猪轮状病毒G4P[6]株的分离鉴定及新型检测方法的建立与应用
发布时间：2021-02-15 04:56
猪轮状病毒（Porcine Rotavirus,PoRV）是引起哺乳仔猪和断奶仔猪腹泻和胃肠炎的常见病原,导致仔猪出现腹泻、呕吐、消瘦和脱水等临床症状,甚至引起仔猪死亡。PoRV在全球范围内广泛流行,给猪场造成巨大的经济损失。PoRV的重组基因可以在猪群和人群中检出,已成为一个潜在的公共卫生问题需要进行进一步的调查研究。为了解我国PoRV的流行情况,对2016年采集的2240份血清样品进行PoRV、猪传染性胃肠炎（Transmissible gastroenteritis virus,TGEV）、猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）的血清IgG抗体检测;对191份疑似病毒性腹泻发病猪场的猪肠道和粪便样品进行了上述三种病毒的核酸检测。血清学检测结果显示,PoRV、TGEV和PEDV个体阳性率分别为90.85%、22.99%和63.10%,场阳性率分别为100%、82.14%和89.29%。猪场中存在三种病毒的双重和三重混合感染。病原学检测结果显示,PoRV、TGEV和PEDV个体阳性率分别为13.09%、0.52%和59.16%,场阳性...
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：106 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１猪场ＰｏＲＶ抗体阳性率??Ｆｉｇ?２－１?Ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ＰｏＲＶ?ａｎｔｉｂｏｄｙ?ｉｎ?ｓｗｉｎｅ?ｆａｒｍｓ??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]猪圆环病毒1型微滴数字PCR定量检测方法的建立[J]. 原霖,訾占超,亢文华,李晓霞,汪葆玥,王静,韩焘,陈亚娜,倪建强,翟新验. 中国兽医学报. 2017(11)
[2]伪狂犬病病毒微滴数字PCR定量检测方法的建立[J]. 陈亚娜,王静,訾占超,亢文华,汪葆玥,倪建强,原霖. 畜牧兽医学报. 2017(09)
[3]2015～2016年我国东北地区猪病毒性腹泻流行病学调查[J]. 朱子健,闫丽辉,鞠妍,唐志芬,杨金雨,朱庆虎. 中国预防兽医学报. 2017(05)
[4]北京规模化猪场病毒性腹泻隐性感染情况调查[J]. 刘邓,贾泽颖,张丹,全炎铭,郭又春,刘莉如,刘修全,陈华林. 中国猪业. 2017(04)
[5]华东地区猪病毒性腹泻感染状况调查[J]. 张佩华,倪建平,缪德年,何锡忠,张春玲,蒋凤英,李春华. 上海畜牧兽医通讯. 2017(02)
[6]广东部分地区猪流行性腹泻病毒流行病学调查[J]. 白小磊,崔进,崔甜甜,陈耀,石庆伟,冯嘉萍,王林川,张桂红. 中国兽医学报. 2016(11)
[7]重庆市2014—2015年部分腹泻发病猪场猪轮状病毒血清流行病学调查[J]. 罗炼钊,龙安格,田成林,陈健勇,杜永新,冯培峰,张云贵,马鲜平,唐明霞,易华山. 中国动物检疫. 2016(10)
[8]2014年部分地区猪流行性腹泻病毒流行病学调查[J]. 常铁城,陈建飞,冯力,倪宏波. 中国预防兽医学报. 2016(04)
[9]检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的cDNA芯片的构建[J]. 滑翔,胡中凯,黄小波,文心田,曹三杰,文翼平,伍锐,邓静,赵松,尹人杰,常晓霞,欧阳达,张仙. 畜牧兽医学报. 2015(12)
