鸭坦布苏病毒E蛋白抗原性分析
发布时间：2021-02-06 23:17
在我国新发的以蛋鸭产蛋下降为主要特征的鸭坦布苏病毒病,给我国养鸭产业造成了巨大的经济损失。引起该病的病原为鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu Virus, DTMUV）,该病毒属于黄病毒科（Flaviviridae）,黄病毒属（flavivirus）。目前,对鸭坦布苏病毒的致病机制尚不明确,同时也缺乏有效的疫苗和抗病毒措施来预防和控制该病。E蛋白是黄病毒的主要结构蛋白,在病毒吸附、与宿主细胞膜融合、细胞嗜性、病毒毒力以及病毒组装过程中发挥重要的作用。同时,E蛋白含有多种抗原表位,可诱导产生中和抗体,是黄病毒的主要保护性抗原。本研究对鸭坦布苏病毒E蛋白的DomainⅢ抗原性、及其线性抗原表位进行研究,为鸭坦布苏病毒疫苗研制奠定良好基础。利用针对E蛋白的具有中和活性的单克隆抗体,建立了一种荧光微量中和试验。首先将血清与病毒作用后,接种96孔板上长成单层DF-1细胞,24小时后,使用间接免疫荧光法检测病毒在细胞内的增殖情况,从而确定血清的中和效价。建立的荧光微量中和试验方法具有良好的特异性。与鸡胚中和试验方法相比,该方法稳定性高、敏感性强、重复性好、通量高、操作简便和节省时间。该方法比细...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图I鸭坦布苏病毒基因组结构
Fig 1 The Genome structure of the DTMUV能有一个开放阅读框，只编码一个多聚蛋白，而目前已知的黄白在蛋白酶的作用下，剪切加工成衣壳C蛋白、prM蛋白和构蛋白。随后，病毒在内质网膜上组装成未成熟的病毒粒子。中被宿主细胞蛋白酶切，以胞吐的方式释放成熟病毒粒子（
图5 SDS-PAGE分析重组蛋白Fig 5 SDS-PAGE analysis of recombinant pr标准；1:在大肠杆菌中表达的EDIII上清样 standards; 1: The supernatant samples of EDIThe purified recombinant protein.
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭坦布苏病毒病诊断方法概述[J]. 陈桂英. 动物医学进展. 2013(08)
[2]鸭坦布苏病毒致病特性及其流行病学[J]. 林源,刘毅. 湖南畜牧兽医. 2013(03)
[3]Inhibition of Japanese Encephalitis Virus Infection by Flavivirus Recombinant E Protein Domain Ⅲ[J]. Jingjing Fan,Yi Liu,Xuping Xie,Bo Zhang,Zhiming Yuan. Virologica Sinica. 2013(03)
[4]密码子优化的鸭坦布苏病毒E基因在昆虫细胞中的表达[J]. 肖亚莉,刘建龙,李雪松,余磊,滕巧泱,闫丽萍,李国新,李泽君. 中国动物传染病学报. 2013(03)
[5]鸭坦布苏病毒灭活油乳苗的制备及免疫效力测定[J]. 李振华,李小康,郭香玲,张春杰,刘凤军,王臣. 中国预防兽医学报. 2013(05)
[6]猪乙型脑炎病毒E-Ⅲ抗原域蛋白间接ELISA的建立及应用[J]. 郭锐,田永祥,周丹娜,段正赢,杨克礼,闫少侠,郑尤佳,梁望旺,刘泽文. 湖北农业科学. 2012(22)
[7]抗原表位鉴定方法的研究进展[J]. 文雪霞,陈化兰,熊永忠,王秀荣. 中国畜牧兽医. 2012(07)
[8]鸭坦布苏病毒E基因DNA疫苗构建及免疫原性的初步研究[J]. 徐大伟,李国新,李雪松,姬希文,李云章,李泽君. 中国预防兽医学报. 2012(04)
[9]Safe and Objective Assay of Enterovirus 71 Neutralizing Antibodies via Pseudovirus[J]. JIN Jun1, XU Lin1, GUO Shi-jie2, SUN Shi-yang1, ZHANG Shu1, ZHU Chang-lin3, KONG Wei1 and JIANG Chun-lai1 1. National Engineering Laboratory for AIDS Vaccine, College of Life Science, Jilin University, Changchun 130012, P. R. China; 2. Department of Pediatrics, the First Hospital of Jilin University, Changchun 130021, P. R. China; 3. Changchun Baike Biotechnology Co., Changchun 130012, P. R. China. Chemical Research in Chinese Universities. 2012(01)
