不同佐剂对猪传染性胃肠炎病毒S蛋白和猪流行性腹泻病毒S蛋白免疫原性的影响
发布时间：2021-01-13 21:46
本研究旨在探究不同佐剂对猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）S蛋白和猪流行性腹泻病毒（PEDV）S蛋白免疫原性的影响。IPGT诱导重组表达菌株Rosetta（DE3）-pET28a-TGEV-S2/3和BL21（DE3）-pET28aPEDV-S1/2/3,制备重组蛋白TGEV-S2、TGEV-S3、PEDV-S1、PEDV-S2和PEDV-S3,并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定,将重组蛋白等量混匀分别与3种佐剂ISA 71VG、ISA 201VG和ISA 15AVG进行乳化制备免疫原免疫蛋鸡;Western blot检测蛋鸡血清抗体效价,免疫过氧化物酶单层细胞染色法（IPMA）检测抗体与病原的反应活性;监测鸡群平均日增重。结果显示,重组蛋白TGEV-S2、TGEV-S3、PEDV-S1、PEDV-S2和PEDV-S3的分子量依次为25 ku、28 ku、26 ku、24 ku和21 ku。Western blot分析显示,5种蛋白均具有良好的免疫原性;疫苗二次免疫后7天抗体效价达到高峰,ISA 201VG佐剂组、ISA 71VG佐剂和ISA 15AVG佐剂组组最高抗体效...
【文章来源】：中国农学通报. 2020,36(30)
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
不同佐剂配伍的TGEV-PEDV二联亚单位疫苗免疫蛋鸡血清中抗体滴度western blot检测
TGEV-S2蛋白对应ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐剂免疫组血清抗体最高滴度依次为1:32000、1:32000和1:8000;TGEV-S3蛋白对应ISA 201VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐剂免疫组血清抗体最高滴度依次为1:32000、1:16000和1:4000;PEDV-S1蛋白对应ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐剂免疫组血清抗体最高滴度依次为1:32000、1:32000、1:8000;PEDV-S2蛋白对应ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐剂免疫组血清抗体最高滴度依次为1:32000、1:16000、1:8000;PEDV-S3蛋白对应ISA 201VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐剂免疫组血清抗体最高滴度依次为1:64000、1:32000、1:4000（图2和图3）。2.3 二联抗体免疫活性的测定
用3种不同油性佐剂配制的TGEV+PEDV二联亚单位疫苗对蛋鸡接种试验，首次注射疫苗后5天内，对照组日均产蛋率为95%,ISA 71VG、ISA 201VG、ISA15AVG佐剂疫苗免疫组日均产蛋率为依次为77%、90%和92%,ISA 71VG和ISA 201VG对产蛋率影响相对较大，7天后试验组产蛋率恢复正常。增重率指标评估显示，试验鸡ISA 15A VG组日增重比对照组日增重高(P<0.05),ISA 71 VG组日增重显著低于对照组日增重(P<0.05),ISA 201 VG组日增重与对照组日增重无显著差异(P>0.05)（见图6）。图5 TGEV-PEDV二联免疫血清与PEDV反应活性检测
【参考文献】：
期刊论文
[1]PEDV、TGEV和PoRV三重PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 蒲翠敏,冯旭芳,张双翔,胡兴义,张海,丁尊俄,王开功,周碧君,文明,程振涛. 动物医学进展. 2018(02)
[2]兽用疫苗佐剂的研究进展[J]. 邓碧华,朱俊,马鹤毓,徐海,卢宇. 畜牧兽医科学(电子版). 2017(12)
[3]猪圆环病毒2型-肺炎支原体二联灭活疫苗佐剂的筛选[J]. 翟路峰,胡东波,廖永洪,孙哲,朱巧艳,张国良. 黑龙江畜牧兽医. 2017(16)
[4]卵黄抗体/壳聚糖微囊的制备与体外释放性能的研究[J]. 薛海燕,杜枘宣,韩芳,宋宏新. 食品工业科技. 2014(19)
[5]抗猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒卵黄抗体制备及其临床应用研究[J]. 崔焕忠,姜海龙,张加力,张辉,秦贵信. 中国畜牧兽医. 2012(06)
[6]不同佐剂对猪圆环病毒2型灭活抗原免疫效果的影响[J]. 马涛,王先炜,李玉峰,李文良,姜平. 中国兽医科学. 2011(06)