[10]2012-2013年广东猪流行性腹泻流行情况调查报告[J]. 田云,焦颖,王福广,查云峰,孙彦伟. 广东畜牧兽医科技. 2015(05)
硕士论文
[1]基于微滴式数字PCR技术的甲型流感病毒绝对定量研究[D]. 冯兆民.中国疾病预防控制中心 2017
[2]猪轮状病毒GD-01-2015的全基因序列分析及双夹心ELISA方法的建立[D]. 杨娟.扬州大学 2017
[3]猪圆环病毒2型微滴式数字PCR检测方法的建立与初步应用[D]. 赵珊.四川农业大学 2016
[4]猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒多重荧光RT-PCR检测方法的建立[D]. 许梦怡.扬州大学 2016
[5]猪轮状病毒的分离鉴定及其环介导等温扩增反应检测方法的建立[D]. 张贺伟.中国农业科学院 2015
[6]抗猪轮状病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的初步建立[D]. 孟柳.东北农业大学 2014
[7]猪轮状病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用[D]. 吴奇英.华中农业大学 2013
[8]猪病毒性腹泻多重RT-PCR诊断方法的建立和应用及猪轮状病毒的分离[D]. 张坤.华中农业大学 2010
本文编号：3034469
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：106 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
![猪轮状病毒G4P[6]株的分离鉴定及新型检测方法的建立与应用](http://image.cnki.net/getimage.ashx?id=1018069330.nh0003)
图２－１猪场ＰｏＲＶ抗体阳性率??Ｆｉｇ?２－１?Ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ＰｏＲＶ?ａｎｔｉｂｏｄｙ?ｉｎ?ｓｗｉｎｅ?ｆａｒｍｓ??
３．４．１细胞病变结果??将病毒在ＭＡ１０４细胞盲传至第５代，接毒后４８ｈ细胞出现明显病变。正常ＭＡ１０４细胞生??长良好，形态清晰（图３－１Ａ）。接种病毒后的ＭＡ１０４细胞固缩，颗粒增多，最后细胞崩解脱落??（图?３－１Ｂ）。??■■??Ａ?Ｂ??图３－１细胞病变结果（２０〇ｘ）??Ｆｉｇ?３－１?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ?ｅｆｆｅｃｔｓ?（２０〇ｘ）??Ａ：正常ＭＡ１０４细胞：Ｂ：轮状病毒感染４８ｈ后的ＭＡ１０４细胞??Ａ：?Ｎｏｒｍａｌ?ＭＡＩ０４?ｃｅｌｌｓ；?Ｂ：?ＭＡＩ０４?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ＲｏＲＶ?ａｆｔｅｒ?４８?ｈ?ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ??３．４．２股体金检测结果??将病毒液加至１＾３八８、卩已〇八８、丁０￡八经胶体金的样品孔内，５｜１１丨１１后１＾３厶§、卩￡〇八§、??ＴＧＥＡｇ胶体金上“Ｃ”均出现色带，表明试验结果成立。在Ｒｏｔａ?Ａｇ胶体金上‘‘Ｔ’出现色带，表明??病毒液中含有轮状病毒抗原，见图３－２。??之?４?．．．．毳??图３－２胶体金检测结果??Ｆｉｇ?３－２?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｃｏｌｌｏｉｄ?ｇｏｌｄ?ｔｅｓｔ??３３??
