河南省PRRSV分子流行病学调查及体外抗病毒中药单体的筛选
发布时间：2021-02-01 21:35
猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种猪的急性高度接触性传染病。目前主要依靠接种疫苗来对该病进行预防，尚无有效的治疗药物。且近年来，变异的PRRSV毒株不断出现，给PRRS的预防和治疗带来了更大的困难。因此，对PRRSV变异情况的实地实时监控及找到有效治疗药物成为防治PRRS的重中之重。本研究收集河南省部分地区的82份阳性PRRS病料，应用RT-PCR方法分别扩增其PRRSV的ORF5全基因和Nsp2部分基因，进行测序比对分析，寻找PRRSV毒株的变异特点。结果表明：82份阳性病料的ORF5基因核酸序列间同源性为94.2%～100%；与美洲型株VR-2332、国内变异株JXA1及欧洲型株LV的同源性分别为86.9%～89.7%，95.7%～99.7%及60.8%～66.3%。所扩增的Nsp2基因与VR-2332的相比均存在着两个位点、90个碱基的缺失，提示河南省新近流行毒株基本均为高致病性PRRSV。本研究对河南地区新近流行的PRRSV毒株的ORF5和Nsp2基因的变异情况进行了调查监测，为PRRS区域性防控措施的制定与实施提供了理论基础。为科...
【文章来源】：河南科技大学河南省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PRRSV病毒粒子结构模式图
PRRSV 基因组全长约 15 kb，核酸 5′端有帽子状类似物，3′端有 Poly序列，基因组含有 9 个开放阅读框 (ORFs)（如图 1-2）。其中 ORF1 有分组成，分别是 ORF1a 和 ORF1b ，位于 PRRSV 基因组 5′端非编码前之后，其长度约为整个基因组长度的 80%，为病毒的非结构蛋白编码区病毒的 RNA 复制酶和聚合酶[11-13]。ORF1 上游是 5′端非编码区（UTORF2、ORF3、ORF4 和 ORF5 翻译的分别是糖基化囊膜蛋白 GP2、PG3和 GP5，此外，ORF6 翻译非糖基化囊膜蛋白（M）、ORF7 翻译核衣壳（N）[12-14]。其中 PRRSV 主要的结构蛋白有 ORF5 翻译的 GP5、ORF6 M 和 ORF7 翻译的 N 蛋白。它们都具有很强的免疫原性，对 PRRSV 的诊重要意义[15]。图 1-1 PRRSV 病毒粒子结构模式图Fig.1-1 The virion constructual mode of PRRSV
Reaction reagentReaction volume10× Buffer 2.0μLDNA 10.0μLEcoR I 1.0μLHind III1.0μLddH2O 6.0μL2.3 结果与分析2.3.1 ORF5 基因的扩增结果对采集的疑似 PRRS 病料进行 ORF5 基因的 RT-PCR 扩增，结果显示，有82 份病料为阳性样品，依次编号为 YD-1 至 YD-19、YN-1 至 YN-21、YX-1 至YX-23、YB-1 至 YB-19。1% 琼脂凝胶电泳检测结果与预期目的片段大小相符，部分样品电泳结果如图 2-1。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2种植物多糖对PRRSV灭活苗免疫猪抗体及T淋巴细胞亚群的影响[J]. 张红英,崔保安,王学兵,赵现敏,邱妍. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2010(02)
[2]中药复方提取物及其配合抗生素对猪繁殖与呼吸综合征的疗效观察[J]. 顾文松,沈明华. 饲料工业. 2010(05)
[3]猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防治[J]. 刘庆生. 福建畜牧兽医. 2009(03)
[4]猪繁殖与呼吸综合征防控方法研究进展[J]. 胡奕,宋杰,赵宝华. 动物医学进展. 2009(02)
[5]当前国内外仔猪等孢球虫病的流行现状[J]. 李美娣,武力,陈宝妮,罗华东,谢相科,骆国栋. 养猪. 2009(01)
[6]南板蓝根和北板蓝根抗甲型流感病毒作用的比较研究[J]. 秦华珍,时博,李世阳,樊晓辉,宋得志,冼寒梅. 中华中医药学刊. 2009(01)
[7]金丝桃素体外抗高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒活性的研究[J]. 蒲秀英,梁剑平,许涛,尚若峰,王学红,华兰英,刘宇,邢妍美. 中国兽医科学. 2008(09)
