鸡肠炎沙门氏菌感染早期免疫指标变化及全基因组甲基化研究

发布时间：2021-02-18 04:37

　　肠炎沙门氏菌病是一种人畜共患病,不仅给家禽养殖带来了重大经济损失,而且引发食物中毒,危害公共卫生安全。肠炎沙门氏菌是一种垂直性传播的疾病,能通过亲代传给子代,预防困难。目前,家禽肠炎沙门氏菌病主要通过疫苗和抗生素进行防治,但效果颇受争议。通过抗病育种手段提高家禽自身抗性无疑成为一种切实可行的方法。但疾病抗病性是在长期的进化历程中经过自然选择形成的,属于低中等遗传力水平的数量性状,受到多基因的控制。目前,鸡肠炎沙门氏菌抗性研究主要集中在TLR4/MyD88/NF-κB等少数功能基因以及相关的信号与调控通路中。在表观遗传水平研究较少,本课题在人工感染肠炎沙门氏菌感染鸡群中,检测早期机体在体重、体温以及免疫性能相关指标的变化,并检测相关基因mRNA表达水平,同时利用MeDIP-seq测序检测全基因组甲基化水平,旨在探究肠炎沙门氏菌感染机制,为抗病育种提供理论依据。试验一：以12日龄白来航鸡为研究对象,人工感染肠炎沙门氏菌。感染后,在第12h、24h、72h和144h四个时间点分别采样,检测体温、体重及免疫器官指数等表型指标的变化,并用酶联免疫法检测了血清介质IFN-α、IL6、TNF-α和I... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

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目录
常用词语縮写
第一章 文献综述
    1 肠炎沙门氏菌
    2 与肠炎沙门氏菌感染相关的受体分子
    3 TLRs基因结构
    4 TLR 4信号传递过程及鸡TLR 4基因机构
    5 TLR 2信号传递过程及鸡TLR 2的基因机构
    6 TLR 21信号传递过程及鸡的TLR 21基因机构
    7 表观遗传学和DNA甲基化
    8 DNA甲基化与疾病
        8.1 DNA甲基化和免疫疾病
        8.2 DNA甲基化和癌症
            8.2.1 DNA高甲基化和癌症
            8.2.2 DNA低甲基化和癌症
    9 DNA甲基化和炎症-癌症
    10 DNA甲基化和禽类疾病
    11 DNA甲基化的研究方法
    12 本研究的目的和意义
第二章 鸡肠炎沙门氏菌感染后免疫指标的变化
    1 材料和方法
        1.1 试验动物及菌株
        1.2 肠炎沙门氏菌的制备
        1.3 攻毒
        1.4 样品的采集及检测
        1.5 DNA提取
        1.6 载菌量的检测
        1.7 免疫器官指数
        1.8 血清学的检测
        1.9 RNA的提取及反转录
        1.10 荧光定量PCR
    2 主要仪器及试剂
        2.1 主要仪器
        2.2 主要材料
    3 结果与分析
        3.1 体温变化
        3.2 体增重变化
        3.3 载菌量
        3.4 免疫器官指数
        3.5 血清介质
        3.6 盲肠组织TLR家族基因表达
    4 讨论
        4.1 生长性能及组织载菌量
        4.2 免疫器官指数
        4.3 血清介质
        4.4 盲肠TLRs受体基因表达及其下游基因表达
        4.5 盲肠甲基转移酶表达变化
第三章 肠炎沙门氏菌感染后全基因甲组基化变化
    1 材料和方法
        1.1 实验动物
        1.2 DNA提取
        1.3 整体甲基化
        1.4 全基因组甲基化测序DNA样品的前期处理
        1.5 血液载菌量比较
    2 信息分析流程
    3 结果
        3.1 基因组整体甲基化比较
        3.2 攻毒24 h不同临床症状鸡血液载菌量比较
        3.3 全基因组测序结果与分析
    4 讨论
第四章 结论
参考文献
致谢
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【参考文献】：
期刊论文
[1]DNA甲基化检测技术与应用前景[J]. 张海燕,赵洪斌,田亚平,马庆伟.  标记免疫分析与临床. 2013(05)
[2]铁稳衡调控与肠道沙门氏菌感染的关系[J]. 白世平,张克英,丁雪梅,罗玉衡,白洁.  动物营养学报. 2013(03)
[3]子宫内膜癌与细菌感染及炎症介质IL-6、IL-11的关系[J]. 张静,王建六.  中国妇产科临床杂志. 2012(04)
[4]脱氧核糖核酸甲基化分析方法在肿瘤诊断和治疗中的应用[J]. 刘姝娜,屠蕴秋,李文,吴萍,张卉,蔡称心.  分析化学. 2011(09)
[5]IFN-α治疗白塞氏病葡萄膜炎的新进展[J]. 高玮,蔡莉,胡丹.  国际眼科杂志. 2011(06)
[6]固始鸡免疫器官指数的发育规律研究[J]. 李奎,褚雪吟,康相涛,孙桂荣,靳向阳.  动物医学进展. 2009(11)
[7]复合寡糖对肉鸡生产性能和免疫器官指数的影响[J]. 郭芳,孙亚楠,周岩民,王恬.  家畜生态学报. 2009(04)
[8]自发性细菌性腹膜炎患者腹水LPS、IL-6、PCT测定的临床意义[J]. 陈士华,周海鸥,花扣珍,蒋锦琴.  浙江医学教育. 2009(01)
[9]类风湿性关节炎患者外周血单个核细胞IL-10基因启动子甲基化状态研究[J]. 付丽红,丛斌,甄艳凤,李淑瑾,马春玲,倪志宇,张国忠,左敏,姚玉霞.  遗传. 2007(11)
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博士论文
[1]鸡TLRs基因的表达调控与抗沙门氏菌的机制研究[D]. 苟钟勇.中国农业科学院 2012
[2]鸭CD8α基因的克隆与表达调控初步分析[D]. 徐琪.扬州大学 2012
[3]受Akt信号通路调节的miR-365在胃癌中的功能和机制[D]. 郭水龙.中国人民解放军军事医学科学院 2011

硕士论文
[1]鸡Toll受体的初步研究[D]. 张娣.南京农业大学 2011
[2]鸡MHC B-F区基因SNPs分子标记与免疫性状关系的研究[D]. 吴春梅.扬州大学 2007



本文编号：3039042