猪源H1N1流感病毒在山东猪群中的检测及其气源性传播特点
发布时间：2021-01-13 04:29
猪源甲型H1N1流感病毒自从被认定是1918年流感大流行的病原以后，该病毒就已被人们所重视，2009年全球范围内流行的猪源性新型甲型H1N1流感再一次使人们的目光聚焦于此。通过对一些地区养猪场内猪群的检测，也发现部分地区的猪群中确实存在新型甲型H1N1流感病毒的传播。加强对人群、猪群中甲流的检测和防控工作，具有非常重要的公共卫生学意义。为了深入了解猪源性甲型H1N1病毒在山东省内猪群中存在和流行的情况，本实验在山东省内九个地市的多个养猪场进行抽样检测，使用AGI-30分别采集猪圈内、外空气样品，经过处理后使用实时荧光定量RT-PCR技术检测样品中猪源性甲型H1N1病毒的含量。猪舍内一共采集了157个空气样品，通过对空气样品的采集、处理和鉴定，其中41个样品为阳性，各个地区间舍内空气样品的阳性率为5.0%67.0%，德州地区的阳性率最高。舍内空气样品中病毒拷贝数含量最高的猪场在德州，病毒拷贝数高达6.72log10copies/m3air。舍外的37份空气样品中检出3份阳性。2011年初，山东省潍坊市某地的部分养猪场相继出现类似流感症状的呼吸道疫病，通过对几个发病场的猪群的鼻咽棉拭子和组...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 猪源甲型 H1N1 流感病原
1.1.1 猪源甲型 H1N1 流感研究进展
1.1.2 猪源甲型 H1N1 流感病毒的结构
1.1.3 猪源甲型 H1N1 流感病毒蛋白质结构与功能
1.1.4 流感病毒的理化特点
1.1.5 甲型流感病毒的复制和变异
1.1.6 猪源甲型 H1N1 流感的流行和传播
1.1.7 猪源甲型 H1N1 流感的诊断方法
1.1.8 猪源甲型 H1N1 流感的公共卫生学意义
1.2 病毒气溶胶
1.2.1 气溶胶的概念
1.2.2 病毒气溶胶的产生和传播
1.2.3 病毒气溶胶的危害
1.2.4 气溶胶采样原理和仪器
1.2.5 病毒气溶胶的采集和检测
1.3 实时荧光定量 PCR
2 研究目的与意义
3 材料与方法
3.1 材料
3.1.1 采样猪场
3.1.2 病料的采集
3.1.3 标准阳性血清和抗原
3.1.4 细胞、鸡胚和实验动物
3.1.5 引物和探针
3.1.6 主要试剂及配制方法
3.1.7 主要仪器设备
3.2 方法
3.2.1 猪场内空气样品的采集
3.2.2 引物探针的合成
3.2.3 标准品的制备
3.2.4 空气样品的处理
3.2.6 病毒的分离纯化
3.2.7 病毒亚型的鉴定
3.2.8 病毒 TCID50 的测定
3.2.9 透射电镜下观察病毒形态
3.2.12 隔离器中病毒气溶胶浓度的测定
3.2.13 实验猪感染和排毒情况的检测
4 结果
4.1 标准品制备结果
4.2 猪舍内、外空气样品的检测结果
4.3 荧光定量 PCR 的检测结果
4.4 病毒分离鉴定结果
4.5 病毒 TCID50 测定结果
4.6 透射电镜下病毒形态
4.7 空气样品的检测结果
4.8 传播模型中动物排毒检测和血清学检测结果
5 讨论
6 结论
参考文献
致谢
硕士期间发表的文章
【参考文献】：
期刊论文
[1]H1亚型猪流感病毒感染的血清学调查[J]. 罗晓松,李克敏,黄洁东,林健仁,李俊欣. 中国兽医杂志. 2011(05)
[2]H1N1亚型猪流感病毒分离鉴定[J]. 鄢明华,李秀丽,韩伟,高荣玲,申树权,陈龙宾,侯俊辉,王东. 华北农学报. 2011(02)
[3]甲型H1N1流感的研究进展[J]. 王汉杰. 吉林医学. 2011(01)
[4]猪流感病毒河南株的分离鉴定和生物学特性[J]. 赵朴,郑玉姝,贾贝贝,刘丽艳,刘兴友,李海燕. 华北农学报. 2010(04)
[5]甲型H1N1流感的回顾与展望[J]. 张雅芳,曾庆磊,吴新忠,徐光华. 西部医学. 2010(02)
[6]新甲型H1N1（2009）流感病毒的早期分子特征[J]. 祁贤,汤奋扬,李亮,崔仑标,吴斌,祖荣强,朱凤才,羊海涛,汪华. 微生物学报. 2010(01)