３．４．１细胞病变结果??将病毒在ＭＡ１０４细胞盲传至第５代，接毒后４８ｈ细胞出现明显病变。正常ＭＡ１０４细胞生??长良好，形态清晰（图３－１Ａ）。接种病毒后的ＭＡ１０４细胞固缩，颗粒增多，最后细胞崩解脱落??（图?３－１Ｂ）。??■■??Ａ?Ｂ??图３－１细胞病变结果（２０〇ｘ）??Ｆｉｇ?３－１?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ?ｅｆｆｅｃｔｓ?（２０〇ｘ）??Ａ：正常ＭＡ１０４细胞：Ｂ：轮状病毒感染４８ｈ后的ＭＡ１０４细胞??Ａ：?Ｎｏｒｍａｌ?ＭＡＩ０４?ｃｅｌｌｓ；?Ｂ：?ＭＡＩ０４?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ＲｏＲＶ?ａｆｔｅｒ?４８?ｈ?ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ??３．４．２股体金检测结果??将病毒液加至１＾３八８、卩已〇八８、丁０￡八经胶体金的样品孔内，５｜１１丨１１后１＾３厶§、卩￡〇八§、??ＴＧＥＡｇ胶体金上“Ｃ”均出现色带，表明试验结果成立。在Ｒｏｔａ?Ａｇ胶体金上‘‘Ｔ’出现色带，表明??病毒液中含有轮状病毒抗原，见图３－２。??之?４?．．．．毳??图３－２胶体金检测结果??Ｆｉｇ?３－２?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｃｏｌｌｏｉｄ?ｇｏｌｄ?ｔｅｓｔ??３３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪圆环病毒1型微滴数字PCR定量检测方法的建立[J]. 原霖,訾占超,亢文华,李晓霞,汪葆玥,王静,韩焘,陈亚娜,倪建强,翟新验. 中国兽医学报. 2017(11)
[2]伪狂犬病病毒微滴数字PCR定量检测方法的建立[J]. 陈亚娜,王静,訾占超,亢文华,汪葆玥,倪建强,原霖. 畜牧兽医学报. 2017(09)
[3]2015～2016年我国东北地区猪病毒性腹泻流行病学调查[J]. 朱子健,闫丽辉,鞠妍,唐志芬,杨金雨,朱庆虎. 中国预防兽医学报. 2017(05)
[4]北京规模化猪场病毒性腹泻隐性感染情况调查[J]. 刘邓,贾泽颖,张丹,全炎铭,郭又春,刘莉如,刘修全,陈华林. 中国猪业. 2017(04)
[5]华东地区猪病毒性腹泻感染状况调查[J]. 张佩华,倪建平,缪德年,何锡忠,张春玲,蒋凤英,李春华. 上海畜牧兽医通讯. 2017(02)
[6]广东部分地区猪流行性腹泻病毒流行病学调查[J]. 白小磊,崔进,崔甜甜,陈耀,石庆伟,冯嘉萍,王林川,张桂红. 中国兽医学报. 2016(11)
[7]重庆市2014—2015年部分腹泻发病猪场猪轮状病毒血清流行病学调查[J]. 罗炼钊,龙安格,田成林,陈健勇,杜永新,冯培峰,张云贵,马鲜平,唐明霞,易华山. 中国动物检疫. 2016(10)
[8]2014年部分地区猪流行性腹泻病毒流行病学调查[J]. 常铁城,陈建飞,冯力,倪宏波. 中国预防兽医学报. 2016(04)
[9]检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的cDNA芯片的构建[J]. 滑翔,胡中凯,黄小波,文心田,曹三杰,文翼平,伍锐,邓静,赵松,尹人杰,常晓霞,欧阳达,张仙. 畜牧兽医学报. 2015(12)
[10]2012-2013年广东猪流行性腹泻流行情况调查报告[J]. 田云,焦颖,王福广,查云峰,孙彦伟. 广东畜牧兽医科技. 2015(05)
硕士论文
[1]基于微滴式数字PCR技术的甲型流感病毒绝对定量研究[D]. 冯兆民.中国疾病预防控制中心 2017
[2]猪轮状病毒GD-01-2015的全基因序列分析及双夹心ELISA方法的建立[D]. 杨娟.扬州大学 2017
[3]猪圆环病毒2型微滴式数字PCR检测方法的建立与初步应用[D]. 赵珊.四川农业大学 2016
[4]猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒多重荧光RT-PCR检测方法的建立[D]. 许梦怡.扬州大学 2016
[5]猪轮状病毒的分离鉴定及其环介导等温扩增反应检测方法的建立[D]. 张贺伟.中国农业科学院 2015
[6]抗猪轮状病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的初步建立[D]. 孟柳.东北农业大学 2014
[7]猪轮状病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用[D]. 吴奇英.华中农业大学 2013
[8]猪病毒性腹泻多重RT-PCR诊断方法的建立和应用及猪轮状病毒的分离[D]. 张坤.华中农业大学 2010
本文编号：3034469
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