迟缓爱德华菌外膜蛋白PagC原核表达及免疫保护作用

发布时间：2021-01-18 19:58

　　为研究迟缓爱德华菌外膜蛋白PagC的免疫原性,用PCR方法扩增迟缓爱德华菌pagC基因,构建重组载体pET-32a-pagC,将其转化大肠埃希菌BL21后进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析显示,重组蛋白大小约40 ku;将纯化的重组蛋白免疫小鼠后,以迟缓爱德华菌强毒株ET-13攻毒,结果该重组蛋白对免疫组小鼠具有95%的保护率。研究结果为重组PagC蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础。 

【文章来源】：动物医学进展. 2020,41(09)北大核心

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

重组蛋白对小鼠免疫保护力

免疫小鼠血清的抗体水平变化

利用PCR方法扩增出完整的pagC基因,经测序后与参考序列比对分析显示(图1),爱德华菌属成员间pagC基因高度保守,但与其他细菌缺少序列同源性。以pMD18-T-pagC为模板PCR扩增用于表达的pagC片段(图2),大小为558 bp,构建重组载体pET-32a-pagC经EcoRⅠ/SalⅠ双酶切鉴定,出现大小与PCR结果一致的条带。基因测序结果显示无突变移码。2.2 重组蛋白的表达分析

【参考文献】：
期刊论文
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[2]副猪嗜血杆菌外膜蛋白的免疫原性[J]. 朱必凤,杨旭夫,彭凌,韦昭玉.  中国兽医学报. 2013(06)
[3]A型禽流感病毒不同拷贝数基质蛋白胞外区基因的原核表达及免疫保护力研究[J]. 李洪涛,张新涛,刘明,刘春国,杜金玲,石薇琳,孙恩成.  中国预防兽医学报. 2010(10)
[4]猪链球菌2型MRP-FBP串联表达蛋白对小鼠的免疫保护力[J]. 王宝松,李明义,单虎,曾巧英.  中国兽医科学. 2009(06)



本文编号：2985568