[7]甲型HINI流感临床治疗探讨[J]. 吕志芹,张慧芳. 中国现代药物应用. 2009(21)
[8]甲型H1N1流感、猪流感与兽医公共卫生学的关系及其应对与防治[J]. 焦静波,张志英,刘芳,王建军. 畜牧与饲料科学. 2009(04)
[9]猪流感病毒M基因实时荧光定量PCR诊断方法的建立[J]. 张春明,乔传玲,陈艳,杨焕良,辛晓光,陈化兰,冉多良. 中国预防兽医学报. 2008(10)
[10]鸭瘟病毒的纯化及电镜负染形态观察[J]. 郭宇飞,程安春,汪铭书,周毅. 中国兽医科学. 2008(05)
本文编号：2974217
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 猪源甲型 H1N1 流感病原
1.1.1 猪源甲型 H1N1 流感研究进展
1.1.2 猪源甲型 H1N1 流感病毒的结构
1.1.3 猪源甲型 H1N1 流感病毒蛋白质结构与功能
1.1.4 流感病毒的理化特点
1.1.5 甲型流感病毒的复制和变异
1.1.6 猪源甲型 H1N1 流感的流行和传播
1.1.7 猪源甲型 H1N1 流感的诊断方法
1.1.8 猪源甲型 H1N1 流感的公共卫生学意义
1.2 病毒气溶胶
1.2.1 气溶胶的概念
1.2.2 病毒气溶胶的产生和传播
1.2.3 病毒气溶胶的危害
1.2.4 气溶胶采样原理和仪器
1.2.5 病毒气溶胶的采集和检测
1.3 实时荧光定量 PCR
2 研究目的与意义
3 材料与方法
3.1 材料
3.1.1 采样猪场
3.1.2 病料的采集
3.1.3 标准阳性血清和抗原
3.1.4 细胞、鸡胚和实验动物
3.1.5 引物和探针
3.1.6 主要试剂及配制方法
3.1.7 主要仪器设备
3.2 方法
3.2.1 猪场内空气样品的采集
3.2.2 引物探针的合成
3.2.3 标准品的制备
3.2.4 空气样品的处理
3.2.6 病毒的分离纯化
3.2.7 病毒亚型的鉴定
3.2.8 病毒 TCID50 的测定
3.2.9 透射电镜下观察病毒形态
3.2.12 隔离器中病毒气溶胶浓度的测定
3.2.13 实验猪感染和排毒情况的检测
4 结果
4.1 标准品制备结果
4.2 猪舍内、外空气样品的检测结果
4.3 荧光定量 PCR 的检测结果
4.4 病毒分离鉴定结果
4.5 病毒 TCID50 测定结果
4.6 透射电镜下病毒形态
4.7 空气样品的检测结果
4.8 传播模型中动物排毒检测和血清学检测结果
5 讨论
6 结论
参考文献
致谢
硕士期间发表的文章
【参考文献】：
期刊论文
[1]H1亚型猪流感病毒感染的血清学调查[J]. 罗晓松,李克敏,黄洁东,林健仁,李俊欣. 中国兽医杂志. 2011(05)
[2]H1N1亚型猪流感病毒分离鉴定[J]. 鄢明华,李秀丽,韩伟,高荣玲,申树权,陈龙宾,侯俊辉,王东. 华北农学报. 2011(02)
[3]甲型H1N1流感的研究进展[J]. 王汉杰. 吉林医学. 2011(01)
[4]猪流感病毒河南株的分离鉴定和生物学特性[J]. 赵朴,郑玉姝,贾贝贝,刘丽艳,刘兴友,李海燕. 华北农学报. 2010(04)
[5]甲型H1N1流感的回顾与展望[J]. 张雅芳,曾庆磊,吴新忠,徐光华. 西部医学. 2010(02)
[6]新甲型H1N1（2009）流感病毒的早期分子特征[J]. 祁贤,汤奋扬,李亮,崔仑标,吴斌,祖荣强,朱凤才,羊海涛,汪华. 微生物学报. 2010(01)
[7]甲型HINI流感临床治疗探讨[J]. 吕志芹,张慧芳. 中国现代药物应用. 2009(21)
[8]甲型H1N1流感、猪流感与兽医公共卫生学的关系及其应对与防治[J]. 焦静波,张志英,刘芳,王建军. 畜牧与饲料科学. 2009(04)
[9]猪流感病毒M基因实时荧光定量PCR诊断方法的建立[J]. 张春明,乔传玲,陈艳,杨焕良,辛晓光,陈化兰,冉多良. 中国预防兽医学报. 2008(10)
[10]鸭瘟病毒的纯化及电镜负染形态观察[J]. 郭宇飞,程安春,汪铭书,周毅. 中国兽医科学. 2008(05)
本文编号：2974217
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