马麝病毒性出血症RT-PCR诊断方法的建立及初步应用
发布时间:2021-02-16 03:16
马麝病毒性出血症(Moschus chrysogaster (sifanicus) viral hemorrhagic disease, McVHD)为马麝的一种病毒性传染病,发病急、病死率高,严重威胁我国马麝种群的健康和安全。该病病原马麝出血症病毒(Moschus chrysogaster (sifanicus) hemorrhagic disease virus, McHDV)与杯状病毒科(Caliciviridae)兔病毒属(Lagovirus)的兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus, RHDV)高度同源。为建立该病快速简便的诊断方法,本研究对病原基因组序列及兔出血症病毒基因组序列进行比对分析,设计并合成引物McVHDF/R,在反应条件优化及特异性和敏感性分析的基础上,建立马麝病毒性出血症的反转录PCR (reverse transcription PCR, RT-PCR)诊断方法。结果表明,所建立的RT-PCR方法可在目标病毒基因组上扩增出1条448 bp的目的片段,而与沙门氏菌(Salmonella)、巴氏杆菌(Pasteurella...
【文章来源】:农业生物技术学报. 2020,28(05)北大核心
【文章页数】:6 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 试剂与样品
1.2 毒株与菌种
1.3 引物设计
1.4 RNA提取
1.5 RT-PCR扩增及最佳Tm值确定
1.6 PCR最佳引物浓度的确定
1.7 特异性试验
1.8 敏感性试验
1.9 重复性试验
1.1 0 临床病料的RT-PCR检测
2 结果与分析
2.1 PCR反应条件的确定
2.2 PCR最佳引物浓度的确定
2.3 特异性试验
2.4 敏感性试验
2.5 重复性试验
2.6 临床应用试验
3 讨论
4 结论
【参考文献】:
期刊论文
[1]一种新的动物传染病——马麝病毒性出血症[J]. 包世俊,邢小勇,丁小琴,高翔,安凯,伏小平,薛慧文. 中国农业科学. 2018(05)
[2]兔瘟常用检测方法[J]. 靳巍,刘峰,任锐,孙营,邵洪泽,丁世杰. 吉林畜牧兽医. 2017(08)
[3]兔病毒血症RT-PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 朱裕华,胡安康,陈全刚,韩旭峰,陈仁金. 上海畜牧兽医通讯. 2016(06)
[4]兔出血症病毒与兔出血症病毒2型复合RT-PCR检测方法的初步研究[J]. 杨泽晓,赵希仑,李岩,姚学萍,王印,刘亚东,蒙正群,耿毅,白瑜. 中国兽医科学. 2016(06)
[5]青海马麝肠道寄生虫感染情况调查[J]. 吕向辉,乔继英,吴晓民,王静,胡罕,裴俊峰,张洪峰,封托,王启军,孔飞,李涤非. 中国兽医杂志. 2010(12)
[6]马麝出血性肺炎的病理学观察[J]. 路浩,胡俊杰,黄有德,刘宗平,赵宝玉. 中国兽医杂志. 2010(06)
[7]马麝呼吸系统疾病病原学研究[J]. 路浩,黄有德,刘宗平. 中国兽医学报. 2008(01)
[8]兔出血症病毒RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 王芳,李超美,杨龙圣,徐为中,张则斌,侯玉峰,陈国强,何孔旺. 农业生物技术学报. 2007(03)
[9]野捕和圈养繁殖雄性马麝行为格局的比较[J]. 孟秀祥,冯金朝,周宜君,杨奇森,冯祚建,夏霖,孟智斌,华星. 应用生态学报. 2006(11)
[10]中国的麝资源及其保护与利用现状分析[J]. 刘文华,佟建明. 中国农业科技导报. 2005(04)
本文编号:3036052
【文章来源】:农业生物技术学报. 2020,28(05)北大核心
【文章页数】:6 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 试剂与样品
1.2 毒株与菌种
1.3 引物设计
1.4 RNA提取
1.5 RT-PCR扩增及最佳Tm值确定
1.6 PCR最佳引物浓度的确定
1.7 特异性试验
1.8 敏感性试验
1.9 重复性试验
1.1 0 临床病料的RT-PCR检测
2 结果与分析
2.1 PCR反应条件的确定
2.2 PCR最佳引物浓度的确定
2.3 特异性试验
2.4 敏感性试验
2.5 重复性试验
2.6 临床应用试验
3 讨论
4 结论
【参考文献】:
期刊论文
[1]一种新的动物传染病——马麝病毒性出血症[J]. 包世俊,邢小勇,丁小琴,高翔,安凯,伏小平,薛慧文. 中国农业科学. 2018(05)
[2]兔瘟常用检测方法[J]. 靳巍,刘峰,任锐,孙营,邵洪泽,丁世杰. 吉林畜牧兽医. 2017(08)
[3]兔病毒血症RT-PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 朱裕华,胡安康,陈全刚,韩旭峰,陈仁金. 上海畜牧兽医通讯. 2016(06)
[4]兔出血症病毒与兔出血症病毒2型复合RT-PCR检测方法的初步研究[J]. 杨泽晓,赵希仑,李岩,姚学萍,王印,刘亚东,蒙正群,耿毅,白瑜. 中国兽医科学. 2016(06)
[5]青海马麝肠道寄生虫感染情况调查[J]. 吕向辉,乔继英,吴晓民,王静,胡罕,裴俊峰,张洪峰,封托,王启军,孔飞,李涤非. 中国兽医杂志. 2010(12)
[6]马麝出血性肺炎的病理学观察[J]. 路浩,胡俊杰,黄有德,刘宗平,赵宝玉. 中国兽医杂志. 2010(06)
[7]马麝呼吸系统疾病病原学研究[J]. 路浩,黄有德,刘宗平. 中国兽医学报. 2008(01)
[8]兔出血症病毒RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 王芳,李超美,杨龙圣,徐为中,张则斌,侯玉峰,陈国强,何孔旺. 农业生物技术学报. 2007(03)
[9]野捕和圈养繁殖雄性马麝行为格局的比较[J]. 孟秀祥,冯金朝,周宜君,杨奇森,冯祚建,夏霖,孟智斌,华星. 应用生态学报. 2006(11)
[10]中国的麝资源及其保护与利用现状分析[J]. 刘文华,佟建明. 中国农业科技导报. 2005(04)
本文编号:3036052
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