肌肉糖酵解对北京黑猪肉质性状的影响及其差异蛋白研究
发布时间：2021-01-30 21:42
本试验通过研究宰后肌肉糖酵解酶活性及其产物含量,了解代谢差异性对肉质性状的影响,并通过蛋白组学的方法揭示影响肉质性状的分子机制。采集北京黑猪（210日龄）胴体背最长肌,测定肉样在宰后24 h的pH、肉色L*值以及72 h滴水损失（Drip loss,DL）值,并检测宰后6 h及24 h PK（丙酮酸激酶）、LDH（乳酸脱氢酶）的活性,以及PA（丙酮酸）、LA（乳酸）的含量。对肉质性状及糖酵解指标进行相关性分析,以揭示宰后猪肌肉糖酵解对肉质性状的影响。利用TMT蛋白组定量技术对猪背最长肌2组样品（G组:高pH值、低肉色L*值、低DL值;B组:低pH值、高肉色L*值、高DL值）,每组4个个体进行差异蛋白筛选和鉴定,分析这些蛋白功能与肉质代谢之间的关系,以期揭示影响肉质代谢性状的分子机理。试验结果如下所示:1.（1）宰后24 h pH均值为5.937、24 h L*均值为50.612、72 h DL均值为1.412;pH值同L*及DL值均呈极显著的负相关（P<0.01）,L*及DL值呈极显著的正相关（P<0.01）。（2）24 h的PK及LDH活性极显著的低于6 h的活性（P&l...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
G和B组间不同个体组织切片HE染色对比图
图 3.2 G 和 B 组间差异肉样肌纤维各项指标差异分析Figure 3.2 analysis of the differences between G and B groups in various indexes of flesh fibe注：p < 0.01（**）为差异极显著；p < 0.05（*）为差异显著；p > 0.05 为差异不显著Note: P < 0.01 (**) was extremely significantly different.P < 0.05 (*) was significantly different.The difference was not significant (P>0.05)3.3.2 差异肉样总蛋白浓度检测结果通过蛋白 Bradford 定量法对样品蛋白浓度进行检测，根据梯度浓度标准蛋白在 540 nm 吸光度值绘制蛋白浓度标准曲线，根据样品检测到的吸光度值和标准曲线的公式，计算得出样品的蛋白质浓度。各样品蛋白质的总量均在 600 ug，蛋白浓度符合试验要求。蛋白样品的浓度。3.3.3 SDS-PAGE 电泳检测结果蛋白质的完整性通过 SDS-PAGE 检测，结果显示（图 3.3），结果显示各个泳道条带清晰可见，蛋白数量众多，无拖带和降解的现象，无论横向还是纵向条带脱色均匀，无混杂，证明本实验样品符合 TMT 实验要求。
图 3.3 SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶）电泳检测结果Figue 3.3 SDS-PAGE（polyacrylamide gel）electrophoresis test results分析酶切的效果评估结果酶酶切特异性评估结果 胰蛋白酶酶切特异性评估的结果可知，完全特异性酶切的肽段所占比切的肽段所占比例为 5.45%，N-端酶切的肽段所占比例为 2.61%，完 0.06%。特异性肽段数目越多，对应的蛋白的可信度越高。本试验特合进行下一步处理。
【参考文献】：
期刊论文
[1]市售壹号土猪肉理化品质及其熟制品感官特性分析[J]. 李享,李瑞丽,刘文营,成晓瑜,贾晓云,王乐,杨凯. 食品研究与开发. 2019(01)
[2]miR-1和miR-369在中外猪种背最长肌中的表达与肉质性状的关系研究[J]. 杨雪梅,顾以韧,梁艳,陶璇,杨跃奎,曾凯,陈晓晖,钟志君,吕学斌. 养猪. 2018(01)
[3]槐猪FTO基因遗传多态性及其与肉质性状相关性研究[J]. 许卫华,赵殿强,黄芬,李虹仪,张茂,孙艳发. 广东农业科学. 2018(01)
[4]屠宰前血糖值与猪肉风味等品质的相关性分析[J]. 李亮,樊福好,许华钊. 养猪. 2017(04)
[5]影响猪肉质性状相关基因的研究进展[J]. 宋志芳,解幼志,刑荷岩,芦春莲,曹洪战. 中国猪业. 2017(07)
[6]高压结合热处理对猪肉风味的影响[J]. 黄业传,李婷婷,龚道楷,李凤. 食品科学. 2018(02)
[7]饲粮能氮水平对不同品种猪肉质性状及相关基因表达的影响[J]. 刘莹莹,李凤娜,李颖慧,印遇龙,孔祥峰. 动物营养学报. 2017(02)
[8]N-糖肽的规模化质谱解析方法进展[J]. 曾文锋,张扬,刘铭琪,吴建强,张晓今,杨皓,刘超,迟浩,张昆,孙瑞祥,杨芃原,贺思敏. 生物化学与生物物理进展. 2016(06)
[9]A gene expression estimator of intramuscular fat percentage for use in both cattle and sheep[J]. Bing Guo,Kritaya Kongsuwan,Paul L Greenwood,Guanghong Zhou,Wangang Zhang,Brian P Dalrymple. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2014(04)
