ANXA8基因调控猪子宫内膜细胞增殖作用的机理研究
发布时间：2021-02-18 10:51
胚胎附植期是猪早期妊娠胚胎丢失最敏感时期之一,受很多因子调控,但目前对猪胚胎附植的相关因子研究较少。在本实验室先前的转录组和蛋白的测序数据分析发现ANXA8基因在猪的胚胎附植期差异表达。ANXA8基因是膜联蛋白家族的成员之一,编码抗凝血蛋白参与凝血级联并作为一种间接性的凝血酶特异性复合物。然而,目前在猪的胚胎附植以及猪的子宫内膜细胞中ANXA8基因的功能均未见报道。为了了解ANXA8基因在猪的子宫内膜中以及可能对猪胚胎附植产生的作用,本研究先检测了猪妊娠早期的子宫内膜组织中ANXA8基因的相对表达;然后将构建的真核超表达载体pcDNA3.1（+）-ANXA8和ANXA8基因的干涉片段转染到猪子宫内膜细胞中,通过免疫荧光、实时荧光定量PCR、流式细胞术和western blot等技术研究ANXA8基因在猪子宫内膜细胞中的调控作用;通过小鼠子宫角注射方法确定ANXA8基因对胚胎附植的影响。主要研究结果:1.实时荧光定量PCR技术检测猪妊娠9-15 d和18 d的子宫内膜组织中ANXA8基因的表达情况,发现该基因在妊娠12 d的相对表达量最高。通过免疫荧光方法确定了ANXA8蛋白在猪子宫内膜...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
胚胎附植过程中的关键因子(Zhangetal2013）
ANXA8 基因调控猪子宫内膜细胞增殖作用的机理研究在人的 Hela 细胞中 ANXA8 基因与内胚层的形成有关，并且维持 EGF 诱导上ERK1/2 的激活 (Goebeler et al 2008）；ANXA8 基因可以经由 EGF-FOXO4 信号通参与胆管癌细胞的扩散和肿瘤的转移 (Lee et al 2009）。ANXA8 基因对 CD63 细来说是关键因子，因为可以通过 CD63 细胞的表面来调控白细胞的聚集 (Poeter et2014）。然而，在猪中 ANXA8 基因对子宫内膜细胞的生物学功能尚不清。此外，实验室先前的测序数据表明在猪的胚胎附植期中 ANXA8 基因和蛋白在子宫内膜织中差异表达（图 1-2，1-3）。进而推测 ANXA8 基因可能对猪的子宫内膜的功能生影响，进而对猪的胚胎附植产生影响。
1-3ANXA8 蛋白在大白猪妊娠七个时期（10 d、11 d、12 d、13 d、14 d、15 d、18 d）相妊娠第 9 d 的表达比值ig. 1-3 The relative expression ratio of ANXA8 protein in pregnancy days (10 d, 11 d, 12 d, 1314 d, 15 d, 18 d) to the day 9 of pregnancy in Largewhite pigs1.5 研究目的与意义胚胎附植过程是猪生产的重要时期之一，其过程中的分子调控机制构成了一常复杂的调控网络。在胚胎附植过程中分子机制的调控直接或间接的影响其胚植的成败，对养猪业的经济效益有重要的影响。目前对人和小鼠中影响胚胎附相关因子的研究较多，但对于猪胚胎附植过程中的分子机制尤其是标志因子的相对较少，故研究胚胎附植过程中可能起作用的因子对深入了解猪胚胎附植以续生殖生产至关重要。高通量mRNA转录组测序和蛋白组测序的对比研究对分析早期不同妊娠时期
【参考文献】：
期刊论文
[1]Wnt信号通路在胚胎着床中的作用[J]. 唐业东,张正红,唐宗浩,王正朝. 中国医学科学院学报. 2018(01)
[2]小鼠胚胎附植研究现状[J]. 陶俐,苗凯,安磊,吴中红,田见晖. 黑龙江动物繁殖. 2013(03)
博士论文
[1]瘦素在猪胚胎附植中的功能及其信号通路的研究[D]. 王红芳.中国农业大学 2014
[2]食管鳞状细胞癌中microRNA-21与ERK1/2通路调控机制的研究[D]. 刘凤霞.新疆医科大学 2013
本文编号：3039455
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
胚胎附植过程中的关键因子(Zhangetal2013）
ANXA8 基因调控猪子宫内膜细胞增殖作用的机理研究在人的 Hela 细胞中 ANXA8 基因与内胚层的形成有关，并且维持 EGF 诱导上ERK1/2 的激活 (Goebeler et al 2008）；ANXA8 基因可以经由 EGF-FOXO4 信号通参与胆管癌细胞的扩散和肿瘤的转移 (Lee et al 2009）。ANXA8 基因对 CD63 细来说是关键因子，因为可以通过 CD63 细胞的表面来调控白细胞的聚集 (Poeter et2014）。然而，在猪中 ANXA8 基因对子宫内膜细胞的生物学功能尚不清。此外，实验室先前的测序数据表明在猪的胚胎附植期中 ANXA8 基因和蛋白在子宫内膜织中差异表达（图 1-2，1-3）。进而推测 ANXA8 基因可能对猪的子宫内膜的功能生影响，进而对猪的胚胎附植产生影响。
1-3ANXA8 蛋白在大白猪妊娠七个时期（10 d、11 d、12 d、13 d、14 d、15 d、18 d）相妊娠第 9 d 的表达比值ig. 1-3 The relative expression ratio of ANXA8 protein in pregnancy days (10 d, 11 d, 12 d, 1314 d, 15 d, 18 d) to the day 9 of pregnancy in Largewhite pigs1.5 研究目的与意义胚胎附植过程是猪生产的重要时期之一，其过程中的分子调控机制构成了一常复杂的调控网络。在胚胎附植过程中分子机制的调控直接或间接的影响其胚植的成败，对养猪业的经济效益有重要的影响。目前对人和小鼠中影响胚胎附相关因子的研究较多，但对于猪胚胎附植过程中的分子机制尤其是标志因子的相对较少，故研究胚胎附植过程中可能起作用的因子对深入了解猪胚胎附植以续生殖生产至关重要。高通量mRNA转录组测序和蛋白组测序的对比研究对分析早期不同妊娠时期
【参考文献】：
期刊论文
[1]Wnt信号通路在胚胎着床中的作用[J]. 唐业东,张正红,唐宗浩,王正朝. 中国医学科学院学报. 2018(01)
[2]小鼠胚胎附植研究现状[J]. 陶俐,苗凯,安磊,吴中红,田见晖. 黑龙江动物繁殖. 2013(03)
博士论文
[1]瘦素在猪胚胎附植中的功能及其信号通路的研究[D]. 王红芳.中国农业大学 2014
[2]食管鳞状细胞癌中microRNA-21与ERK1/2通路调控机制的研究[D]. 刘凤霞.新疆医科大学 2013
本文编号：3039455
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