miR-10b和BDNF对山羊卵巢颗粒细胞活性的影响

发布时间：2021-02-14 03:03

　　为研究miR-10b对山羊卵巢颗粒细胞活性的影响,从已建立的多羔（3～5只）和单羔奶山羊发情期卵巢组织差异表达的miRNAs文库中筛选出差异表达显著的miR-10b,并利用生物信息学和实时定量PCR等技术,研究miR-10b在单羔和多羔奶山羊中的相对表达水平及其靶基因表达和卵巢颗粒细胞活性。结果显示:miR-10b在单羔奶山羊卵巢组织中的相对表达量显著高于多羔奶山羊卵巢组织中的相对表达量（P<0.05）;miR-10b通过抑制脑源性神经营养因子（BDNF）基因的表达,实现对卵巢颗粒细胞活性的抑制作用。试验结果阐释了miR-10b作用于奶山羊卵巢颗粒细胞的机理,为后续研究山羊卵巢的卵泡发育提供了依据。 

【文章来源】：家畜生态学报. 2018,39(12)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 质粒与细胞
    1.2 试剂及仪器
    1.3 试验方法
        1.3.1 miR-10b的差异表达与靶基因的预测
        1.3.2 BDNF 3'UTR片段的克隆与BDNF 3'UTR荧光素酶报告基因载体的构建
        1.3.3 细胞培养及转染
        1.3.4 总RNA提取及实时定量PCR
        1.3.5 荧光素酶活性检测
        1.3.5 颗粒细胞活性试验 （MTT）
    1.4 统计分析
2 结果与分析
    2.1 miR-10b的差异表达
    2.2 miRNA靶基因生物信息学预测结果与BD-NF3'UTR的RCR扩增
    2.3 pGL3-BDNF 3'UTR载体酶切鉴定结果
    2.4 荧光素酶活性检测
    2.5 实时定量PCR检测靶基因mRNA表达水平
    2.6 miR-10b对颗粒细胞活性的影响
    2.7 BDNF因子对颗粒细胞活性的影响
    2.8 BDNF因子和miR-10b对颗粒细胞活性的影响
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]BDNF和NGF对牛颗粒细胞体外生长的影响[J]. 易康乐,陈华海,李纯锦,孙艳玲,陈露,石德顺,周虚.  中国兽医学报. 2010(11)



本文编号：3033008