[10]鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 姬希文,闫丽萍,颜丕熙,李国新,张七斤,李泽君. 中国预防兽医学报. 2011(08)
本文编号：3021243
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图I鸭坦布苏病毒基因组结构
Fig 1 The Genome structure of the DTMUV能有一个开放阅读框，只编码一个多聚蛋白，而目前已知的黄白在蛋白酶的作用下，剪切加工成衣壳C蛋白、prM蛋白和构蛋白。随后，病毒在内质网膜上组装成未成熟的病毒粒子。中被宿主细胞蛋白酶切，以胞吐的方式释放成熟病毒粒子（
图5 SDS-PAGE分析重组蛋白Fig 5 SDS-PAGE analysis of recombinant pr标准；1:在大肠杆菌中表达的EDIII上清样 standards; 1: The supernatant samples of EDIThe purified recombinant protein.
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭坦布苏病毒病诊断方法概述[J]. 陈桂英. 动物医学进展. 2013(08)
[2]鸭坦布苏病毒致病特性及其流行病学[J]. 林源,刘毅. 湖南畜牧兽医. 2013(03)
[3]Inhibition of Japanese Encephalitis Virus Infection by Flavivirus Recombinant E Protein Domain Ⅲ[J]. Jingjing Fan,Yi Liu,Xuping Xie,Bo Zhang,Zhiming Yuan. Virologica Sinica. 2013(03)
[4]密码子优化的鸭坦布苏病毒E基因在昆虫细胞中的表达[J]. 肖亚莉,刘建龙,李雪松,余磊,滕巧泱,闫丽萍,李国新,李泽君. 中国动物传染病学报. 2013(03)
[5]鸭坦布苏病毒灭活油乳苗的制备及免疫效力测定[J]. 李振华,李小康,郭香玲,张春杰,刘凤军,王臣. 中国预防兽医学报. 2013(05)
[6]猪乙型脑炎病毒E-Ⅲ抗原域蛋白间接ELISA的建立及应用[J]. 郭锐,田永祥,周丹娜,段正赢,杨克礼,闫少侠,郑尤佳,梁望旺,刘泽文. 湖北农业科学. 2012(22)
[7]抗原表位鉴定方法的研究进展[J]. 文雪霞,陈化兰,熊永忠,王秀荣. 中国畜牧兽医. 2012(07)
[8]鸭坦布苏病毒E基因DNA疫苗构建及免疫原性的初步研究[J]. 徐大伟,李国新,李雪松,姬希文,李云章,李泽君. 中国预防兽医学报. 2012(04)
[9]Safe and Objective Assay of Enterovirus 71 Neutralizing Antibodies via Pseudovirus[J]. JIN Jun1, XU Lin1, GUO Shi-jie2, SUN Shi-yang1, ZHANG Shu1, ZHU Chang-lin3, KONG Wei1 and JIANG Chun-lai1 1. National Engineering Laboratory for AIDS Vaccine, College of Life Science, Jilin University, Changchun 130012, P. R. China; 2. Department of Pediatrics, the First Hospital of Jilin University, Changchun 130021, P. R. China; 3. Changchun Baike Biotechnology Co., Changchun 130012, P. R. China. Chemical Research in Chinese Universities. 2012(01)
[10]鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 姬希文,闫丽萍,颜丕熙,李国新,张七斤,李泽君. 中国预防兽医学报. 2011(08)
本文编号：3021243
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