家畜布鲁菌病试管凝集试验分光光度测量判定法的研究与应用
发布时间：2020-07-19 03:08
【摘要】：布鲁菌病是引起感染机体繁殖障碍的人畜共患病,该病的流行给畜牧业造成严重的经济损失,对养殖及其相关行业人群的人身安全造成巨大威胁。虎红平板凝集试验初筛,试管凝集试验确诊是我国基层检测机构运用最广泛的布鲁菌病检测法定方法,比浊法作为试管凝集试验结果判定方法,依靠试验人员的肉眼观测,试验结果会受到经验水平和主观偏差的影响。(1)为了更加客观地、准确地判定试管凝集试验结果,本研究首先运用酶标仪405nm、450nm、490nm、630nm四个光谱对试管凝集试验比浊管悬液进行扫描,对比分析比浊管在四个光谱扫描得出的OD值,确定最优光谱作为后续研究的统一扫描光谱。进而国标试管凝集试验方法,检测72份已知凝集效价血清,比较分光光度测量法和比浊法判定结果差异。结果显示,扫描OD值最大的光谱是405nm,且差异显著(P0.05),线性关系决定系数R~2=0.9992,可靠性最高,确定405nm光谱为后续研究的统一扫描光谱。分光光度测量法和比浊法判定72份血清效价与已知效价符合率分别为83.33%(60/72)、88.89%(64/72)(P0.05),判定结果一致率94.44%,Kappa值0.770.75,表明两种方法判定结果一致性良好。分光光度测量法判定的72份样品、54份阳性样品、18份可疑样品的效价符合率比比浊法分别高出5.6%、3.7%、11.1%,并且分光光度测量法比比浊法检出可疑样品阳性数量低33.33%,表明分光光度测量法判定试管凝集试验结果能够提升待检样品效价准确性。(2)2017年--2018年,在汉台区布鲁氏菌病检测工作中运用该方法,判定虎红阳性试管凝集试验结果,保留了原始检测数据,结果客观、唯一。结果显示,2017年陕西陕西省兽医实验室检测能力对比活动中5份盲样检测结果与陕西省动物疫病预防控制中心给出的参考结果完全一致,2018年检测田间阳性样品,比浊法能明显定性的样品,经分光光度测量法判定与比浊法判定结果一致,对于比浊法判定出现多种可能性结果的样品,经分光光度法判定能得到唯一的结果。本研究从分光光度测量法判定试管凝集试验结果方法建立到在布鲁氏菌病检测工作中的运用,为分光光度测量法判定试管凝集试验结果在布鲁菌病监测工作中推广应用提供了有力的数据支持。
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S855.12
【图文】：
图 2-1 比浊管 OD 值线性关系Chart 2-1 linear relation of turbid tube OD value 样品扫描结果2 份已知凝集效价血清和阴阳血清 OD 值随样品稀释度增大呈现递增的规 2-3），比浊管的凝集度越高 OD 值越小，凝集度++的 OD 值为 0.193。（表 2-2 72 份已知凝集效价血清扫描结果Table 2-2 Scan results for 72 samples of known agglutination titer serum样品稀释度Sampledilution已知凝集效价Known agglutination potency1:400 1:200 1:100 1:50 1:400 1:200 1:100 1:50 1:400 1:200 1:101:50 0.081 0.073 0.075 0.081 0.081 0.085 0.077 0.101 0.076 0.069 0.061:100 0.082 0.076 0.084 0.231 0.073 0.080 0.138 0.261 0.068 0.150 0.081:200 0.087 0.114 0.324 0.318 0.074 0.097 0.248 0.357 0.068 0.071 0.28
价符合率高于比浊法。（图 2-2）表 2-6 两种判定方法检测效价与已知效价符合数量统计表ble 2-6 Accordance quantitative statistics of two determination methods tested titer and known 已知凝集效价Knownglutinationpotency检测数Detectionnumber效价符合数Agglutination potency compliancenumber符合率Accordance rate比浊法Turbidimetry分光光度测量法Spectrophotometry比浊法Turbidimetry分光光度测量Spectrophotom1:400 18 18 18 100% 100%1:200 18 17 18 94.44% 100%1:100 18 13 14 72.22% 77.78%1:50 18 12 14 66.67% 77.78%合 计 72 60 64 83.33% 88.89%
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S855.12
【图文】：
图 2-1 比浊管 OD 值线性关系Chart 2-1 linear relation of turbid tube OD value 样品扫描结果2 份已知凝集效价血清和阴阳血清 OD 值随样品稀释度增大呈现递增的规 2-3），比浊管的凝集度越高 OD 值越小，凝集度++的 OD 值为 0.193。（表 2-2 72 份已知凝集效价血清扫描结果Table 2-2 Scan results for 72 samples of known agglutination titer serum样品稀释度Sampledilution已知凝集效价Known agglutination potency1:400 1:200 1:100 1:50 1:400 1:200 1:100 1:50 1:400 1:200 1:101:50 0.081 0.073 0.075 0.081 0.081 0.085 0.077 0.101 0.076 0.069 0.061:100 0.082 0.076 0.084 0.231 0.073 0.080 0.138 0.261 0.068 0.150 0.081:200 0.087 0.114 0.324 0.318 0.074 0.097 0.248 0.357 0.068 0.071 0.28
价符合率高于比浊法。（图 2-2）表 2-6 两种判定方法检测效价与已知效价符合数量统计表ble 2-6 Accordance quantitative statistics of two determination methods tested titer and known 已知凝集效价Knownglutinationpotency检测数Detectionnumber效价符合数Agglutination potency compliancenumber符合率Accordance rate比浊法Turbidimetry分光光度测量法Spectrophotometry比浊法Turbidimetry分光光度测量Spectrophotom1:400 18 18 18 100% 100%1:200 18 17 18 94.44% 100%1:100 18 13 14 72.22% 77.78%1:50 18 12 14 66.67% 77.78%合 计 72 60 64 83.33% 88.89%
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本文编号：2761814
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