利用分子生物技术研究益生菌对断奶仔猪生长及粪便菌群的影响

发布时间：2021-01-23 10:00

　　仔猪是现代化养猪生产的核心,其健康状况对后期的生长发育产生极其重要的影响。现代养殖中,为提高效益仔猪实行早期断奶。断奶后,食物由母乳变为饲料,再加上环境的改变,加剧断奶应激。导致仔猪免疫力下降,腹泻率及死亡率升高,给养殖业带来巨大的损失。为减少这一风险,在过去的50多年里,抗生素作为生长促进因子被大量用于畜禽养殖业,为养殖业做出了巨大贡献。但是,抗生素的长期大量使用,破坏了机体的微生态平衡,导致耐药菌的产生和细菌的变异,并容易造成动物内源性感染或二次感染,同时,肉制品中的药物残留时有发生,直接威胁人类的健康。因此,寻找无毒无害无残留抗生素替代品迫在眉睫。在众多潜在的替代品中,益生菌以其独特的益生理念而备受推崇。本文以断奶仔猪为研究对象,研究了不同剂量的枯草芽孢杆菌,粪肠球菌,丁酸梭菌和凝结芽孢杆菌对仔猪生产性能、腹泻率、血液生化指标及粪便菌群的影响。随后,以此为基础,组成复合制剂,评价其对断奶仔猪生长的影响。在技术手段上,采用分子生物学技术,变性梯度凝胶电泳（DGGE）和实时荧光定量PCR （Real-timePCR）,结合微生物分子生态学方法研究益生菌对粪便菌群结构组成的影响。（1）... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：130 页

