携带2009/H1N1病毒NS基因的H5N1病毒生物学特性研究
发布时间：2021-02-02 14:24
2009年，墨西哥流感爆发，随后便席卷全球，引起了全球性的恐慌，值得庆幸的是，2009/H1N1的致病能力有限，并未给人类带来灾难性的损失。H5N1亚型高致病性禽流感（HPAIV）一直在我国存在，近年来呈散发性流行，给我国的养禽业带来了一定的经济损失。若2009/H1N1和H5N1HPAIV重组，可能会给养禽业和人类带来难以估量的影响。为研究NS基因对流感病毒致病力及传播能力的影响，本实验以一株H5N1禽流感病毒A/duck/Guangxi/35/2001（H5N1; DK/35）为亲本病毒株，利用反向遗传技术，以我国首例甲型H1N1流感病毒分离株A/Sichuan/01/2009（SC/01）的NS基因对DK/35进行单基因替换，拯救出一株H5N1禽流感病毒重组病毒DK/35-SC/01-NS。小鼠实验表明，DK/35的MLD50为2.6log10EID50而DK/35-SC/01-NS为5.9log10EID50，两者间的毒力相差2000倍。为了进一步研究毒力降低的原因，我们用VSV-GFP法对病毒I型IFN的表达情况进行了检测，结果表明，DK/35能抑制IFN的产生，VSV-GF...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：40 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
流感病毒结构
C 端效应结构域位于第 74-230 氨基酸处，其能够介导与多种宿主蛋白的相互作稳定 RBD 的作用( Wang et al., 2002)。RBD 是一个单独的对称的同源二聚体，每个单旋组成，二聚体结构是结合 dsRNA 必须的，RBD 与 dsRNA 以 1:1 的比率结合( ChienNS1 蛋白上的氨基酸 Asp-34、Arg-35、Arg-38、Lys-41、Gly-45、Arg-46 和 Thr-49 可接介导 RBD 与 RNA 的作用，其中 Arg-38 和 Lys-41 对结合 RNA 非常重要。效应结独立的同源二聚体，每个单体由 7 个β折叠和 3 个α螺旋组成。NS1 是一种多功能蛋种活性，与病毒的复制和毒力有关，其作用包括：（1）调节病毒 RNA（vRNA）的控 vRNA 的剪切；（3）调节病毒粒子的形态；（4）抑制宿主的细胞凋亡和免疫反应酸肌醇 3 激酶（PI3K）。所有的这些功能都是基于 NS1 的蛋白与蛋白及蛋白与 RNA实现的。NS1 有两个和定位序列（NLS1 和 NLS2）及一个核输出序列（NES），某些核仁定位序列(NoLS)，NoLS 与 NLS2 相伴。Arg-38 与 Lys-41 与 OAS/RNase L、Jun酶及 RIG-I 的抑制有关。另外，NS1 具有与多种细胞蛋白结合的位点，这些蛋白包括：合蛋白 I (PABPI)、p85β、 内输蛋白α（importin-α）、核仁素（nucleolin）、NS1- hStaufen、 NS1-I、PKR、PACT、CPSF30、PABPII、Crk/CrkL、具有 PDZ 结构域聚合酶、细胞 mRNA 核输出机制成份 (E1B-AP5, p15, NXF1 及 Rae1)( Hale et al., 2
18B3 C31 和 A2 为对照；B1-B3 为 DK/35,B1 为 100稀释度，B2为 10-1稀释度，B3为10-2稀释度；C1-C3为DK/35-SC1 为 100稀释度，C2 为 10-1稀释度，C3 为 10-2稀释度。图 2.3 VSV-GFP 表达情况Fig. 2.3 The expression of VSV-GFP
本文编号：3014841
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：40 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
流感病毒结构
C 端效应结构域位于第 74-230 氨基酸处，其能够介导与多种宿主蛋白的相互作稳定 RBD 的作用( Wang et al., 2002)。RBD 是一个单独的对称的同源二聚体，每个单旋组成，二聚体结构是结合 dsRNA 必须的，RBD 与 dsRNA 以 1:1 的比率结合( ChienNS1 蛋白上的氨基酸 Asp-34、Arg-35、Arg-38、Lys-41、Gly-45、Arg-46 和 Thr-49 可接介导 RBD 与 RNA 的作用，其中 Arg-38 和 Lys-41 对结合 RNA 非常重要。效应结独立的同源二聚体，每个单体由 7 个β折叠和 3 个α螺旋组成。NS1 是一种多功能蛋种活性，与病毒的复制和毒力有关，其作用包括：（1）调节病毒 RNA（vRNA）的控 vRNA 的剪切；（3）调节病毒粒子的形态；（4）抑制宿主的细胞凋亡和免疫反应酸肌醇 3 激酶（PI3K）。所有的这些功能都是基于 NS1 的蛋白与蛋白及蛋白与 RNA实现的。NS1 有两个和定位序列（NLS1 和 NLS2）及一个核输出序列（NES），某些核仁定位序列(NoLS)，NoLS 与 NLS2 相伴。Arg-38 与 Lys-41 与 OAS/RNase L、Jun酶及 RIG-I 的抑制有关。另外，NS1 具有与多种细胞蛋白结合的位点，这些蛋白包括：合蛋白 I (PABPI)、p85β、 内输蛋白α（importin-α）、核仁素（nucleolin）、NS1- hStaufen、 NS1-I、PKR、PACT、CPSF30、PABPII、Crk/CrkL、具有 PDZ 结构域聚合酶、细胞 mRNA 核输出机制成份 (E1B-AP5, p15, NXF1 及 Rae1)( Hale et al., 2
18B3 C31 和 A2 为对照；B1-B3 为 DK/35,B1 为 100稀释度，B2为 10-1稀释度，B3为10-2稀释度；C1-C3为DK/35-SC1 为 100稀释度，C2 为 10-1稀释度，C3 为 10-2稀释度。图 2.3 VSV-GFP 表达情况Fig. 2.3 The expression of VSV-GFP
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