[8]高致病性PRRSV的分离及其Nsp2和ORF5基因的序列分析[J]. 马静云,李浩波,王玲玲,何晓明,王连想,谢青梅,毕英佐. 中国兽医科学. 2008(08)
[9]应用蟾酥巧治生猪高热病[J]. 蒋建兵,施洪林,马良. 兽医导刊. 2008(08)
[10]绿原酸对猪繁殖与呼吸综合征病毒体外作用的研究[J]. 王学兵,崔保安,魏战勇,邱瑾丽,徐端红. 中国农业科技导报. 2008(03)
硕士论文
[1]复方中药“禽康散”对DHV人工感染鸭预防效果研究[D]. 谢理.四川农业大学 2010
本文编号：3013476
【文章来源】：河南科技大学河南省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PRRSV病毒粒子结构模式图
PRRSV 基因组全长约 15 kb，核酸 5′端有帽子状类似物，3′端有 Poly序列，基因组含有 9 个开放阅读框 (ORFs)（如图 1-2）。其中 ORF1 有分组成，分别是 ORF1a 和 ORF1b ，位于 PRRSV 基因组 5′端非编码前之后，其长度约为整个基因组长度的 80%，为病毒的非结构蛋白编码区病毒的 RNA 复制酶和聚合酶[11-13]。ORF1 上游是 5′端非编码区（UTORF2、ORF3、ORF4 和 ORF5 翻译的分别是糖基化囊膜蛋白 GP2、PG3和 GP5，此外，ORF6 翻译非糖基化囊膜蛋白（M）、ORF7 翻译核衣壳（N）[12-14]。其中 PRRSV 主要的结构蛋白有 ORF5 翻译的 GP5、ORF6 M 和 ORF7 翻译的 N 蛋白。它们都具有很强的免疫原性，对 PRRSV 的诊重要意义[15]。图 1-1 PRRSV 病毒粒子结构模式图Fig.1-1 The virion constructual mode of PRRSV
Reaction reagentReaction volume10× Buffer 2.0μLDNA 10.0μLEcoR I 1.0μLHind III1.0μLddH2O 6.0μL2.3 结果与分析2.3.1 ORF5 基因的扩增结果对采集的疑似 PRRS 病料进行 ORF5 基因的 RT-PCR 扩增，结果显示，有82 份病料为阳性样品，依次编号为 YD-1 至 YD-19、YN-1 至 YN-21、YX-1 至YX-23、YB-1 至 YB-19。1% 琼脂凝胶电泳检测结果与预期目的片段大小相符，部分样品电泳结果如图 2-1。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2种植物多糖对PRRSV灭活苗免疫猪抗体及T淋巴细胞亚群的影响[J]. 张红英,崔保安,王学兵,赵现敏,邱妍. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2010(02)
[2]中药复方提取物及其配合抗生素对猪繁殖与呼吸综合征的疗效观察[J]. 顾文松,沈明华. 饲料工业. 2010(05)
[3]猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防治[J]. 刘庆生. 福建畜牧兽医. 2009(03)
[4]猪繁殖与呼吸综合征防控方法研究进展[J]. 胡奕,宋杰,赵宝华. 动物医学进展. 2009(02)
[5]当前国内外仔猪等孢球虫病的流行现状[J]. 李美娣,武力,陈宝妮,罗华东,谢相科,骆国栋. 养猪. 2009(01)
[6]南板蓝根和北板蓝根抗甲型流感病毒作用的比较研究[J]. 秦华珍,时博,李世阳,樊晓辉,宋得志,冼寒梅. 中华中医药学刊. 2009(01)
[7]金丝桃素体外抗高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒活性的研究[J]. 蒲秀英,梁剑平,许涛,尚若峰,王学红,华兰英,刘宇,邢妍美. 中国兽医科学. 2008(09)
[8]高致病性PRRSV的分离及其Nsp2和ORF5基因的序列分析[J]. 马静云,李浩波,王玲玲,何晓明,王连想,谢青梅,毕英佐. 中国兽医科学. 2008(08)
[9]应用蟾酥巧治生猪高热病[J]. 蒋建兵,施洪林,马良. 兽医导刊. 2008(08)
[10]绿原酸对猪繁殖与呼吸综合征病毒体外作用的研究[J]. 王学兵,崔保安,魏战勇,邱瑾丽,徐端红. 中国农业科技导报. 2008(03)
硕士论文
[1]复方中药“禽康散”对DHV人工感染鸭预防效果研究[D]. 谢理.四川农业大学 2010
本文编号：3013476
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