流行性乙型脑炎荧光定量PCR诊断方法建立及流行病学监测

发布时间：2021-01-13 13:44

　　流行性乙型脑炎（JE）是由流行性乙型脑炎病毒（JEV）感染引起的一种严重人畜共患传染病。对人类的健康和畜牧养殖业的危害非常大。近年来由于全球气温变暖,乙脑的流行区域不断扩大,虽然乙脑疫苗的推广使用降低了乙脑的发病率,但是流行的频率却在增加,而且流行的基因型也在逐渐的演变。由于乙脑的治疗没有特效药,因此对乙脑的防治必须加强流行病学监测,以便针对性地采取防控措施。猪是JEV最重要的贮藏和扩散宿主,而且我国养猪业十分庞大,人猪接触频繁、密切。蚊是JEV的主要传播媒介,由于蚊感染JEV后可带毒越冬经卵传代,所以蚊也是病毒的贮存宿主。因此对地区范围内猪和蚊所携带的流行性乙型脑炎病毒进行分子流行病学监测,可以评估该地区乙脑的流行状况。在云南省采集蚊样品,首先将疑似的蚊悬液样品接种BHK-21单层细胞,待出现细胞病变后接种于乳鼠脑内,反复传代至病毒适应鼠脑。提取RNA鉴定为阳性病毒RNA为模板利用PCR扩增E基因片段,克隆到pMD18-T载体后由上海生工测序。通过对测序结果的比对分析,确定分离到1株乙型脑炎病毒,命名为云南1101株,对新分离到的YN/11/01毒株进行E基因序列和基因系统进化分析,... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
前言
第一篇 文献综述
    第一章 流行性乙型脑炎研究进展
        1.1 JEV的病原学及分子生物学特性
        1.2 JEV的分布及流行趋势
        1.3 JEV的传播媒介
        1.4 猪乙型脑炎的临床症状与病理变化
        1.5 乙型脑炎的诊断
        1.6 乙型脑炎的防治
        1.7 小结
    第二章 实时荧光定量PCR研究进展
        2.1 实时荧光定量PCR的原理
        2.2 实时荧光定量PCR的分类和方法
        2.3 实时荧光定量PCR的定量方法
        2.4 实时荧光定量PCR的应用
        2.5 实时荧光定量PCR的发展前景
第二篇 研究内容
    第一章 流行性乙型脑炎病毒YN/11/O1株的分离鉴定
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 结果
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 JEV RT-PCR方法和荧光定量PCR方法的建立
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 结果
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第三章 应用建立的RT-PCR和荧光定量PCR方法对云南省猪和蚊JEV进行流行病学调查
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 结果
        3.4 讨论
        3.5 小结
结论
参考文献
附录
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]云南省蚊虫媒介与蚊传虫媒病毒研究现状[J]. 查冰,周红宁,张海林,梁国栋.  中国媒介生物学及控制杂志. 2012(05)
[2]运用灰色关联度模型分析乙脑发病与气象要素、运气理论相关性[J]. 高春廷,柯资能.  时珍国医国药. 2012(08)
[3]浙江省分离到基因Ⅲ型乙型脑炎病毒[J]. 严菊英,王建跃,王忠发,喻忠文,俞仲卿,周佳悦,张严峻.  中华预防医学杂志. 2012 (08)
[4]猪乙型脑炎病的诊断[J]. 史秀春,刁富花.  中国畜牧兽医. 2012(04)
[5]实时荧光定量PCR技术研究进展及其在兽医学中的应用[J]. 薛霜,独军政,高闪电,常惠芸.  中国农学通报. 2010(07)
[6]乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS1和E蛋白的原核表达及其免疫原性[J]. 徐宏山,俞永新,贾丽丽,黄莺,董关木,俞炜源.  中国生物制品学杂志. 2010(02)
[7]乙型脑炎病毒分子生物学特性及检测方法研究进展[J]. 张丹,金扩世,金宁一,鲁会军,刘昊.  中国动物检疫. 2009(12)
[8]流行性乙型脑炎病毒分子生物学研究进展[J]. 黄丽娟,张海林.  中国预防医学杂志. 2009(08)
[9]近年来我国流行性乙型脑炎研究进展[J]. 蔡宝祥.  畜牧与兽医. 2009(08)
[10]乙型脑炎病毒XJ/08/01株的分离鉴定及PrM/E基因的遗传进化分析[J]. 刘昊,金宁一,段纲,尹革芬,鲁会军,屈勇刚,于长勇,张丹,李霄,金扩世,关莎莎.  中国兽医科学. 2009(07)



本文编号：2974969