LPS致雏鸡炎症模型的建立及其应用初探

发布时间：2020-06-15 12:28

【摘要】：目的:LPS作为G~-菌的重要致病因子之一,常常引起动物疾病的发生,目前已在哺乳动物方面有大量研究,能导致动物急性肺损伤以及肝、肾等组织功能障碍进而引起内毒素血症造成动物死亡;但在禽类的研究少有报道且主要围绕引起动物体温变化及局部组织病变和炎性因子的影响。而导致禽类致炎甚至死亡的研究报道就更少,是禽类对LPS的耐受,还是不敏感?为此本试验尝试建立LPS致雏鸡的炎症模型,探究LPS对禽类的致病性及致炎条件。方法:取1日龄肉公雏180只,分为空白对照组(K)、LPS组(L)、血凝酶组(N)、血凝酶+LPS组(N+L),每组15只并设3个重复。K组腹腔注射无菌生理盐水;N组颈静脉注射250 U·kg~(-1)血凝酶;L组腹腔注射10 mg·kg~-11 LPS;N+L组颈静脉注射250U·kg~(-1)血凝酶15 min后腹腔注射10 mg·kg~-11 LPS,0.2 mL/只。实时观察注射后24h内各组雏鸡的临床症状;分别测量0、1、3、6、12、24 h的直肠温度;于24 h后收集血液作白细胞计数和细胞因子(TNF-ɑ、IL-1β、IL-6、IL-8、NO)检测;颈部放血处死后观察雏鸡解剖病理变化,同时取心、肝、脾、肺、肾组织固定制作病理切片观察病理学变化,综合评价炎症模型。并应用市售抗炎药地塞米松对动物模型进行治疗,从临床症状和组织病变等指标进行疗效评价。结果:24 h内K、N组雏鸡状态无明显变化;L组部分雏鸡在6 h内饮食下降、精神沉郁等,6h后恢复正常;N+L组雏鸡在12 h内饮食明显下降甚至无饮食欲,精神沉郁、扎堆、嗜睡等,24 h内有20%左右雏鸡死亡,剖解变化主要是腹腔有大量红黑色组织液渗出。24 h内K、N组雏鸡温度维持平衡,L、N+L组于注射后1 h温度下降,3 h上升达最大值后逐渐下降至正常。白细胞计数显示K组显著高于N、L、N+L组(P0.05)。ELISA检测结果显示,N、L、N+L组雏鸡分泌的TNF-α、IL-6、IL-8含量均极显著高于K组(P0.01);N、N+L组雏鸡分泌的IL-1β含量显著或极显著高于K组(P0.05,P0.01),L与K组差异不显著(P0.05);L、N+L组雏鸡分泌的NO含量极显著高于K组(P0.01),N组含量低于K组且无显著性差异(P0.05)。剖解结果显示N+L组雏鸡的肝脏及部分其他组织呈明显出血现象,其他组未见异常。HE染色结果显示:N+L组雏鸡的心、肝、脾、肺、肾组织间均可见明显血细胞增多且有溶血现象,组织内有少量渗出物浸润。模型应用结果显示:注射后24 h内与K组相比M组出现了明显临床症状,72 h炎性因子含量增加,剖解见腹腔及肝脏等的出血症状;而Y组较M组均有好转。结论:用LPS单独刺激雏鸡未能建立理想的炎症感染模型,但在血凝酶的辅助下刺激雏鸡可获得重复性较好的病理模型,用阳性药地塞米松治疗模型显示症状有所改善,提示血凝酶在雏鸡炎症方面具有重要作用,但LPS和血凝酶对雏鸡的具体作用机制有待进一步深入研究和验证。
【学位授予单位】：贵州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S858.31
【图文】：

组别 TNF-α IL-1β IL-6 IL-8 NOK 118.71±1.04 846.39±29.20 24.48±0.85 108.18±3.24 24.14±0.92N 258.40±11.61**1080.88±44.51*105.71±3.38**382.80±13.58**17.37±0.87L 158.14±3.77**918.60±16.66 94.55±0.83**405.42±1.97**88.38±0.75**N+L 205.63±4.44**1565.81±0.98**112.49±1.29**427.37±3.94**136.82±1.86**3.3.5.1 血浆 TNF-α检测结果将 0，5，10，20，40，80 pg·mL-1鸡 TNF-α标准溶液的检测结果以标准物浓度为横坐标，测得的吸光值△OD 为纵坐标，制作鸡炎症因子 TNF-α标准曲线（见图 9A），得到直线回归方程：y=0.0116x+0.0234，R2=0.9968。由标准曲线计算鸡血浆中炎性因子 TNF-α含量，结果显示：与 K 组相比，N、L、N+L 组雏鸡分泌的 TNF-α含量均极显著升高（P<0.01），但 N 组分泌量显著高于 L、N+L组（P<0.05），见图 9 B。AB