博士论文
[1]猪Gp96N增强PRRSV合成肽疫苗、亚单位疫苗及PCV2灭活疫苗免疫效应的分析[D]. 贾晓娟.中国农业大学 2014
硕士论文
[1]抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白卵黄抗体制剂的制备[D]. 王爱富.佛山科学技术学院 2017
[2]不同佐剂配合ETEC灭活疫苗对蛋鸡免疫原性的影响[D]. 于小娟.大连理工大学 2017
[3]不同佐剂对伪狂犬活疫苗免疫效果的比较研究[D]. 赖庆光.江西农业大学 2011
本文编号：2975616
【文章来源】：中国农学通报. 2020,36(30)
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
不同佐剂配伍的TGEV-PEDV二联亚单位疫苗免疫蛋鸡血清中抗体滴度western blot检测
TGEV-S2蛋白对应ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐剂免疫组血清抗体最高滴度依次为1:32000、1:32000和1:8000;TGEV-S3蛋白对应ISA 201VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐剂免疫组血清抗体最高滴度依次为1:32000、1:16000和1:4000;PEDV-S1蛋白对应ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐剂免疫组血清抗体最高滴度依次为1:32000、1:32000、1:8000;PEDV-S2蛋白对应ISA 201 VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐剂免疫组血清抗体最高滴度依次为1:32000、1:16000、1:8000;PEDV-S3蛋白对应ISA 201VG、ISA 71 VG和ISA 15A VG佐剂免疫组血清抗体最高滴度依次为1:64000、1:32000、1:4000（图2和图3）。2.3 二联抗体免疫活性的测定
用3种不同油性佐剂配制的TGEV+PEDV二联亚单位疫苗对蛋鸡接种试验，首次注射疫苗后5天内，对照组日均产蛋率为95%,ISA 71VG、ISA 201VG、ISA15AVG佐剂疫苗免疫组日均产蛋率为依次为77%、90%和92%,ISA 71VG和ISA 201VG对产蛋率影响相对较大，7天后试验组产蛋率恢复正常。增重率指标评估显示，试验鸡ISA 15A VG组日增重比对照组日增重高(P<0.05),ISA 71 VG组日增重显著低于对照组日增重(P<0.05),ISA 201 VG组日增重与对照组日增重无显著差异(P>0.05)（见图6）。图5 TGEV-PEDV二联免疫血清与PEDV反应活性检测
【参考文献】：
期刊论文
[1]PEDV、TGEV和PoRV三重PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 蒲翠敏,冯旭芳,张双翔,胡兴义,张海,丁尊俄,王开功,周碧君,文明,程振涛. 动物医学进展. 2018(02)
[2]兽用疫苗佐剂的研究进展[J]. 邓碧华,朱俊,马鹤毓,徐海,卢宇. 畜牧兽医科学(电子版). 2017(12)
[3]猪圆环病毒2型-肺炎支原体二联灭活疫苗佐剂的筛选[J]. 翟路峰,胡东波,廖永洪,孙哲,朱巧艳,张国良. 黑龙江畜牧兽医. 2017(16)
[4]卵黄抗体/壳聚糖微囊的制备与体外释放性能的研究[J]. 薛海燕,杜枘宣,韩芳,宋宏新. 食品工业科技. 2014(19)
[5]抗猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒卵黄抗体制备及其临床应用研究[J]. 崔焕忠,姜海龙,张加力,张辉,秦贵信. 中国畜牧兽医. 2012(06)
[6]不同佐剂对猪圆环病毒2型灭活抗原免疫效果的影响[J]. 马涛,王先炜,李玉峰,李文良,姜平. 中国兽医科学. 2011(06)
博士论文
[1]猪Gp96N增强PRRSV合成肽疫苗、亚单位疫苗及PCV2灭活疫苗免疫效应的分析[D]. 贾晓娟.中国农业大学 2014
硕士论文
[1]抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白卵黄抗体制剂的制备[D]. 王爱富.佛山科学技术学院 2017
[2]不同佐剂配合ETEC灭活疫苗对蛋鸡免疫原性的影响[D]. 于小娟.大连理工大学 2017
[3]不同佐剂对伪狂犬活疫苗免疫效果的比较研究[D]. 赖庆光.江西农业大学 2011
本文编号：2975616
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