抗猪传染性胸膜肺炎放线杆菌感染的中药筛选及其对感染动物的治疗效果

发布时间：2020-08-10 15:11

【摘要】：猪传染性胸膜肺炎(porcine infectious pleuropneumonia,PCP)是由猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的一种接触性、高度致死性呼吸道传染病。APP各型之间交叉保护性不强,又有大量耐药性菌株出现,特别是近年来,患病猪感染APP,往往与其他疾病混合感染,如猪瘟、猪蓝耳病、猪圆环病毒病等,从而增加了治疗难度。因此,寻找安全可靠的、廉价的新型药物十分必要。针对猪传染性胸膜肺炎所面临的问题,根据中兽医医药理论、中药特性及仔猪传染性胸膜肺炎的发生机理,分别使用不同的中药单体(连翘苷、绿原酸、蒲公英甾醇、落新妇苷、木犀草素)和中药复方(黄仁汤、生黄汤、连金散水煮液)对感染APP的小鼠进行治疗。实验结果表明,用连翘苷和黄仁汤治疗后小鼠临床症状得到明显改善(p0.01),肺脏指数显著降低(p0.01),存活率最高,这表明连翘苷和黄仁汤对APP感染小鼠具有较好的治疗作用。为了进一步考察连翘苷和黄仁汤对APP感染小鼠的治疗作用,我们建立了小鼠感染模型。将ICR小鼠随机分为4组,分别为正常对照组、感染对照组、连翘苷治疗组、黄仁汤治疗组。小鼠鼻腔感染APP(2×10~8 CFU),2 h后连翘苷治疗组(20 mg/kg)、黄仁汤治疗组(10 g/kg)分别灌服给药,每隔12 h用药一次,连续用药3 d。实验结果表明,连翘苷和黄仁汤治疗后小鼠临床症状得到明显改善(p0.01),血液和BALF中炎性细胞数目明显减少(p0.05),TNF-α、IL-6、IL-1β水平明显降低(p0.05),肺组织病理变化明显减轻,这表明连翘苷和黄仁汤对APP感染小鼠具有较好的治疗效果。为了进一步验证连翘苷及黄仁汤的临床治疗效果,我们选用35日龄的仔猪进行APP感染仔猪的治疗效果研究。首先,通过滴鼻接种APP的方法,建立猪传染性胸膜肺炎的人工感染模型。将仔猪分为5组,分别为正常对照组、感染对照组、恩诺沙星治疗组、连翘苷治疗组、黄仁汤治疗组。感染6 h后恩诺沙星治疗组、连翘苷治疗组、黄仁汤治疗组分别给药处理,每天用药2次,连续用药5d。实验结果显示,黄仁汤治疗组的治愈率为100%,与恩诺沙星治疗组的治愈率相同。同时黄仁汤治疗组和恩诺沙星治疗组的增重率极显著高于感染对照组(p0.01),而黄仁汤治疗组和恩诺沙星治疗组的增重率无显著差异(p0.05)。综上所述,连翘苷及黄仁汤连用5 d,对仔猪传染性胸膜肺炎具有较好的治疗效果,为进一步的临床应用奠定了基础,可作为一种治疗猪传染性胸膜肺炎安全可靠的、廉价的候选药物。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S858.28
【图文】：

煮液,对照组,木犀草素,连翘苷

组、生黄汤组和连金散水煮液组临床症状的改善不明显（图1.1）。图 1.1 中药对 APP 感染小鼠的临床评分Fig 1.1 Clinical scores of traditional Chinese medicine on APP infected mice与正常对照组比较，##p<0.01；与感染对照组比较, * p<0.05，** p<0.01##p<0.01, compared with normal control group, * p<0.05，** p<0.01, compared withinfection control group1.3.2 各组小鼠体重的变化通过表 1.3 可知各组给药 3 d 小鼠的平均体重，与正常对照组比较，其他组的小鼠体重均显著下降（p<0.05）；各药物治疗组与感染对照组比较，小鼠体重变化差异不显著（p>0.05）。给药后 6 d，与正常对照组比较，感染对照组、落新妇苷组、木犀草素组和生黄汤体重变化差异显著（p<0.01），绿原酸组、连翘苷组、蒲公英甾醇组、黄仁汤组和连金散水煮液组小鼠体重差异不明显（p>0.05）。

肺脏,表观,小鼠

蒲公英甾醇组 0.49±0.10 5.03±0.19 0.57±0.32 0.90±0.03* 1.01±0.19黄仁汤组 0.49±0.21 4.92±0.17 0.49±0.12 0.86±0.25** 0.96±0.10生黄汤组 0.52±0.15 5.11±0.21 0.67±0.40 0.97±0.07 1.21±0.08连金散水煮液组 0.51±0.13 5.12±0.13 0.59±0.05 0.93±0.09* 1.02±0.12与正常对照组比较，##p<0.01；与感染对照组比较，* p<0.05，**p<0.01##p<0.01, compared with normal control group; * p<0.05, ** p<0.01, compared withinfection control group1.3.4 中药对 APP 感染小鼠的肺脏表观病变影响分别于感染后第 7 d 对小鼠进行剖解，观察肺脏表观病理变化。首先，通过肺脏的外观可以看出，感染对照组小鼠肺脏的损伤最为严重，出现大面积的充血，坏死，其次是落新妇苷组和木犀草素组，而连翘苷治疗组和黄仁汤治疗组小鼠的肺脏病变较轻。

存活率,小鼠,肺脏,临床症状

图 1.3 中药对 APP 感染小鼠的存活率影响3 Effect of Traditional Chinese Medicine on survival rate of APP infecte讨论小鼠模型已被广泛的应用于细菌性肺炎致病机制的研究中[56]。APP 肺脏的革兰氏阴性菌，是危害世界所有养猪国家的病原菌，引起典型膜肺炎[57-59]。我们以 APP 为代表，建立小鼠感染模型，筛选出治疗鼠的中药，为进一步的临床应用提供科学依据。在本研究中，以 APP 血清型 5 b 型滴鼻感染 ICR 小鼠，建立呼吸道型，并用不同的中药单体及中药复方进行治疗，实验结果表明用连翘治疗后小鼠临床症状得到明显改善，肺脏指数显著降低，存活率最高翘苷和黄仁汤对 APP 感染小鼠具有较好的治疗作用。临床症状包括：小鼠的活动性、被毛、食欲、精神状态、眼分泌物、

【参考文献】