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抗新型鸭细小病毒卵黄抗体的制备、纯化及效价测定

发布时间:2021-01-31 11:19
  为了制备抗新型鸭细小病毒卵黄抗体并改良其制备工艺,试验采用新型鸭细小病毒SD株尿囊液制备的油乳剂灭活苗免疫产蛋鸡,收取高免蛋分别用氯仿法、辛酸法和水稀释-硫酸铵二次沉淀法对其中的卵黄抗体进行提纯,比较提纯效果,然后采用SDS-PAGE和Western-blot法对制备效果进行评价,采用鸭细小病毒抗体酶联免疫检测试剂盒进行效价测定,分析卵黄抗体的消长规律。结果表明:氯仿法提取的卵黄抗体浓度为4.512 mg/mL,透明,呈浅黄色;辛酸法提取的卵黄抗体液浓度为3.422 mg/mL,半透明,呈浅白色;水稀释-硫酸铵二次沉淀法提取的卵黄抗体浓度为3.837 mg/mL,透明,澄清。SDS-PAGE结果显示卵黄抗体有两条特异性条带,一条重链(约为65 ku)和一条轻链(约为33 ku)。制备的卵黄抗体具有特异性。试剂盒测定卵黄抗体效价,氯仿法为1∶6 000;辛酸法为1∶8 000;水稀释-硫酸铵二次沉淀法最高,为1∶10 000,其中水稀释-硫酸铵二次沉淀法效果较优。说明本试验成功制备了新型鸭细小病毒的卵黄抗体。 

【文章来源】:黑龙江畜牧兽医. 2020,(10)北大核心

【文章页数】:4 页

【部分图文】:

抗新型鸭细小病毒卵黄抗体的制备、纯化及效价测定


卵黄抗体消长规律

抗新型鸭细小病毒卵黄抗体的制备、纯化及效价测定


SDS-PAGE检测结果

抗新型鸭细小病毒卵黄抗体的制备、纯化及效价测定


Western-blot检测结果

【参考文献】:
期刊论文
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[3]抗猪流行性腹泻病毒卵黄抗体制剂的研究及其临床应用[J]. 李桂珍,王爱富,李舜,马春全,付强.  中国兽医杂志. 2018(11)
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[10]抗雏番鸭细小病毒鸡源卵黄抗体的制备及保护效果研究[J]. 张元元,刘璐,刘倩宏,苏友鹏.  中国兽医杂志. 2016(10)

硕士论文
[1]鸭细小病毒SD株分离与鉴定及基因组特征分析[D]. 崔元.河北农业大学 2018



本文编号:3010763

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