胸膜肺炎放线杆菌异源保护抗原肽筛选及ApxIV体外表达

发布时间：2021-02-10 02:49

　　胸膜肺炎放线杆菌是引起猪传染性胸膜肺炎放线杆菌疾病的主要病原菌，该病是世界范围内流行并严重危害养猪业的重要传染病。胸膜肺炎放线杆菌具有多个血清型，其致病力和免疫原性各不相同，主要血清型之间缺乏免疫交叉保护，影响了其疫苗的开发。我们先前的研究通过MALDI-ToF质谱鉴定出了六个共同抗原蛋白，单链DNA结合蛋白（PA-Ssb）、噬菌体休克蛋白A（PA-PspA）、甘油醛-3磷酸脱氢酶（PA-GAPDH）、丙酮酸激酶（PA-Pk）、丝氨酸羟甲基转移酶（PA-Shmt）以及天冬氨酸转氨酶（PA-Ast）。以痤疮丙酸杆菌参考菌株设计引物克隆并测序了以上六个蛋白，通过Genebank以及其他生物信息学数据库对其进行了分析，并上传至Genebank数据库。构建了六个抗原蛋白的原核表达载体pGEX-PA-Ssb、pGEX-PA-Pspa、pGEX-PA-GAPDH、pGEX-PA-Pk、pGEX-PA-Shmt和pGEX-PA-Ast，并表达纯化出了六个抗原蛋白的GST融合蛋白。通过小鼠模型免疫并以胸膜肺炎放线杆菌血清1型和5a型感染，分别得到免疫保护率达到（对血清1型）20%（PA-GAPDH）至... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：175 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
内容提要
中文摘要
Abstract
英文缩写词表
前言
第一篇 文献综述
    第一章 痤疮丙酸杆菌的研究概况
        1.1 痤疮丙酸杆菌的生物学特性
        1.2 痤疮丙酸杆菌的致病性
        1.3 痤疮丙酸杆菌的免疫调节作用
        1.4 痤疮丙酸杆菌免疫调节作用的有效成分
        1.5 痤疮丙酸杆菌免疫调节作用的应用
        1.6 痤疮丙酸杆菌免疫调节研究的新进展
        1.7 痤疮丙酸杆菌应用研究展望
    第2章 猪传染性胸膜肺炎研究概况
        2.1 病原学
        2.2 流行病学
        2.3 临床症状和病理变化
        2.4 诊断
        2.5 防治
        2.6 结语
    第3章 胸膜肺炎放线杆菌及其疫苗研究进展
        3.1 概述
        3.2 全菌灭活疫苗
        3.3 胸膜肺炎放线杆菌的毒力因子以及亚单位疫苗
        3.4 DIVA 技术对胸膜肺炎放线杆菌疫苗研发的影响
        3.5 胸膜肺炎放线杆菌疫苗接种程序与粘膜免疫
        3.6 几种可用于筛选候选疫苗的全基因组关联分析技术
        3.7 讨论与展望
第二篇 研究内容
    第1章 胸膜肺炎放线杆菌与痤疮丙酸杆菌共同抗原免疫保护作用研究
        1.1 材料与方法
        1.2 结果
        1.3 讨论
        1.4 小结
    第2章 胸膜肺炎放线杆菌整合 Nanoluc 荧光素酶报告基因的检测
        2.1 材料与方法
        2.2 结果
        2.3 讨论
        2.4 小结
    第3章 ApxIV 体外表达调控基因筛选
        3.1 材料与方法
        3.2 结果
        3.3 讨论
        3.4 小结
    第4章 ApxIV 的体外表达与调控
        4.1 材料与方法
        4.2 结果
        4.3 讨论
        4.4 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介
攻读博士期间发表的学术论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]痤疮丙酸杆菌对小鼠抗胸膜肺炎放线杆菌血清7型9型的免疫保护[J]. 李林溪,雷连成,高宇,何伯萍,韩文瑜.  河北科技师范学院学报. 2010(04)
[2]痤疮丙酸杆菌对小鼠抗胸膜肺炎放线杆菌感染的研究[J]. 杨鹏,雷连成,谢芳,韩文瑜,王加启.  中国预防兽医学报. 2009(08)
[3]报告基因荧光素酶在科研中的应用[J]. 杜彦艳,单保恩.  中华肿瘤防治杂志. 2009(09)
[4]四川省部分地区猪传染性胸膜肺炎的流行病学调查[J]. 樊祜卿,储岳峰,贺英,高鹏程,赵萍,郭晗,冯小明,逯忠新,伏小平.  中国动物检疫. 2009(05)
[5]短小棒状杆菌CpG-DNA提取方法的研究[J]. 孙彬裕,高尚先.  药物分析杂志. 2009(03)
[6]胸膜肺炎放线杆菌血清型特异的疫苗候选基因的筛选及痤疮丙酸杆菌异源免疫[J]. 雷连成,韩文瑜,孙长江,杨鹏,冯新.  中国生物制品学杂志. 2008(10)
[7]新型免疫佐剂研究进展[J]. 周晨阳,刘海燕,杨发龙.  现代畜牧兽医. 2007(05)
[8]洛阳地区规模化猪场传染性胸膜肺炎的血清学调查[J]. 王天奇,董发明,龙塔,杨自军,董淑丽,王宏魁.  中国兽医杂志. 2006(11)
[9]痤疮丙酸杆菌在痤疮发病中的作用[J]. 朱莲花,金哲虎.  中国美容医学. 2006(04)
[10]痤疮皮损内菌群的分离与研究[J]. 白洁,顾威,王真子,随静,白颖,宁安红.  中国微生态学杂志. 2005(06)



本文编号：3026665