豆状囊尾蚴的RS1基因原核表达和感染家兔驱虫后肌肉营养素含量与驱虫药残留量的分析

发布时间：2021-01-19 23:28

　　豆状囊尾蚴病是由豆状囊尾蚴引起的一种在世界各地均有分布的寄生虫病。对于不同性别、年龄、品种的兔,豆状囊尾蚴均易感,尤其对家兔最易感,造成的危害最严重。豆状囊尾蚴病不仅对家兔的生长发育起到抑制作用,而且感染严重时甚至会导致家兔死亡。因此,给畜牧业发展和人体健康带来严重危害。目前,针对豆状囊尾蚴病的研究,相关报道甚少。本试验选取豆状囊尾蚴为研究对象,并提取其RNA作为模板,根据已发表的猪带绦虫RS1 cDNA序列设计引物,利用RT-PCR技术首次成功获取到TpRS1基因序列,并预测分析TpRS1基因编码蛋白的理化性质、抗原位点、二级结构等多方面。用EcoRⅠ和XhoⅠ酶切后,构建原核表达载体,获得的重组蛋白pGEX-TpRS1经SDS-PAGE进行分析。结果表明,兔豆状囊尾蚴TpRS1基因序列长为275bp,其完整开放阅读框由258个核苷酸组成,并可编码85个氨基酸。TpRS1编码分子质量约为9.6ku的蛋白,理论等电点为9.07。α螺旋在TpRS1二级结构中所占比例最高,为70.59%。经Clustal X软件分析,其他带科绦虫与TpRS1的氨基酸序列有72%以上的同源性,与泡状带绦虫属... 

【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Summary
主要缩略词英汉对照表
第一章 文献综述
    1 带科绦虫种属抗原
        1.1 45W抗原
        1.2 16ku和 18ku
        1.3 CP
        1.4 RS1基因
    2 兔肉品质的研究进展
        2.1 兔肉的营养成分
        2.2 兔肉品质的影响因素
    3 兽药在肉中的残留
第二章 豆状囊尾蚴TpRS1基因克隆、生物信息学分析及原核表达
    1 材料与方法
        1.1 质粒、菌株及实验动物
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器设备
        1.4 豆状囊尾蚴总RNA的提取
        1.5 兔豆状囊尾蚴TpRS1基因的克隆
        1.6 豆状囊尾蚴TpRS1基因的ORF序列和氨基酸序列分析
        1.7 豆状囊尾蚴TpRS1生物信息学分析
        1.8 同源性比较及系统进化分析
        1.9 重组表达质粒pGEX-TpRS1的构建
        1.10重组蛋白的诱导表达
    2 结果
        2.1 兔豆状囊尾蚴TpRS1基因的克隆
        2.2 TpRS1基因的ORF序列分析
        2.3 豆状囊尾蚴TpRS1基因的生物信息学分析
        2.4 重组质粒pGEX-TpRS1的酶切鉴定
        2.5 重组蛋白的表达
    3 讨论
第三章 驱虫药对人工感染豆状囊尾蚴家兔肌肉主要营养素含量的影响
    1 材料与方法
        1.1 虫种来源
        1.2 实验动物
        1.3 主要仪器
        1.4 主要试剂
        1.5 试验药物
        1.6 人工感染
        1.7 驱虫试验
        1.8 兔肌肉营养素含量的测定
        1.9 数据处理
    2 结果
        2.1 驱虫后水分含量的变化分析
        2.2 驱虫后灰分含量的变化分析
        2.3 驱虫后蛋白质含量的比较分析
        2.4 驱虫后脂肪含量的比较分析
    3 讨论
第四章 家兔体内伊维菌素的药物残留量的检测
    1 材料与方法
        1.1 试验动物
        1.2 主要仪器
        1.3 主要试剂
        1.4 标准溶液的制备
        1.5 色谱分析条件
        1.6 样品处理
        1.7 伊维菌素标准品的线性关系
        1.8 加标回收试验
        1.9 样品含量测定
    2 结果
        2.1 线性回归方程
        2.2 方法的回收率
        2.3 样品含量测定
    3 讨论
第五章 全文结论
参考文献
致谢
作者简介
导师简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]豆状带绦虫TPO18基因的原核表达及保护性分析[J]. 韩进欢,苟惠天,尚清炎,孙晓林.  中国农业科学. 2014(15)
[2]豆状带绦虫Tp18基因的原核表达及其产物的抗原性分析[J]. 杨德英,陈林,古小彬,赖松家,孙家刚,杨光友.  畜牧兽医学报. 2013(11)
[3]福建黄兔肌肉营养成分测定分析[J]. 陈岩锋,陈冬金,孙世坤,谢喜平,刘景,王丽辉,郑真珠,谢恺舟,吴信生.  中国草食动物. 2011(05)
[4]兔豆状囊尾蚴Tp14基因的克隆及其序列分析[J]. 王秋霞,张少华,骆学农,翟军军,贾万忠,张海瑞,才学鹏.  中国预防兽医学报. 2010(10)
[5]家兔豆状囊尾蚴病用药效果观察[J]. 杜守信,孙兰英,陈占洲.  四川畜牧兽医. 2010(01)
[6]家兔囊虫病的诊断与防治[J]. 许伟.  畜牧兽医杂志. 2009(04)
[7]猪肉组织中阿维菌素类药物残留的高效液相色谱-串联质谱法测定[J]. 赵东豪,贺利民,聂建荣,洪振涛,连槿,刘雅红,彭聪.  分析测试学报. 2008(08)
[8]不同冷却工艺对冷却兔肉肉质特性的影响[J]. 王卫,苟兴华.  食品工业科技. 2008(06)
[9]肉兔豆状囊尾蚴病的危害性研究[J]. 周永学,杜爱芳,张雪娟,吴永明,童凤英,吴广运.  浙江农业科学. 2008(03)
[10]阿维菌素残留检测中不同SPE柱净化效果的比较研究[J]. 张启迪,邹明,刘文华,曲志娜,刘焕奇.  中国动物检疫. 2007(12)



本文编号：2987895