瘤胃pH下乳酸作为枯草芽孢杆菌可利用碳源的研究

发布时间：2017-03-30 08:22

  本文关键词：瘤胃pH下乳酸作为枯草芽孢杆菌可利用碳源的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：乳酸在很多反刍动物体内,可以被组织细胞和微生物细胞产生的酶代谢掉,不会积累,但由于某些原因导致乳酸在体内积累时,就会引起代谢疾病。瘤胃酸中毒是一种乳酸代谢疾病,是由于反刍动物大量摄食碳水化合物饲料后,因体内乳酸产生菌和利用菌之间菌群失调,乳酸在体内积累而引起的疾病,不仅影响动物健康,还会带来经济损失。作为一种可以添加在饲料中的微生物,枯草芽孢杆菌适应性强,能够在瘤胃环境中存活。本文以7株枯草芽孢杆菌为实验菌株,探究了其利用乳酸作为碳源的生长表现,旨在为解决瘤胃酸中毒提供新的思路。主要研究结果如下：(1)以1.0%浓度的乳酸作为唯一碳源,并将培养基pH分别调至5.3和6.2,370C培养枯草芽孢杆菌72h。结果表明：枯草芽孢杆菌可以在pH5.3-6.2的,以1.0%浓度的乳酸作为唯一碳源的培养基中生长。(2)在不添加碳源,只添加蛋白胨一种氮源的培养基中,370C培养枯草芽孢杆菌72h。结果表明：枯草芽孢杆菌仅利用氮源就可以生长。(3)改变温度、pH、培养基中的乳酸浓度和葡萄糖浓度,分析影响乳酸利用率的因素。结果表明：300C以下枯草芽孢杆菌可以生长但不利用乳酸。370C下：在pH5.4-7.4范围内,pH越高,乳酸利用率越低；在1.0～2.0%范围内,乳酸浓度越高,乳酸利用率越低,但乳酸浓度达到2.0%时菌株依然可以生长；在0.1-1.0%范围内,葡萄糖浓度越高,乳酸利用率越低。(4)对枯草芽孢杆菌粗酶液进行SDS-PAGE实验,并测定胞内丙酮酸含量。结果表明枯草芽孢杆菌代谢乳酸的途径为：乳酸脱氢酶催化乳酸产生丙酮酸。综合,乳酸能够作为枯草芽孢杆菌可利用的碳源,这为解决瘤胃酸中毒问题提供了新思路。
【关键词】：乳酸 枯草芽孢杆菌 瘤胃酸中毒
【学位授予单位】：北京林业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S816
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 1. 文献综述8-16
• 1.1 瘤胃酸中毒简介8
• 1.2 瘤胃酸中毒的防治方法8-10
• 1.3 瘤胃中的微生物10-12
• 1.4 枯草芽孢杆菌简介12-14
• 1.4.1. 枯草芽孢杆菌生理特征12
• 1.4.2 枯草芽孢杆菌在实际中的应用12-14
• 1.5 研究目的和意义14-16
• 2. 枯草芽孢杆菌菌株的筛选16-32
• 2.1 材料与方法16-20
• 2.1.1 实验设备16-17
• 2.1.2 实验菌株与试剂17
• 2.1.3 培养基17-18
• 2.1.4 实验方法18-20
• 2.2 结果与分析20-31
• 2.2.1 枯草芽孢杆菌在模拟瘤胃pH条件下的生长表现20-26
• 2.2.2 pH对供试菌株生长的影响26-28
• 2.2.3 氮源对供试菌株生长的影响28-30
• 2.2.4 供试菌株培养液乳酸浓度变化30-31
• 2.3 本章小结31-32
• 3. 影响枯草芽孢杆菌利用乳酸的因素分析32-41
• 3.1 材料与方法32-34
• 3.1.1 实验设备32
• 3.1.2 实验菌种与试剂32-33
• 3.1.3 实验方法33-34
• 3.2 结果与分析34-40
• 3.2.1 不同温度对菌株利用乳酸的影响34-35
• 3.2.2 不同pH对菌株利用乳酸的影响35-36
• 3.2.3 不同浓度乳酸对菌株利用乳酸的影响36-38
• 3.2.4 不同浓度葡萄糖对菌株利用乳酸的影响38-40
• 3.3 本章小结40-41
• 4. 枯草芽孢杆菌利用乳酸的机理分析41-51
• 4.1 材料与方法41-46
• 4.1.1 实验设备41
• 4.1.2 实验菌种与试剂41-42
• 4.1.3 实验方法42-46
• 4.2 结果与分析46-50
• 4.2.1 乳酸脱氢酶检测46-47
• 4.2.2 SDS-PAGE电泳检测47-49
• 4.2.3 丙酮酸生成量检测49-50
• 4.3 本章小结50-51
• 5. 总结与展望51-52
• 5.1 主要结论51
• 5.2 展望51-52
• 参考文献52-56
• 个人简介56-57
• 导师简介57-59
• 致谢59

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