具有保护细胞由 H2O2造成细胞活性降低的作用；作用 250g/mL、125μg/mL、62.5μg/mL，效果明显；作用 48h 较低浓度 62./mL、15.6μg/mL、7.8μg/mL 作用明显；具有一定的剂量、时间依赖性 62.5μg/mL、31.2μg/mL、15.6μg/mL、7.8μg/mL 作用 48h 为后续试验条
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S853.74

【参考文献】

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本文编号：2653796