鸡肝细胞中C/EBPα基因的敲低及对糖脂代谢相关基因表达的影响

发布时间：2021-01-27 15:51

　　C/EBPα即CCAAT/增强子结合蛋白α基因,其编码的CCAAT/增强子结合蛋白是重要的转录调控因子,在细胞的分化和代谢过程中发挥着重要的调节作用。试验利用RNAi来敲低鸡LMH细胞系中C/EBPα基因的表达,以研究C/EBPα基因影响脂肪代谢的机制。根据鸡C/EBPα基因的mRNA序列,设计3对siRNA,用RNAi干扰技术来敲低鸡LMH细胞中的C/EBPα基因表达,然后用荧光定量PCR检测C/EBPα基因的表达情况,发现其中的C/EBPα-siRNA-161能够显著降低C/EBPα基因的表达;并将C/EBPα-siRNA-161转染LHM细胞后48 h后,利用荧光定量PCR检测LMH细胞中糖脂代谢相关基因（PCK1、SCD、GLUT2、PPARγ、INS、G6PC、IGF1、IGF2、INSR、STAT3）的表达,发现在LMH细胞中PCK1、G6PC、GLUT2基因的mRNA表达量下降,结果表明C/EBPα基因能影响糖代谢相关基因G6PC、GLUT2、甘油异生相关基因PCK1的表达,证实了C/EBPα基因对鸡肝细胞中的糖脂代谢具有调控作用,通过调控C/EBPα基因的表达将影响糖吸... 

【文章来源】：中国家禽. 2020,42(04)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

siC/EBPα-161干扰鸡C/EBPα基因对糖脂代谢相关基因表达的影响

根据C/EBPα序列设计四对双链siRNA，分别为位于161位（siC/EBPα-161）、383位（siC/EBPα-383）和941位（siC/EBPα-941），以及阴性对照（siC/EBPα-NC）为Scramble siRNA。siC/EBPα-161、siC/EBPα-383、siC/EBPα-941和si-NC分别转染LMH细胞，48 h后分别提取细胞总RNA。以β-actin做内参，检测C/EBPα的mRNA表达，结果见图1。转染siC/EBPα-161和siC/EBPα-941后，LMH细胞中C/EBPαmRNA表达量下降，其中转染siC/EBPα-161后C/EBPαmRNA表达量显著下降（P<0.01），而转染siC/EBPα-383后，未使C/EBPαmRNA表达量下降。三种C/EBPαsiRNA中siC/EBPα-161的干扰表达效果最好。本试验后期用siC/EBPα-161对LMH细胞中敲低C/EBPα，研究该基因对糖脂代谢所产生的影响。2.2 鸡的LMH肝细胞中C/EBPα基因干扰后对糖脂代谢相关基因表达的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]RNAi作用机制及应用研究进展[J]. 冯小艳,张树珍.  生物技术通报. 2017(05)
[2]RNAi机制及在植物中应用的研究概述[J]. 崔喜艳,孙小杰,刘忠野,张继伟.  吉林农业大学学报. 2013(02)
[3]糖尿病肾病遗传学研究进展[J]. 李俊燕,谭英姿,冯国鄞,贺林,周里钢,陆灏.  遗传. 2012(12)



本文编号：3003313