细粒棘球绦虫TSP14以及TSP33基因的克

发布时间：2021-01-15 12:56

　　包虫病是由中绦期细粒棘球绦虫引起的,该病在全球范围内均有分布,我国是该病高发的国家和地区之一。该病危害性大,患者10年病死率高达94%。防控措施以吡喹酮犬犬投药月月驱虫为主,尽管有效,但是在基层难以长期坚持,而且流浪狗难以管理;针对中间宿主的EG95疫苗对移行期内的病原防控有效,但是终末宿主与中间宿主数量比达到45:1,防控成本很高;因此,建立针对终末宿主有效的免疫预防方法是防控该病的一致研究方向。国内外研究表明,四跨膜蛋白家族（TSP）在寄生虫的研究中具有很好的免疫原价值,因此,本试验针对Eg-TSP14和Eg-TSP33进行了克隆、原核表达以及免疫原性初步研究,以期为Eg-TSP14和Eg-TSP33是否具有作为疫苗候选抗原的潜力提供理论基础。目的:克隆Eg-TSP14以及Eg-TSP33基因,并构建重组pET-32a-TSP14以及pET-32a-TSP33质粒,转化至大肠杆菌中进行原核表达,并将重组蛋白免疫小鼠对其免疫原性进行初步研究。方法:（1）以细粒棘球绦虫成虫、原头蚴和包囊壁的cDNA为模板,利用荧光定量PCR技术进行扩增,分析两个基因在虫体不同发育阶段的差异表达情况。（... 

【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

SOPMA预测Eg-TSP14二级结构

20通过SWISS-MODEL软件对Eg-TSP14以及Eg-TSP33的三级结构进行预测分析，结果显示Eg-TSP14以及Eg-TSP33的三级结构如图所示。3.4Eg-TSP14以及Eg-TSP33结构域分析用DOMAIN软件对Eg-TSP14以及Eg-TSP33的结构域进行分析，结果显示，Eg-TSP14以及Eg-TSP33含有四个跨膜结构域：小外环（EC1），较大的外环（EC2），小内环（IL）和短的细胞质尾。它们包括4-6个保守的细胞外半胱氨酸残基和跨膜结构域内的极性残基。Eg-TSP14LEL结构位于77-187位氨基酸，Eg-TSP33LEL结构位于103-227位氨基酸，包括了CCG序列。用TMHMM对Eg-TSP14以及Eg-TSP33跨膜区进行分析，结果显示，Eg-TSP14图2-1SOPMA预测Eg-TSP14二级结构Fig2-1SOPMApredictionofEg-TSP14secondarystructure图2-2SOPMA预测Eg-TSP33二级结构Fig2-2SOPMApredictionofEg-TSP33secondarystructure图2-4SWISS-MODEL预测Eg-TSP33三级结构Fig2-4SWISS-MODELpredictionofEg-TSP33tertiarystructure图2-3SWISS-MODEL预测Eg-TSP14三级结构Fig2-3SWISS-MODELpredictionofEg-TSP14tertiarystructure

20通过SWISS-MODEL软件对Eg-TSP14以及Eg-TSP33的三级结构进行预测分析，结果显示Eg-TSP14以及Eg-TSP33的三级结构如图所示。3.4Eg-TSP14以及Eg-TSP33结构域分析用DOMAIN软件对Eg-TSP14以及Eg-TSP33的结构域进行分析，结果显示，Eg-TSP14以及Eg-TSP33含有四个跨膜结构域：小外环（EC1），较大的外环（EC2），小内环（IL）和短的细胞质尾。它们包括4-6个保守的细胞外半胱氨酸残基和跨膜结构域内的极性残基。Eg-TSP14LEL结构位于77-187位氨基酸，Eg-TSP33LEL结构位于103-227位氨基酸，包括了CCG序列。用TMHMM对Eg-TSP14以及Eg-TSP33跨膜区进行分析，结果显示，Eg-TSP14图2-1SOPMA预测Eg-TSP14二级结构Fig2-1SOPMApredictionofEg-TSP14secondarystructure图2-2SOPMA预测Eg-TSP33二级结构Fig2-2SOPMApredictionofEg-TSP33secondarystructure图2-4SWISS-MODEL预测Eg-TSP33三级结构Fig2-4SWISS-MODELpredictionofEg-TSP33tertiarystructure图2-3SWISS-MODEL预测Eg-TSP14三级结构Fig2-3SWISS-MODELpredictionofEg-TSP14tertiarystructure

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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[2]日本血吸虫重组SjTsp2/Sj29表膜蛋白疫苗对小鼠免疫效果的研究[D]. 雷娜.安徽医科大学 2014



本文编号：2978909