[10]皮下脂肪和肌内脂肪对猪肉风味的作用[J]. 黄业传,贺稚非,李洪军,秦刚,王庭,马明辉. 中国农业科学. 2011(10)
硕士论文
[1]生鲜猪肉品质变化的差异蛋白质组学研究[D]. 黄晓毅.浙江工商大学 2010
[2]氟烷基因型对猪背最长肌MyHC表达和能量代谢的影响以及与肉质的关系[D]. 单斌.南京农业大学 2008
本文编号：3009636
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
G和B组间不同个体组织切片HE染色对比图
图 3.2 G 和 B 组间差异肉样肌纤维各项指标差异分析Figure 3.2 analysis of the differences between G and B groups in various indexes of flesh fibe注：p < 0.01（**）为差异极显著；p < 0.05（*）为差异显著；p > 0.05 为差异不显著Note: P < 0.01 (**) was extremely significantly different.P < 0.05 (*) was significantly different.The difference was not significant (P>0.05)3.3.2 差异肉样总蛋白浓度检测结果通过蛋白 Bradford 定量法对样品蛋白浓度进行检测，根据梯度浓度标准蛋白在 540 nm 吸光度值绘制蛋白浓度标准曲线，根据样品检测到的吸光度值和标准曲线的公式，计算得出样品的蛋白质浓度。各样品蛋白质的总量均在 600 ug，蛋白浓度符合试验要求。蛋白样品的浓度。3.3.3 SDS-PAGE 电泳检测结果蛋白质的完整性通过 SDS-PAGE 检测，结果显示（图 3.3），结果显示各个泳道条带清晰可见，蛋白数量众多，无拖带和降解的现象，无论横向还是纵向条带脱色均匀，无混杂，证明本实验样品符合 TMT 实验要求。
图 3.3 SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶）电泳检测结果Figue 3.3 SDS-PAGE（polyacrylamide gel）electrophoresis test results分析酶切的效果评估结果酶酶切特异性评估结果 胰蛋白酶酶切特异性评估的结果可知，完全特异性酶切的肽段所占比切的肽段所占比例为 5.45%，N-端酶切的肽段所占比例为 2.61%，完 0.06%。特异性肽段数目越多，对应的蛋白的可信度越高。本试验特合进行下一步处理。
【参考文献】：
期刊论文
[1]市售壹号土猪肉理化品质及其熟制品感官特性分析[J]. 李享,李瑞丽,刘文营,成晓瑜,贾晓云,王乐,杨凯. 食品研究与开发. 2019(01)
[2]miR-1和miR-369在中外猪种背最长肌中的表达与肉质性状的关系研究[J]. 杨雪梅,顾以韧,梁艳,陶璇,杨跃奎,曾凯,陈晓晖,钟志君,吕学斌. 养猪. 2018(01)
[3]槐猪FTO基因遗传多态性及其与肉质性状相关性研究[J]. 许卫华,赵殿强,黄芬,李虹仪,张茂,孙艳发. 广东农业科学. 2018(01)
[4]屠宰前血糖值与猪肉风味等品质的相关性分析[J]. 李亮,樊福好,许华钊. 养猪. 2017(04)
[5]影响猪肉质性状相关基因的研究进展[J]. 宋志芳,解幼志,刑荷岩,芦春莲,曹洪战. 中国猪业. 2017(07)
[6]高压结合热处理对猪肉风味的影响[J]. 黄业传,李婷婷,龚道楷,李凤. 食品科学. 2018(02)
[7]饲粮能氮水平对不同品种猪肉质性状及相关基因表达的影响[J]. 刘莹莹,李凤娜,李颖慧,印遇龙,孔祥峰. 动物营养学报. 2017(02)
[8]N-糖肽的规模化质谱解析方法进展[J]. 曾文锋,张扬,刘铭琪,吴建强,张晓今,杨皓,刘超,迟浩,张昆,孙瑞祥,杨芃原,贺思敏. 生物化学与生物物理进展. 2016(06)
[9]A gene expression estimator of intramuscular fat percentage for use in both cattle and sheep[J]. Bing Guo,Kritaya Kongsuwan,Paul L Greenwood,Guanghong Zhou,Wangang Zhang,Brian P Dalrymple. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2014(04)
[10]皮下脂肪和肌内脂肪对猪肉风味的作用[J]. 黄业传,贺稚非,李洪军,秦刚,王庭,马明辉. 中国农业科学. 2011(10)
硕士论文
[1]生鲜猪肉品质变化的差异蛋白质组学研究[D]. 黄晓毅.浙江工商大学 2010
[2]氟烷基因型对猪背最长肌MyHC表达和能量代谢的影响以及与肉质的关系[D]. 单斌.南京农业大学 2008
本文编号：3009636
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