一株含新裂解酶的大肠杆菌噬菌体基因组测序及其裂解酶的活性检测
发布时间：2021-02-15 21:26
近年来日渐严重细菌抗生素耐药问题，已对人类健康和畜牧业发展造成了极大威胁。面对耐药菌不断的增多和耐药基因的广泛传播，噬菌体及其裂解酶再次成为人们的研究热点。噬菌体及裂解酶相关分子，在抗菌治疗方面具有抗生素无法比拟的优越性。为了提高药用噬菌体及裂解酶的安全性，不仅要分析它们的生物学特征，还要从基因水平分析它们的进化及是否含有有害基因，对于革兰氏阴性菌噬菌体的裂解酶更要研究从细胞外直接裂解细菌的方法，提高使用的方便性。本研究从自然界的污水分离到一株噬菌体vBEcoM-ep3，并研究各项生物学特性：它的最佳MOI在0.10.001之间；具有良好的热稳定性，50℃以下，2小时内可以基本保持其原活性；潜伏期为20min，裂解期约40min，能裂解大肠杆菌O78及8株临床分离的鸡大肠杆菌；透射电镜观察结果显示vBEcoM-ep3形态学上属于肌尾噬菌体科，由此判断它是一株裂解性较强、裂解谱广的噬菌体。因此对其进行全基因组测序，软件预测、注释分析各个开放阅读框的功能，从基因组水平研究噬菌体的进化关系，由42351个核苷酸组成，GC含量为...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
噬菌斑vB_EcoM-ep3的形态
图 1.2 噬菌体最佳感染复数（MOI）的测定（x 轴为不同 MOI，y 轴为噬菌体滴度）ig1.2 Determination of multiplicity of infection of bacteriopha噬菌体的温度敏感性噬菌体对温度的耐受性也有区别。vB_EcoM-ep3 的温度敏随温度增高、处理时间延长，存活的噬菌体数量逐渐降低2 小时内 vB_EcoM-ep3 可以基本保持其原活性，具有良于 50℃时，滴度开始迅速下降：60℃作用 20min 滴度下降 40min 后仅有少量噬菌体存活；70℃、80℃作用 20min 噬
on of multiplicity of infection of bacteriophage1.2.2.2 噬菌体的温度敏感性不同的噬菌体对温度的耐受性也有区别。vB_EcoM-ep3 的温度敏感性如图1.3 所示，随温度增高、处理时间延长，存活的噬菌体数量逐渐降低。温度在50℃以下，2 小时内 vB_EcoM-ep3 可以基本保持其原活性，具有良好的热稳定性；温度高于 50℃时，滴度开始迅速下降：60℃作用 20min 滴度下降达四个数量级，作用 40min 后仅有少量噬菌体存活；70℃、80℃作用 20min 噬菌体基本全部失活。图 1.3 噬菌体的温度敏感性（x 轴为不同温度下的作用时间，y 轴为噬菌体滴度）Fig1.3The temperature sensitivity of phage1.2.2.3 氯仿及乙醚敏感性结果如表 1.2 所示，vB_EcoM-ep3 与氯仿、乙醚作用后效价变化均不明显
【参考文献】：
期刊论文
[1]1株宽宿主谱大肠杆菌噬菌体的生物学特性观察[J]. 徐焰,熊鸿燕,宋建勇,王思雄. 第三军医大学学报. 2003(23)
[2]大肠杆菌VT噬菌体受体（vpr）基因突变株的鉴定[J]. 严亚贤,孙建和,陆承平,Heather E Allison. 微生物学报. 2002(06)
[3]大肠杆菌VT噬菌体受体基因重组质粒的构建[J]. 严亚贤,陆承平. 上海交通大学学报(农业科学版). 2002(02)
[4]O139霍乱弧菌噬菌体的分离[J]. 蒋小皖,朱凤才,祖荣强. 江苏卫生保健. 2002(03)
博士论文
[1]分枝杆菌噬菌体的生物学特性及基因组学研究[D]. 刘平.重庆医科大学 2012
硕士论文
[1]大肠杆菌噬菌体的分离鉴定与初步应用[D]. 张培东.青岛农业大学 2007
本文编号：3035564
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
噬菌斑vB_EcoM-ep3的形态
图 1.2 噬菌体最佳感染复数（MOI）的测定（x 轴为不同 MOI，y 轴为噬菌体滴度）ig1.2 Determination of multiplicity of infection of bacteriopha噬菌体的温度敏感性噬菌体对温度的耐受性也有区别。vB_EcoM-ep3 的温度敏随温度增高、处理时间延长，存活的噬菌体数量逐渐降低2 小时内 vB_EcoM-ep3 可以基本保持其原活性，具有良于 50℃时，滴度开始迅速下降：60℃作用 20min 滴度下降 40min 后仅有少量噬菌体存活；70℃、80℃作用 20min 噬
on of multiplicity of infection of bacteriophage1.2.2.2 噬菌体的温度敏感性不同的噬菌体对温度的耐受性也有区别。vB_EcoM-ep3 的温度敏感性如图1.3 所示，随温度增高、处理时间延长，存活的噬菌体数量逐渐降低。温度在50℃以下，2 小时内 vB_EcoM-ep3 可以基本保持其原活性，具有良好的热稳定性；温度高于 50℃时，滴度开始迅速下降：60℃作用 20min 滴度下降达四个数量级，作用 40min 后仅有少量噬菌体存活；70℃、80℃作用 20min 噬菌体基本全部失活。图 1.3 噬菌体的温度敏感性（x 轴为不同温度下的作用时间，y 轴为噬菌体滴度）Fig1.3The temperature sensitivity of phage1.2.2.3 氯仿及乙醚敏感性结果如表 1.2 所示，vB_EcoM-ep3 与氯仿、乙醚作用后效价变化均不明显
【参考文献】：
期刊论文
[1]1株宽宿主谱大肠杆菌噬菌体的生物学特性观察[J]. 徐焰,熊鸿燕,宋建勇,王思雄. 第三军医大学学报. 2003(23)
[2]大肠杆菌VT噬菌体受体（vpr）基因突变株的鉴定[J]. 严亚贤,孙建和,陆承平,Heather E Allison. 微生物学报. 2002(06)
[3]大肠杆菌VT噬菌体受体基因重组质粒的构建[J]. 严亚贤,陆承平. 上海交通大学学报(农业科学版). 2002(02)
[4]O139霍乱弧菌噬菌体的分离[J]. 蒋小皖,朱凤才,祖荣强. 江苏卫生保健. 2002(03)
博士论文
[1]分枝杆菌噬菌体的生物学特性及基因组学研究[D]. 刘平.重庆医科大学 2012
硕士论文
[1]大肠杆菌噬菌体的分离鉴定与初步应用[D]. 张培东.青岛农业大学 2007
本文编号：3035564
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3035564.html