贵州大学 2019 届专业硕士研究生学位论文3.3.5.2 血浆 IL-1β检测结果将 0，40，80，160，320，640 pg·mL-1鸡 IL-1β标准溶液的检测结果以标准物浓度为横坐标，测得的吸光值△OD 为纵坐标，制作鸡炎症因子 IL-1β标准曲线（见图 10A），得到直线回归方程：y=0.002x+0.0706，R2=0.9941。由标准曲线计算鸡血浆中炎性因子 IL-1β含量，结果显示：与 K 组相比，N 组雏鸡分泌的IL-1β显著升高（P<0.05），N+L 组分泌量极显著升高（P<0.01），L 组无显著性差异（P>0.05），见图 10 B。AB

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 姜牧君;陈育华;屈晓龙;葛波波;屈洪党;;LPS诱导慢性帕金森病小鼠模型的建立与评价[J];解剖学研究;2016年05期

2 刘音;刘硕;王文蝶;朱军;陈朱波;姜明红;;利用流式细胞术检测LPS刺激活化后小鼠腹腔巨噬细胞体积的变化[J];基础医学与临床;2014年06期

3 白鑫宇;杨晓峰;赵叶利;李盈;李建春;;金丝桃苷对内毒素(LPS)诱导的小鼠急性肾损伤的保护作用[J];沈阳药科大学学报;2014年10期

4 方慧;李霞;孙立娟;薛明胜;王翔宇;;羧甲基壳聚糖对LPS干预人牙周膜成纤维细胞表达IL-6的影响[J];临床口腔医学杂志;2013年11期

5 刘利本;平家奇;刘婧陶;张雪梅;;蒲公英提取物对LPS激活小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子分泌的影响[J];动物医学进展;2011年02期

6 刘建强;;LPS诱导的炎症反应对脑动脉瘤形成和破裂引起出血的影响[J];医学理论与实践;2017年16期

7 高厚明;刘志承;石巧玲;冯四林;;厚朴酚改善LPS诱导的小鼠抑郁行为和大脑细胞因子的研究[J];中医药通报;2016年02期

8 方慧;李霞;孙立娟;;羧甲基壳聚糖对LPS干预人牙周膜成纤维细胞表达PGE2的影响[J];临床口腔医学杂志;2015年05期

9 王长文;马洪波;张铎;赵文秀;;茶多糖对LPS活化单核巨噬细胞内活性氧的影响[J];中国兽医杂志;2014年03期

10 喻良文;黄晓其;钟燕珠;;银翘散对LPS致急性肺损伤小鼠的保护作用[J];四川中医;2014年05期

相关会议论文 前10条

1 申静;刘艳利;李雪媛;梁赛赛;姚军虎;杨小军;;曲古抑菌素对LPS刺激的肉鸡PBMC促炎性细胞因子表达的影响[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十二次动物营养学术研讨会论文集[C];2016年

2 孙海林;殷超;黄燕平;赵茹茜;杨晓静;;LPS处理对猪背最长肌能量代谢的影响[A];中国畜牧兽医学会动物福利与健康养殖分会成立大会暨首届规模化健康与福利养猪高峰学术论坛论文集[C];2015年

3 何文喜;Cooper PR;Anthony J.Smith;;LPS对牙本质涎磷蛋白基因表达调控的研究[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];2009年

4 李鹤;程广东;赵玉莲;吴越;李贤贤;李艳华;;连翘酯苷对LPS诱导的肉鸡肝脏急性炎症反应的作用[A];中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议论文集[C];2012年

5 关爽;熊瑛;宋博翠;宋宇;王大成;初晓;陈娜;邓旭明;卢静;;红景天苷对LPS-诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用研究[A];中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议论文集[C];2012年

