旋毛虫感染对卫星细胞的免疫因子调控的研究
发布时间：2021-01-29 19:27
肌卫星细胞是一种干细胞，存在于膜鞘与肌肉纤维间的静止细胞，能与肌肉纤维融合成为先驱细胞应对损伤反应。肌卫星细胞免疫因子的变化直接与旋毛虫治疗自主免疫病、旋毛虫抗病毒免疫有关。目前国内关于旋毛虫感染对卫星细胞免疫微环境调控的系统研究未见报道。本研究拟通过分离原代卫星细胞，利用流式细胞仪和相对荧光定量PCR技术，探究感染旋毛虫后，卫星细胞免疫因子的一系列变化。本研究采用灌胃感染BALB/c小鼠，从感染组和对照组小鼠的后肢骨骼肌中，利用Percoll连续离心和差速贴壁法的结合运用分离出纯度较高的肌卫星细胞，采用Desmin免疫细胞化学染色对其进行鉴定，并对分离所得肌卫星细胞进行体外培养。采用相对荧光定量PCR和流式细胞术，对小鼠感染4d、21d、35d后所分离的卫星细胞进行检测。流式细胞术分析旋毛虫感染的肌卫星细胞，结果表明，当感染旋毛虫后，肌卫星细胞B7-H1表达量增加，而且在35d形成包囊并且炎症反应减弱后，其表达量也未明显减少。而ICOSL的表达量却显著下调。荧光定量PCR分析表明，旋毛虫感染后，肌卫星细胞TLR3表达量增加，尤其是在21d最为明显。PPARs的三个亚型：PPARα、P...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
肌卫星细胞的自我更新模式
果的后肢肌肉经过 Percoll 分离，试管为粉红色的液体，是生长培养基ercoll 之间，是死细胞和细胞碎片于 20％Percoll 和 60％ Percoll 之星细胞；第五层是 60％ Percoll 工图 1.1 所示。
图 1.2 肌卫星细胞的鉴定结果Figure 1.2 Identification results of Muscle satellite cellsA: Muscle satellite cells of anti- α-actin antibodyB: Muscle satellite cells of anti- desmin antibody3 讨论3.1 实验动物及取材选取的实验动物小鼠为 12 g 左右的，因为所提取的卫星细胞属于干细胞，小鼠年龄越大，则肌肉组织中卫星细胞的含量则会越少，因此分离肌卫星细胞应该是选择越小的鼠越好；可是因为小鼠需要灌胃感染旋毛虫，太小的小鼠会因为口服感染旋毛虫肌幼虫后，不能耐受而死亡。因此，综合两方面考虑，则选取了12 g 左右的小鼠，大概是出生后 4 周龄左右的小鼠。
【参考文献】：
期刊论文
[1]寄生虫细胞因子免疫的研究进展(二)[J]. 郭亮,于小桢. 中国动物保健. 2013(07)
[2]B7家族PD-L1和B7-H4的研究进展[J]. 王辉,田波,鲁常青. 细胞与分子免疫学杂志. 2013(02)
[3]干细胞研究进展消息[J]. 朱丽华. 中国细胞生物学学报. 2012(11)
[4]2型糖尿病大鼠肌肉组织中PPAR-γ2基因的表达研究[J]. 龚奥娣. 中药新药与临床药理. 2012(04)
[5]干细胞研究进展及其应用探讨[J]. 李敏,黄旭东,马强,郭亚慧. 绿色科技. 2012(05)
[6]Toll样受体和树突状细胞:免疫激活传感器——2011年诺贝尔生理学或医学奖简介[J]. 陈赛娟,王一煌. 自然杂志. 2011(06)
[7]卫星细胞在骨骼肌修复中的研究进展[J]. 董学亮,成羿,章婵娟. 中华中医药学刊. 2011(03)
[8]骨骼肌卫星细胞的研究进展[J]. 李方华,弓慧敏,冯士彬,庞全海. 中国畜牧兽医. 2010(10)
[9]浅析猪旋毛虫病的发生与防制[J]. 陈瑶. 现代畜牧兽医. 2010(03)
[10]肌肉卫星细胞被证实是干细胞[J]. 生物学通报. 2009(01)
硕士论文
[1]PPAR-γ在哮喘小鼠气道的表达及临床意义[D]. 祝彬.大连医科大学 2012
本文编号：3007469
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
肌卫星细胞的自我更新模式
果的后肢肌肉经过 Percoll 分离，试管为粉红色的液体，是生长培养基ercoll 之间，是死细胞和细胞碎片于 20％Percoll 和 60％ Percoll 之星细胞；第五层是 60％ Percoll 工图 1.1 所示。
图 1.2 肌卫星细胞的鉴定结果Figure 1.2 Identification results of Muscle satellite cellsA: Muscle satellite cells of anti- α-actin antibodyB: Muscle satellite cells of anti- desmin antibody3 讨论3.1 实验动物及取材选取的实验动物小鼠为 12 g 左右的，因为所提取的卫星细胞属于干细胞，小鼠年龄越大，则肌肉组织中卫星细胞的含量则会越少，因此分离肌卫星细胞应该是选择越小的鼠越好；可是因为小鼠需要灌胃感染旋毛虫，太小的小鼠会因为口服感染旋毛虫肌幼虫后，不能耐受而死亡。因此，综合两方面考虑，则选取了12 g 左右的小鼠，大概是出生后 4 周龄左右的小鼠。
【参考文献】：
期刊论文
[1]寄生虫细胞因子免疫的研究进展(二)[J]. 郭亮,于小桢. 中国动物保健. 2013(07)
[2]B7家族PD-L1和B7-H4的研究进展[J]. 王辉,田波,鲁常青. 细胞与分子免疫学杂志. 2013(02)
[3]干细胞研究进展消息[J]. 朱丽华. 中国细胞生物学学报. 2012(11)
[4]2型糖尿病大鼠肌肉组织中PPAR-γ2基因的表达研究[J]. 龚奥娣. 中药新药与临床药理. 2012(04)
[5]干细胞研究进展及其应用探讨[J]. 李敏,黄旭东,马强,郭亚慧. 绿色科技. 2012(05)
[6]Toll样受体和树突状细胞:免疫激活传感器——2011年诺贝尔生理学或医学奖简介[J]. 陈赛娟,王一煌. 自然杂志. 2011(06)
[7]卫星细胞在骨骼肌修复中的研究进展[J]. 董学亮,成羿,章婵娟. 中华中医药学刊. 2011(03)
[8]骨骼肌卫星细胞的研究进展[J]. 李方华,弓慧敏,冯士彬,庞全海. 中国畜牧兽医. 2010(10)
[9]浅析猪旋毛虫病的发生与防制[J]. 陈瑶. 现代畜牧兽医. 2010(03)
[10]肌肉卫星细胞被证实是干细胞[J]. 生物学通报. 2009(01)
硕士论文
[1]PPAR-γ在哮喘小鼠气道的表达及临床意义[D]. 祝彬.大连医科大学 2012
本文编号：3007469
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