【学位级别】：博士

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目录
摘要
Abstract
縮略语表
第1章 前言
    1.1 生猪养殖概况
    1.2 仔猪生理特征
        1.2.1 仔猪消化道
        1.2.2 仔猪免疫系统
        1.2.3 仔猪断奶应激
    1.3 饲用抗生素的贡献及风险
        1.3.1 抗生素促生长机制
        1.3.2 抗生素面临的风险
        1.3.3 抗生素禁用对养殖业的影响
    1.4 饲用抗生素替代品
        1.4.1 益生菌制剂
        1.4.2 酶制剂
        1.4.3 功能寡糖
        1.4.4 抗菌肽
    1.5 益生菌研究进展
        1.5.1 概述
        1.5.2 常见的益生菌种类
        1.5.3 益生菌作用机制
    1.6 肠道微生物研究进展
        1.6.1 概述
        1.6.2 结构与组成
        1.6.3 微生态平衡
        1.6.4 肠道微生物功能
    1.7 分子生态学研究技术进展
        1.7.1 变性梯度凝胶电泳（DGGE）
        1.7.2 实时荧光定量PCR
        1.7.3 高通量测序技术
    1.8 研究目的与意义
第2章 Bacillus subtilis KN-42对断奶仔猪生长性能、腹泻及粪便菌群的影响
    2.1 材料与方法
        2.1.1 菌株
        2.1.2 动物和试验设计
        2.1.3 饲养管理及样品采集
        2.1.4 DNA提取
        2.1.5 Polymerase chain reaction
        2.1.6 Denaturing gradient gel electrophoresis操作方法
        2.1.7 Denaturing gradient gel electrophoresis分析
        2.1.8 Real-time PCR分析
        2.1.9 统计分析
    2.2 结果与分析
        2.2.1 生长性能
        2.2.2 腹泻率
        2.2.3 DGGE细菌群落分析
        2.2.4 Real-time PCR
    2.3 讨论
第3章 Enterococcus faecalis LAB31对断奶仔猪生长性能、腹泻、血液生化指标及粪便菌群的影响
    3.1 材料与方法
        3.1.1 菌株
        3.1.2 动物和试验设计
        3.1.3 饲养管理及样品采集
        3.1.4 PCR-DGGE
        3.1.5 统计分析
    3.2 结果与分析
        3.2.1 生长性能
        3.2.2 腹泻率
        3.2.3 血液学参数
        3.2.4 DGGE细菌群落分析
        3.2.5 Real-time PCR
        3.2.6 Lactobacillus DGGE
    3.3 讨论
第4章 Clostridium butyricum B1对断奶仔猪生长性能、腹泻及粪便菌群的影响
    4.1 材料与方法
        4.1.1 菌株
        4.1.2 动物和试验设计
        4.1.3 饲养管理及样品采集
        4.1.4 DNA提取
        4.1.5 PCR-DGGE
        4.1.6 统计分析
    4.2 结果与分析
        4.2.1 生长性能
        4.2.2 腹泻率
        4.2.3 血液学参数
        4.2.4 DGGE细菌群落分析
        4.2.5 Lactobacillus DGGE分析
    4.3 讨论
第5章 Bacillus coagulans F5对断奶仔猪生长性能、腹泻及粪便菌群的影响
    5.1 材料与方法
        5.1.1 菌株
        5.1.2 动物和试验设计
        5.1.3 饲养管理及样品采集
        5.1.4 PCR-DGGE
        5.1.5 Real-time PCR
        5.1.6 统计分析
    5.2 结果与分析
        5.2.1 生长性能和腹泻率
        5.2.2 DGGE细菌群落分析
        5.2.3 Lactobacillus DGGE分析
        5.2.4 定量PCR分析
    5.3 讨论
第6章 复合益生菌对断奶仔猪生长性能、腹泻、挥发性脂肪酸及粪便菌群的影响
    6.1 材料与方法
        6.1.1 菌株
        6.1.2 动物和试验设计
        6.1.3 饲养管理及样品采集
        6.1.4 PCR-DGGE
        6.1.5 挥发性脂肪酸（VFA）含量测定
        6.1.6 统计分析
    6.2 结果与分析
        6.2.1 生长性能
        6.2.2 腹泻率
        6.2.3 挥发性脂肪酸
        6.2.4 DGGE细菌群落分析
    6.3 讨论
第7章 结论与展望
    7.1 结论
    7.2 创新点
    7.3 肠道微生物功能研究展望
    7.4 益生菌产品展望
    7.5 课题发展方向
参考文献
作者简历
攻读博士学位期间撰写和发表的论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]肠道菌群研究方法进展[J]. 窦会娟,郭文涛,王婷婷,李林珂.  中国微生态学杂志. 2014(01)
[2]复合益生菌对高热环境中仔猪生长性能、肠道菌群和热休克蛋白表达的影响[J]. 蒋加进,甘芳,胡志华,陈兴祥,刘永杰,黄克和.  江苏农业学报. 2013(05)
[3]肠道微生物与人体健康的研究进展[J]. 翟齐啸,田丰伟,王刚,陈卫.  食品科学. 2013(15)
[4]变性梯度凝胶电泳技术在微生态学研究中应用的进展[J]. 程翔,杨景云,马淑霞,王春敏.  中国微生态学杂志. 2013(04)
[5]复合益生菌对仔猪生产性能影响的研究[J]. 刘洪明,王俊卿,王彬,宋玉财,于晓云,刘占利,杨玉华,赵明晓,张健.  山东畜牧兽医. 2013(01)
[6]复合微生态制剂对断奶仔猪生产性能、粪便菌群及血液指标的影响[J]. 张建梅,李晓颖,谢全喜,于佳民,汪官保,李传友,谷巍.  中国微生态学杂志. 2012(09)
[7]微生物分子生态学研究方法的新进展[J]. 吕昌勇,陈朝银,葛锋,刘迪秋,孔祥君.  中国生物工程杂志. 2012(08)
[8]抗菌肽和抗生素对断奶仔猪生长性能的影响[J]. 刘显军,丁雪,陈静,李建涛,张飞.  中国畜牧兽医. 2012(07)
[9]不同芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能的影响[J]. 周映华,吴胜莲,胡新旭,高书锋,周小玲,缪东,刘惠知.  饲料工业. 2012(03)
[10]Gut Bacterial and Lactobacilli Communities of Weaning Piglets in Response to Mannan Oligosaccharide and Sugar Beet Pulp In vitro Fermentation[J]. HANG Su-qin and ZHU Wei-yun Laboratory of Gastrointestinal Microbiology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, P.R.China.  Journal of Integrative Agriculture. 2012(01)



本文编号：2995022