6 周捷;;脆弱类杆菌脂多糖(LPS)对正常人外周血单个核细胞分泌IL-10及凋亡的影响[A];全国危重烧伤患者早期复苏对策专题研讨会论文汇编[C];2005年

7 周捷;黄晓元;;脆弱类杆菌脂多糖(LPS)对正常人外周血单个核细胞分泌IL-10及凋亡的影响[A];第四届全国烧伤救治专题研讨会烧伤感染救治新进展论文汇编[C];2006年

8 ;Regulation of function of lipopolysaccharide(LPS)-activated dendritic cells by salmeterol[A];中华医学会呼吸病学年会——2011（第十二次全国呼吸病学学术会议）论文汇编[C];2011年

9 苏芸;辛岗;谢泽锋;李康生;;LPS预激对大脑皮质星形胶质细胞免疫功能的影响[A];第八届全国免疫学学术大会论文集[C];2012年

10 申静;武圣儒;郭伟;李世召;姚军虎;杨小军;;蛋氨酸和叶酸对LPS刺激的肉鸡PBMC促炎性细胞因子表达的影响[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十二次动物营养学术研讨会论文集[C];2016年

相关重要报纸文章 前1条

1 记者 赵姝婧;邵峰实验室发文发现细菌LPS合成的前体庚糖分子可被宿主新型免疫受体激酶ALPK1识别，进而激活宿主天然免疫反应[N];新清华;2018年

相关博士学位论文 前10条

1 邱振宇;莫西沙星对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应的影响与机制研究[D];中国医科大学;2018年

2 王荣梅;LPS、日粮磷及维生素D水平对蛋鸡FGF23和磷转运体表达的影响[D];山东农业大学;2017年

3 刘伟;肾上腺髓质素对LPS抑制人脐静脉内皮细胞TFPI基因表达的影响及其分子机制[D];中国协和医科大学;2007年

4 赵素贤;原发性胆汁性肝硬化（PBC）临床病理特点及LPS在其发病中作用的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年

5 伞治豪;蒲公英甾醇对LPS诱导的乳腺炎抗炎作用及调节机制研究[D];吉林大学;2014年

6 高源;大黄酸在LPS活化巨噬细胞中发挥抗炎与促炎双向作用的机制研究[D];北京协和医学院;2014年

7 陈玲;LPS刺激的奶牛乳腺上皮细胞转录组和miRNA表达谱变化规律的研究[D];西北农林科技大学;2016年

8 金鹏锋;益生菌对LPS诱导的小鼠肝损伤和炎症因子表达的影响作用及机制研究[D];浙江大学;2015年

9 邢金燕;辛伐他汀对LPS诱导内皮祖细胞功能的影响[D];山东大学;2011年

10 郭建红;多次小剂量LPS处理减轻慢性肝损伤的机制研究[D];山西医科大学;2010年

相关硕士学位论文 前10条

1 李天珍;LPS致雏鸡炎症模型的建立及其应用初探[D];贵州大学;2019年

2 侯凌云;儿童下呼吸道菌群多样性和LPS对哮喘小鼠辅助性T细胞分化的影响[D];厦门大学;2018年

3 徐光彬;布鲁氏菌LPS对山羊子宫内膜上皮细胞内质网应激和炎症因子的影响[D];西北农林科技大学;2018年

4 王庆文;朊蛋白在LPS诱导的结肠炎症中的作用研究[D];华东师范大学;2018年

5 王芳;苦参碱联合黄芩苷对LPS诱导小鼠肺炎的影响[D];山西农业大学;2018年

6 祁思蕊;乳酸杆菌上清对LPS致敏小鼠肠道免疫调节效应和肝脏保护作用[D];浙江农林大学;2019年

7 李建奎;川芎嗪对LPS诱导AKI小鼠肾内皮细胞糖层损伤的保护作用及其机制的研究[D];滨州医学院;2018年

8 王特日格乐;沙葱总黄酮对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞抗炎作用的研究[D];内蒙古农业大学;2018年

9 韩秀瑞;羊种布鲁氏菌变异株细胞内存活能力及LPS遗传特征研究[D];中国疾病预防控制中心;2017年

10 周琰;孕期补充维生素D预防LPS诱发的小鼠流产[D];安徽医科大学;2017年

本文编号：2714413