不同品种鸭AdipoR1基因表达规律及调控机制的研究
发布时间：2021-01-13 13:08
AdipoR1基因是骨骼肌中表达丰度最高且与球状脂联素亲和力最强的细胞因子,主要介导球状脂联素参与糖类和脂质代谢,维持机体稳态,与体内脂肪累积呈负相关,与胰岛素抗性、抗动脉粥样硬化等免疫反应直接或间接相关。AdipoR1基因在组织中表达的高低直接决定脂联素基因在相关组织中发挥生理功能的作用强度。miRNAs是一类来源于染色体非编码区大小为20nt左右的小RNA分子,其作用是在转录后水平上对靶基因的表达进行调控,主要是抑制靶基因的表达。miRNAs在动物的基因表达调控、信号转导、细胞增殖和分化、细胞凋亡、机体癌症防御等过程中发挥着重要的生理学功能。miRNAs尤其作为一种重要的转录后调解新陈代谢因子,参与机体能量的动态平衡,调节脂肪的分化。AdipoR1基因在鸭的各个组织中表达谱还未见详细报道,鉴于AdipoR1介导的脂联素与体脂累积呈负相关,在治疗肥胖的临床医学上有着十分中的意义,由此我们设计了本实验,检测AdipoR1基因在鸭的组织表达谱和时空表达谱,同时探讨miR-148a对鸭AdipoR1的调控作用。旨在为鸭的选育和脂肪累积的调控机理研究提供参考信息。采用Real-Time PC...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
目录
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1 脂联素及AdipoR1
1.1 脂联素概述
1.2 AdipoR1概述
1.3 AdipoR1介导脂联素发挥生物学功能
1.4 AdipoR1的表达调控
2 miRNA的特征及生物学功能
2.1 miRNA的形成
2.2 miRNA的特征
2.3 miRNA的生物过程
2.4 miRNA的生物学功能
3 miRNA靶标预测与验证方法
3.1 生物信息学进行miRNA靶标预测
3.2 靶标基因验证的生物学方法
3.3 miR-148a的研究进展
4 本研究的目的和意义
参考文献
第二章 AdipoR1在不同品种鸭不同组织中时空表达谱分析
1 实验材料
1.1 实验动物及样品采集
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
1.4 主要溶液及其配置
2 实验方法
2.1 引物的设计
2.2 组织样品总RNA的提取
2.3 总RNA浓度和纯度检测
2.4 cDNA的获得
2.5 鸭AdipoR1基因定量引物特异扩增
2.6 Real-time PCR
2.7 数据分析
3 实验结果
3.1 总RNA质量检测
3.2 cDNA质量检测
3.3 鸭AdipoR1荧光定量引物验证
3.4 AdipoR1基因在不同品种鸭各组织时空表达谱
4 讨论
5 小结
参考文献
第三章 miR-148a对鸭AdipoR1基因调控机制的研究
1 实验材料
1.1 细胞、菌株和质粒
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
1.4 主要溶液及其配置
1.5 生物学工具
2 实验方法
2.1 引物的设计
2.2 组织样RNA的提取
2.3 鸭AdipoR1-3'UTR序列的扩增
2.4 鸭AdipoR1基因的生物学信息学分析
2.5 细胞的培养
2.6 鸭骨骼肌细胞转染
2.6.1 细胞铺板
2.6.2 miR-148a转染
2.6.3 转染效率的观察
2.7 Real-time PCR和Western blot
3 实验结果
3.1 组织样总RNA的提取
3.2 AdipoR1-3'UTR的扩增
3.3 阳性克隆与测序
3.4 生物信息学预测结果
3.5 鸭骨骼肌细胞转染
3.6 Real-time PCR和Western blot结果
4 讨论
4.1 关于AdipoR1基因在骨骼肌中作用
4.2 关于鸭骨骼肌的分离
4.3 关于miRNA与脂肪代谢
4.4 关于miR-148a与鸭AdipoR1基因在骨骼肌中的关系
5 小结
参考文献
全文结论
全文创新点
致谢
附录
攻读硕士期间发表的论文
本文编号：2974923
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
目录
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1 脂联素及AdipoR1
1.1 脂联素概述
1.2 AdipoR1概述
1.3 AdipoR1介导脂联素发挥生物学功能
1.4 AdipoR1的表达调控
2 miRNA的特征及生物学功能
2.1 miRNA的形成
2.2 miRNA的特征
2.3 miRNA的生物过程
2.4 miRNA的生物学功能
3 miRNA靶标预测与验证方法
3.1 生物信息学进行miRNA靶标预测
3.2 靶标基因验证的生物学方法
3.3 miR-148a的研究进展
4 本研究的目的和意义
参考文献
第二章 AdipoR1在不同品种鸭不同组织中时空表达谱分析
1 实验材料
1.1 实验动物及样品采集
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
1.4 主要溶液及其配置
2 实验方法
2.1 引物的设计
2.2 组织样品总RNA的提取
2.3 总RNA浓度和纯度检测
2.4 cDNA的获得
2.5 鸭AdipoR1基因定量引物特异扩增
2.6 Real-time PCR
2.7 数据分析
3 实验结果
3.1 总RNA质量检测
3.2 cDNA质量检测
3.3 鸭AdipoR1荧光定量引物验证
3.4 AdipoR1基因在不同品种鸭各组织时空表达谱
4 讨论
5 小结
参考文献
第三章 miR-148a对鸭AdipoR1基因调控机制的研究
1 实验材料
1.1 细胞、菌株和质粒
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
1.4 主要溶液及其配置
1.5 生物学工具
2 实验方法
2.1 引物的设计
2.2 组织样RNA的提取
2.3 鸭AdipoR1-3'UTR序列的扩增
2.4 鸭AdipoR1基因的生物学信息学分析
2.5 细胞的培养
2.6 鸭骨骼肌细胞转染
2.6.1 细胞铺板
2.6.2 miR-148a转染
2.6.3 转染效率的观察
2.7 Real-time PCR和Western blot
3 实验结果
3.1 组织样总RNA的提取
3.2 AdipoR1-3'UTR的扩增
3.3 阳性克隆与测序
3.4 生物信息学预测结果
3.5 鸭骨骼肌细胞转染
3.6 Real-time PCR和Western blot结果
4 讨论
4.1 关于AdipoR1基因在骨骼肌中作用
4.2 关于鸭骨骼肌的分离
4.3 关于miRNA与脂肪代谢
4.4 关于miR-148a与鸭AdipoR1基因在骨骼肌中的关系
5 小结
参考文献
全文结论
全文创新点
致谢
附录
攻读硕士期间发表的论文
本文编号：2974923
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/2974923.html
