口蹄疫病毒前导蛋白对病毒感染性的影响
发布时间：2021-01-21 22:39
口蹄疫（Foot-and-mouth disease,FMD）是由口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus,FMDV）引起的一种急性热性高度传染性疾病,主要感染猪牛羊等偶蹄动物。FMDV为单链正链RNA病毒,只有一个开放阅读框,其中前导蛋白基因位于ORF的5’端；前导蛋白在影响病毒毒力方面发挥重要作用。口蹄疫病毒前导蛋白长度一般为201aa,国家口蹄疫参考实验室分离到了三株具有不同长度前导蛋白的缅甸98系口蹄疫病毒,其中O/CHN/Mya98/33-P为200aa,O/CHN/Mya98/HN1为201aa,O/GSLX/2010为202aa。为研究三株口蹄疫病毒前导蛋白对病毒感染性的影响,本研究运用反向遗传操作技术,以O/CHN/93现用疫苗株的感染性克隆为骨架,分别构建了含口蹄疫病毒中国分离株O/CHN/Mya98/33-P前导蛋白Lab、La及Lb的三个嵌合全长cDNA质粒,含O/CHN/Mya98/HN1前导蛋白Lab、La及Lb的三个嵌合全长cDNA克隆,含O/GSLX/2010前导蛋白Lab、La的两个嵌合全长cDNA克隆。这8个嵌合全长cDNA...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
口蹄疫病毒基因组结构不意图
嵌合病毒毒力下降的根本原因还不是很清楚(Piccone M. E.et al.，20ir)。在构建LP?缺失型cDNA克隆时(如图1.2所示），必须保留两个起始密码子及其之间的序列，病毒才能够被拯救，这表明两起始密码子之间的区域可能与细胞内调控翻译的因子相互作用；但是只缺失两个起始密码子之间区域的序列，可以拯救到完整的活病毒粒子，只是其病毒的复制水■平相对于未缺失的原毒有所下降。完全缺失L蛋白基因序列不能够拯救到活的病毒粒子，但是单纯缺失Lb区域或者两个起始密码子之间的序列能够拯救到活的病毒粒子，表明L蛋白的编码序列能够影响病毒病毒的复制(Belsham G let al.,2013),但是其影响病毒复制的分子机制还不是很清楚。Lab Lb 在BHK_2彳细胞内的接救情况Ay/5 FMDV A Lab 一FMDV A Lb MJG^i^UG +FMDV LbAUGmut tlGG +AUG ——^~- 丄FMDV A Labspacer ’"”_______—图1. 2不同L蛋白缺失型感染性克隆示意图及其在BHK-21细胞内被極救的情况Fig.2 Different Foot and Mouth Disease Virus Leader Protein Deleted Infectious Clone and the situationof its rescue in BHK-21wtFMDV:野生型全长FMDVcDNA克隆；FMDVALab:缺失全部Lab的FMDV cDNA克隆；FMDVALb:只缺失Lb的FMDV cDNA克隆：FMDVALbAUGmut：第一个起始密码子突变为UGG
图1.3 L蛋白的高级结构及关键性氣基酸Fig. 1.3 The tertiary structure of leader protein and its critical amino acid1.2.3 l/r"影响病毒的毒力利用基因工程缺失L基因的FMDV相比野生型FMDV表现出微小的细胞病变反应，缺失
本文编号：2992012
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
口蹄疫病毒基因组结构不意图
嵌合病毒毒力下降的根本原因还不是很清楚(Piccone M. E.et al.，20ir)。在构建LP?缺失型cDNA克隆时(如图1.2所示），必须保留两个起始密码子及其之间的序列，病毒才能够被拯救，这表明两起始密码子之间的区域可能与细胞内调控翻译的因子相互作用；但是只缺失两个起始密码子之间区域的序列，可以拯救到完整的活病毒粒子，只是其病毒的复制水■平相对于未缺失的原毒有所下降。完全缺失L蛋白基因序列不能够拯救到活的病毒粒子，但是单纯缺失Lb区域或者两个起始密码子之间的序列能够拯救到活的病毒粒子，表明L蛋白的编码序列能够影响病毒病毒的复制(Belsham G let al.,2013),但是其影响病毒复制的分子机制还不是很清楚。Lab Lb 在BHK_2彳细胞内的接救情况Ay/5 FMDV A Lab 一FMDV A Lb MJG^i^UG +FMDV LbAUGmut tlGG +AUG ——^~- 丄FMDV A Labspacer ’"”_______—图1. 2不同L蛋白缺失型感染性克隆示意图及其在BHK-21细胞内被極救的情况Fig.2 Different Foot and Mouth Disease Virus Leader Protein Deleted Infectious Clone and the situationof its rescue in BHK-21wtFMDV:野生型全长FMDVcDNA克隆；FMDVALab:缺失全部Lab的FMDV cDNA克隆；FMDVALb:只缺失Lb的FMDV cDNA克隆：FMDVALbAUGmut：第一个起始密码子突变为UGG
图1.3 L蛋白的高级结构及关键性氣基酸Fig. 1.3 The tertiary structure of leader protein and its critical amino acid1.2.3 l/r"影响病毒的毒力利用基因工程缺失L基因的FMDV相比野生型FMDV表现出微小的细胞病变反应，缺失
本文编号：2992012
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