RUNX1和RUNX2在奶山羊卵巢颗粒细胞中的表达调控机理及功能研究
发布时间：2021-01-28 08:42
RUNX1和RUNX2是转录因子RUNX家族成员,在人和鼠的卵泡发育和排卵等多种生殖过程中扮演着重要的角色,然而它们在奶山羊卵泡中的表达调控机理仍不是十分清晰。因此,本研究以关中奶山羊卵巢颗粒细胞为研究对象,使用免疫组化、免疫荧光、real-time PCR、western blot、ELISA、CCK-8、EdU和流式细胞术等方法,研究了hCG、miR-181b和miR-222在关中奶山羊卵巢颗粒细胞中对RUNX1和RUNX2的表达调控机理,以及RUNX1、RUNX2、miR-181b和miR-222对奶山羊卵巢颗粒细胞增殖、凋亡以及激素分泌的作用。主要研究结果如下:1.RUNX1和RUNX2在关中奶山羊卵巢组织中的表达分析Real-time PCR的结果显示,RUNX1和RUNX2 mRNA在关中奶山羊的心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脂肪、乳腺、子宫、输卵管和卵巢组织中均有表达,在乳腺中表达量最高,在肌肉中表达量最低。免疫组化分析结果表明,RUNX1和RUNX2蛋白在腔前卵泡的颗粒细胞和卵母细胞,有腔卵泡的颗粒细胞、卵母细胞和膜细胞,以及黄体中表达。2.hCG对奶山羊卵巢颗粒细胞中RU...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：112 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
RUNX与信号通路网络图(Itoetal.2015)
、RUNX2 和 RUNX3，它们拥有一个由 128 个氨基酸组成的高度保守合的 Runt 结构域（与果蝇 Runt 基因高度同源）(Kagoshima et al. 1993（)图亚基的 RUNX1、RUNX2 和 RUNX3 可以与作为 β 亚基的转录因子 PEBP成异二聚体，通过Runt结构域特异性地识别DNA保守序列PyGPyGGTPhimoto 1998)。CBFβ 可以增强 RUNX 家族成员与 DNA 的结合能力，保持稳定，避免 RUNX 蛋白的降解。CBFβ 缺失型小鼠与 RUNX1 缺失型小全一致(Okuda et al. 1996; Wang et al. 1996)。与 RUNX1 相似，在严重的常发现由染色体易位造成的 CBFβ 变异(Ito 2004)。并且 CBFβ 可以与 R调节骨骼的形成(Yoshida et al. 2002; Komori 2015)。然而，CBFβ 的表达X 表达模式一致，因此有研究者推测 CBFβ 和 RUNX 可能具有相互独立设还需要进一步的试验证明。除此之外，RUNX 家族成员还可以与多梳olycomb repressive complex 1，PRC1）(Yu et al. 2012)、组蛋白去乙酰化酶lases ， HDACs ） (Guo and Friedman 2011) 、赖氨酸甲基转移酶 2Aransferase 2A，KMT2A，又称 MLL）(Huang et al. 2011a)以及转录激活因乙酰转移酶(Wee et al. 2008)结合，增强转录活性。
基因全长大约 220 kb，包含 8 个外显子；而 RUNX3 是长度最短的基因，约有 67 kb 长，包含 6 个外显子(Levanon et al. 1994; Zhang et al. 1997; Levanon and Groner 2004)。基于基因结构的复杂程度，推测 RUNX3 是 RUNX 家族中 3 个基因中最原始、最保守的一个(Bangsow et al. 2001)，然而仍然需要更加详细准确的遗传进化分析结果来验证这一推测(Rennert et al. 2003)。由于 RUNX1、RUNX2 和 RUNX3 均拥有 2 个不同的启动子（P和 P2）、多个 polyA 位点、以及外显子遗漏选择性剪接事件的发生，因此形成了多种可变剪接体，使 RUNX 的功能更加复杂化、多样化(Wang et al. 2010a)（图 1-3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Advances in circulating microRNAs as diagnostic and prognostic markers for ovarian cancer[J]. Hong Zheng,Jia-Yu Liu,Feng-Ju Song,Ke-Xin Chen. Cancer Biology & Medicine. 2013(03)
博士论文
[1]奶山羊卵巢颗粒细胞中TIMP3基因的表达调控及功能研究[D]. 彭甲银.西北农林科技大学 2016
[2]多羔和单羔奶山羊发情期卵巢组织差异表达基因的筛选、鉴定及分析[D]. 朱广琴.西北农林科技大学 2011
本文编号：3004689
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：112 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
RUNX与信号通路网络图(Itoetal.2015)
、RUNX2 和 RUNX3，它们拥有一个由 128 个氨基酸组成的高度保守合的 Runt 结构域（与果蝇 Runt 基因高度同源）(Kagoshima et al. 1993（)图亚基的 RUNX1、RUNX2 和 RUNX3 可以与作为 β 亚基的转录因子 PEBP成异二聚体，通过Runt结构域特异性地识别DNA保守序列PyGPyGGTPhimoto 1998)。CBFβ 可以增强 RUNX 家族成员与 DNA 的结合能力，保持稳定，避免 RUNX 蛋白的降解。CBFβ 缺失型小鼠与 RUNX1 缺失型小全一致(Okuda et al. 1996; Wang et al. 1996)。与 RUNX1 相似，在严重的常发现由染色体易位造成的 CBFβ 变异(Ito 2004)。并且 CBFβ 可以与 R调节骨骼的形成(Yoshida et al. 2002; Komori 2015)。然而，CBFβ 的表达X 表达模式一致，因此有研究者推测 CBFβ 和 RUNX 可能具有相互独立设还需要进一步的试验证明。除此之外，RUNX 家族成员还可以与多梳olycomb repressive complex 1，PRC1）(Yu et al. 2012)、组蛋白去乙酰化酶lases ， HDACs ） (Guo and Friedman 2011) 、赖氨酸甲基转移酶 2Aransferase 2A，KMT2A，又称 MLL）(Huang et al. 2011a)以及转录激活因乙酰转移酶(Wee et al. 2008)结合，增强转录活性。
基因全长大约 220 kb，包含 8 个外显子；而 RUNX3 是长度最短的基因，约有 67 kb 长，包含 6 个外显子(Levanon et al. 1994; Zhang et al. 1997; Levanon and Groner 2004)。基于基因结构的复杂程度，推测 RUNX3 是 RUNX 家族中 3 个基因中最原始、最保守的一个(Bangsow et al. 2001)，然而仍然需要更加详细准确的遗传进化分析结果来验证这一推测(Rennert et al. 2003)。由于 RUNX1、RUNX2 和 RUNX3 均拥有 2 个不同的启动子（P和 P2）、多个 polyA 位点、以及外显子遗漏选择性剪接事件的发生，因此形成了多种可变剪接体，使 RUNX 的功能更加复杂化、多样化(Wang et al. 2010a)（图 1-3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Advances in circulating microRNAs as diagnostic and prognostic markers for ovarian cancer[J]. Hong Zheng,Jia-Yu Liu,Feng-Ju Song,Ke-Xin Chen. Cancer Biology & Medicine. 2013(03)
博士论文
[1]奶山羊卵巢颗粒细胞中TIMP3基因的表达调控及功能研究[D]. 彭甲银.西北农林科技大学 2016
[2]多羔和单羔奶山羊发情期卵巢组织差异表达基因的筛选、鉴定及分析[D]. 朱广琴.西北农林科技大学 2011
本文编号：3004689
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