H9N2亚型禽流感病毒生物学特性分析及PR8八质粒反向遗传操作系统的构建与候选疫苗株的制备
发布时间：2021-02-22 11:09
为研究H9N2亚型禽流感病毒（AIV）对哺乳动物的致病力，本研究选取了20092010年间从我国南方地区分离到的6株H9N2亚型AIV，测定分析了其基因组序列及在小鼠体内的复制能力。基因组序列分析显示：6株病毒HA基因的裂解位点处均为-PSR（K）SSRGLF-，为低致病性分子特征，6株病毒均具有人样受体结合位点Leu226，其他受体结合位点仍具有AIV的特征（Asn183、Ala190和Gly228）。6株病毒的PB2蛋白仍保持禽流感病毒低致病性分子特征（Glu627和Asp701）。全基因遗传进化分析表明，部分病毒的内部基因（如NS、M等）与其他亚型病毒在进化上较接近，可能成为其他亚型病毒的基因供体。BALB/c小鼠人工感染试验结果显示6株病毒对小鼠呈现为低致病性,病毒仅局限于小鼠呼吸道复制。八质粒反向遗传操作系统基于双向转录载体，如pBD，pHW2000等，同时含有RNA聚合酶Ⅰ启动子序列和方向与之相反的RNA聚合酶Ⅱ启动子序列，能同时翻译出聚合酶复合体并转录出病毒vRNA，并产生并释放感染性病毒颗粒。该系统的建立能大大缩短构建重组质粒...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
流感病毒蛋白上与致病性相关的关键氨基酸位点Fig1Keyaminoacidsinviralproteinsthatassociatewithinfluenzaviralpathogenicity
图 2-4 攻毒后小鼠体重变化示意图Fig.2-4 Weight changes of mice after infection with 106EID50of H9N2 AIV.图 2-5 鼻腔感染后 3 天小鼠鼻甲、肺脏中的病毒含量Fig 2-5 virus titers in turbinate and lung of mice 3 days post-infection 取小鼠脏器，脏器滴定结果表明 6 株病毒均能在小鼠鼻甲中复10 不能在肺脏中复制外，其余 5 株均能在肺脏复制，并且 CK/G
图 2-5 鼻腔感染后 3 天小鼠鼻甲、肺脏中的病毒含量Fig 2-5 virus titers in turbinate and lung of mice 3 days post-infection攻毒后第 3 d 取小鼠脏器，脏器滴定结果表明 6 株病毒均能在小鼠鼻甲中复制，6 株病CK/JS/C1158/10 不能在肺脏中复制外，其余 5 株均能在肺脏复制，并且 CK/GX/C2239/HuB/C1564/10 在肺脏的病毒滴度明显高于其他毒株(图 2-5)。在小鼠脑、肾、脾中均未毒。4 讨论H9N2 亚型 AIV 主要感染禽类，水禽是其自然宿主，但随着禽流感病毒的不断遗传变N2 AIV 已经逐步获得了感染甚至致死哺乳动物的能力。我国的 H9N2 亚型 AIV 流行情杂，存在不同的基因型。一般将 H9N2 亚型 AIV 分为两大谱系，即北美谱系和欧洲谱中欧洲谱系又可细分为三类：以 A/quail/HongKong/G1/97 (HK-G1)为代表的 G1 系uck/HongKong/Y280/97 (HK-Y280)为代表的 Y280 系，以 A/Chicken/Beijing/1/94(BJ-94的 BJ94 系 ， 以 A/Chicken/Hongkong/G9/97(HK-G9) 为 代 表 G9 系 hicken/Korea/38349-P96323/96 为代表的 Korea 系，及以 A/duck/Hongkong/Y439/97 (HK
本文编号：3045900
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
流感病毒蛋白上与致病性相关的关键氨基酸位点Fig1Keyaminoacidsinviralproteinsthatassociatewithinfluenzaviralpathogenicity
图 2-4 攻毒后小鼠体重变化示意图Fig.2-4 Weight changes of mice after infection with 106EID50of H9N2 AIV.图 2-5 鼻腔感染后 3 天小鼠鼻甲、肺脏中的病毒含量Fig 2-5 virus titers in turbinate and lung of mice 3 days post-infection 取小鼠脏器，脏器滴定结果表明 6 株病毒均能在小鼠鼻甲中复10 不能在肺脏中复制外，其余 5 株均能在肺脏复制，并且 CK/G
图 2-5 鼻腔感染后 3 天小鼠鼻甲、肺脏中的病毒含量Fig 2-5 virus titers in turbinate and lung of mice 3 days post-infection攻毒后第 3 d 取小鼠脏器，脏器滴定结果表明 6 株病毒均能在小鼠鼻甲中复制，6 株病CK/JS/C1158/10 不能在肺脏中复制外，其余 5 株均能在肺脏复制，并且 CK/GX/C2239/HuB/C1564/10 在肺脏的病毒滴度明显高于其他毒株(图 2-5)。在小鼠脑、肾、脾中均未毒。4 讨论H9N2 亚型 AIV 主要感染禽类，水禽是其自然宿主，但随着禽流感病毒的不断遗传变N2 AIV 已经逐步获得了感染甚至致死哺乳动物的能力。我国的 H9N2 亚型 AIV 流行情杂，存在不同的基因型。一般将 H9N2 亚型 AIV 分为两大谱系，即北美谱系和欧洲谱中欧洲谱系又可细分为三类：以 A/quail/HongKong/G1/97 (HK-G1)为代表的 G1 系uck/HongKong/Y280/97 (HK-Y280)为代表的 Y280 系，以 A/Chicken/Beijing/1/94(BJ-94的 BJ94 系 ， 以 A/Chicken/Hongkong/G9/97(HK-G9) 为 代 表 G9 系 hicken/Korea/38349-P96323/96 为代表的 Korea 系，及以 A/duck/Hongkong/Y439/97 (HK
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