母羊初情期启动过程中Dnmt1和MeCP2在下丘脑的表达和分布

发布时间：2020-07-22 02:50

【摘要】：初情期是动物从幼年向获得繁殖能力的过渡时期,也是雌性动物初次发情并排卵的时期,象征着母畜具备了繁衍生息的能力。初情期启动机制较为复杂,目前尚未完全阐明,且以往关于初情期启动机制的研究多集中在啮齿类和灵长类动物,家畜方面的研究相对较少。本研究拟从DNA甲基化角度探索母羊初情期启动机制,首先利用荧光定量PCR技术检测首先利用荧光定量PCR技术检测母羊初情期启动启动过程中下丘脑DNA甲基化转移酶1(DNA methyltransferases 1,Dnmt1)和甲基化CPG结合蛋白(Methyl-CpG-binding protein 2,MeCP2)、促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)和KiSS-1基因的表达规律,其次通过免疫荧光双标记方法检测Dnmt1和MeCP2在下丘脑中的分布定位及其与GnRH和KiSS-1蛋白之间的分布关系。研究结果如下:利用荧光定量PCR技术发现,GnRH、KiSS-1、Dnmt1和MeCP2在母羊下丘脑中均有表达,随着初情期的到来,GnRH和KiSS-1表达量逐渐升高,且初情期显著高于初情前期和临近初情期,Dnmt1和MeCP2表达量逐渐降低,且初情期和临近初情期显著低于初情前期。通过免疫荧光双标记方法研究发现Dnmt1和MeCP2在母羊下丘脑POA(Preoptic Area)和ARC(Arcuate Nucleus)均有分布,在ARC分别与GnRH和Kisspeptin神经元存在明显的共表达模式,随着初情期启动时过程中ARC共表达阳性细胞数量显著增多。在POA中,GnRH表达较多,且与Dnmt1和MeCP2呈共表达,随着初情期启动共表达阳性细胞数呈下降趋势。Kisspeptin表达较少,仍与Dnmt1和MeCP2呈共表达,初情期启动过程中共表达阳性数量呈下降趋势。本研究通过检测母羊初情期启动过程中下丘脑Dnmt1、MeCP2、GnRH和KiSS-1基因的表达和分布,研究结果表明,Dnmt1、MeCP2、GnRH和KiSS-1基因在母羊下丘脑中均有表达,且在下丘脑ARC和POA中Dnmt1和MeCP2与GnRH和Kisspeptin之间存在明显的共表达模式。可见,Dnmt1和MeCP2可能通过调控GnRH和Kisspeptin蛋白的表达参与母羊初情期启动。
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S826
【图文】：

图 1 HPG 轴示意图Fig.1 HPG axis schematic diagram从表观遗传学角度讲，它可以改变 GnRH 神经元细胞成熟的化自身是认为改变基因的转录率通过两种机制。首先，CPG 甲

图 2 Kisspeptin 在 HPG 轴中的作用示意图Figure.2 Schematic diagram of the role of Kisspeptin in the HPG axsspeptin 对生殖系统的调节作用于 Kisspeptin 对动物机体的调节作用很复杂，其中对生殖系统的研

图 3 RNA 琼脂糖凝胶电泳图Fig.3 RNA agarose gel electrophoresisnRH、KiSS-1、Dnmt1 和 MeCP2 mRNA 表达为内参基因，利用荧光定量 PCR 法检测 Gn的表达情况，结果显示，随着初情期启动 GnP<0.05），Dnmt1 和 MeCP2 基因表达量在临见图 4 至图 7：

【参考文献】

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1 田园;宋敏;方富贵;;动物初情期表观遗传调控的研究进展[J];家畜生态学报;2015年04期

2 刘宵;王树迎;尹玉涛;张德敏;黄丽波;侯衍猛;;济宁青山羊生后发育阶段GnRH与GnRHR阳性细胞在下丘脑分布规律的研究[J];畜牧兽医学报;2012年08期

3 王军;孙蕾;张涛;周海柱;娄玉杰;;Kisspeptin在初情期前母羊下丘脑的分布定位[J];中国农学通报;2012年20期

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本文编号：2765211