HBD3抗结核能力鉴定及抗结核转基因牛生产

发布时间：2021-01-18 06:18

　　牛的结核病是一种动物的慢性传染病，临床上以在肺和其他器官上形成肉芽肿为主要病理特点。这种疾病能够传染奶牛和其他家畜，同时也能感染野生动物。牛的结核杆菌分布于世界各个角落，每年都会引起巨大的经济损失，其中对奶牛的产业化生产影响更为严重。因此发现一种合适的方法降低这种损失变得尤为紧迫和重要。前期的文献证明人的防御素（HBDs）在结核的发展过程中对结核杆菌有一定的抑制作用。因此在本实验中首先纯化了HBD3蛋白并通过大肠杆菌和葡萄球菌测定了其生物学活性，而后验证了HBD3蛋白对结核杆菌的抑制作用。而后构建HBD3真核表达载体，利用体细胞核移植技术获得了转HBD3基因的转基因牛。（1）本文首先纯化了GST-HBD3蛋白，通过Xa酶切后获得纯化的rHBD3蛋白，对其生物学活性鉴定表明其对大肠杆菌无明显的抑制作用，而对金黄色葡萄球菌有显著的抑制作用。（2）使用纯化的rHBD3蛋白对结核杆菌做抗菌性分析，结果表明纯化的HBD3蛋白对结核杆菌最小抑菌浓度为20μg.ml-1，同时结核杆菌对靶细胞侵染时，靶细胞会释放HBD3。（3） Muc1蛋白在牛上的分布表明可以将muc1启动子应用于抗结核研究中，同时... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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精子载体法产生转基因动物的过程

图 1-1 精子载体法产生转基因动物的过程s to the production of genetically modified animals via SMGT(Smith and S细胞介导的转基因（ES cell）涉及到具有全能性的胚胎干细胞的分离，全能性的胚胎干细力，同时也能够产生完整的生命体。然后将外源 DNA 通过同养的胚胎干细胞基因组中，并把这些包含有外源 DNA 的细胞，最终形成嵌合体动物（图 1-2）。这项技术对于发育过程作用。

图 1-3 体细胞克隆技术获得 Dolly 羊的过程ig1-3. Diagram of the nuclear transfer procedure that produced the dolly sheep(Mia病毒介导的转基因（Retrovirus-mediated gene transfer）毒是一种遗传物质为 RNA 而不是 DNA 的病毒，在腺病毒介导的转基够作为载体将外源基因导入到宿主细胞中，形成嵌合体，最后形成包的有机体或者动物体。这种嵌合体动物经过自交 20 代之后会获得纯毒介导的转基因最早开始于 90 年代中期。腺病毒作为载体最重要的性和转基因的效率高效性。当细胞被腺病毒感染后，合成的病毒 DN因整合后，变为宿主细胞基因组的一部分并能使宿主细胞维持寿命Nase 的光敏区是腺病毒载体偏爱的结合位点(Jaenisch 1988)。殖干细胞技术（Germline stem cell technique）干细胞技术分为精子发生细胞技术和原生殖细胞技术。雄性生togonial stem cell，SSCs），是在动物睾丸中分离到的一种具有自

【参考文献】：
期刊论文
[1]转基因动物新技术研究进展[J]. 罗庆苗,苗向阳,张瑞杰.  遗传. 2011(05)
[2]小鼠精子形成各阶段转基因效率的研究[J]. 张鑫,苗向阳,尹逊河,马艳芳,曲朝杰,张秋婷.  生物化学与生物物理进展. 2009(08)



本文编号：2984445