PRV激活三叉神经节细胞NF-κB信号通路的探究
发布时间：2021-02-25 07:18
伪狂犬病（Pseudorabies,PR,又名Aujeszky’s disease,AD）,是由伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的包括多种家畜和野生动物共患的一种急性传染病,该病是危害养猪业的主要传染病之一,每年造成巨大的经济损失。伪狂犬病病毒（PRV）属于疱疹病毒科中的α疱疹病毒亚科,在PRV的潜伏感染期,动物体内检测不到病毒粒子,也不向外排毒,但在相应应激因素的刺激下,潜伏感染的PRV可被激活,可重新产生感染性病毒粒子,导致动物发病,并向外排毒。关于PRV潜伏感染的建立、维持及激活机制尚不明确,控制和根除伪狂犬病所面临的主要障碍是PRV的潜伏感染问题。现有报道显示,猪体外接种PRV可导致神经节细胞的激活,猪神经节细胞的活化主要表现为形态的变化、炎症因子的分泌以及细胞的增殖,而NF-кB信号通路是病原感染引起神经节细胞分泌炎症因子的关键信号通路,病毒激活NF-κB信号通路,NF-κB信号通路的活化会启动很多炎症因子的表达,继而激活宿主的免疫系统;细胞因子方面,病毒感染免疫细胞后造成细胞死亡,导致很多细胞因子的释放,如IL-1、IL-6和IL-8以及TNF...
【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校
【文章页数】：99 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1 猪伪狂犬病概述
1.1 猪伪狂犬病主要流行病学特征
1.2 伪狂犬病毒致病机理研究进展
1.3 病毒对信号通路的影响在致病机理中的作用研究
1.4 伪狂犬病毒感染细胞的信号通路研究
2 伪狂犬病毒对NF-кB信号通路影响的研究进展
2.1 信号通路和NF-кB信号通路简介
2.2 NF-κB通路活化途径分类和正负调节
2.3 病毒调节NF-кB信号通路的研究进展
2.4 PI3K/Akt/NF-кB信号通路与细胞凋亡的关系
2.5 TLRs信号转导途径与NF-кB信号通路的关系
2.6 NF-кB信号通路在PRV激活三叉神经节细胞中的作用有待揭示
2.7 本研究的目的和意义
第二章 PRV感染小鼠三叉神经节细胞的研究
1 材料
1.1 病料与细胞
1.2 主要试剂
1.3 主要溶液的配制
1.4 主要实验仪器
2 方法
2.1 PRV增毒培养
2.2 小鼠三叉神经节细胞培养
2.3 PRV感染小鼠三叉神经节细胞的病变观察
2.4 细胞间接免疫荧光法检测PRV在TG细胞内的增殖情况
2.5 小鼠三叉神经节细胞感染PRV以后的增殖情况
3 结果
3.1 PRV增毒培养结果
3.2 成年小鼠三叉神经节细胞的分离培养结果
3.3 TG细胞接毒PRV后出现的CPE现象
3.4 细胞间接免疫荧光法检测PRV在TG细胞内的增殖结果
3.5 小鼠三叉神经节细胞感染PRV以后的增殖情况
4 讨论
5 结论
第三章 PRV对三叉神经节细胞NF-кB通路影响的研究
1 材料
1.1 病料与细胞
1.2 主要试剂
1.3 主要溶液的配制
1.4 主要实验仪器
2 方法
2.1 利用双抗夹心法ELISA检测样本中IL-1的含量
2.2 MyD88和TRIF基因沉默实验
3 结果
3.1 Vero细胞接PRV后IL-1含量检测（浓度pg/mL）结果
3.2 TG细胞接毒PRV后IL-1检测（浓度pg/mL）结果
3.3 TG细胞接毒PRV后IL-6检测（浓度pg/mL）结果
3.4 沉默MyD88和TRIF后IL-1检测结果（浓度pg/mL）
4 讨论
5 结论
第四章 PRV对细胞NF-КB通路影响研究的体内验证
1 材料
1.1 病料与细胞
1.2 主要试剂和配方
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 小鼠脑内接毒PRV实验
2.2 小鼠脑组织中IL-1含量检测
2.3 实时荧光定量PCR检测p65转录因子
2.4 Western Blot实验检测p65表达蛋白量
3 结果
3.1 小鼠接毒PRV到脑组织后出现的瘙痒症状
3.2 PRV接毒到小鼠脑组织后IL-1的含量检测结果
3.3 实时荧光定量PCR检测NF-кB p65 转录因子含量的结果
3.4 Western Blot实验检测p65 表达蛋白量的结果
4 讨论
5 结论
主要参考文献
附录一 研究生期间参与的课题
附录二 攻读硕士学位期间参与发表的论文
附录三 本文用到的部分英文缩写及含义说明
致谢
本文编号：3050637
【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校
【文章页数】：99 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1 猪伪狂犬病概述
1.1 猪伪狂犬病主要流行病学特征
1.2 伪狂犬病毒致病机理研究进展
1.3 病毒对信号通路的影响在致病机理中的作用研究
1.4 伪狂犬病毒感染细胞的信号通路研究
2 伪狂犬病毒对NF-кB信号通路影响的研究进展
2.1 信号通路和NF-кB信号通路简介
2.2 NF-κB通路活化途径分类和正负调节
2.3 病毒调节NF-кB信号通路的研究进展
2.4 PI3K/Akt/NF-кB信号通路与细胞凋亡的关系
2.5 TLRs信号转导途径与NF-кB信号通路的关系
2.6 NF-кB信号通路在PRV激活三叉神经节细胞中的作用有待揭示
2.7 本研究的目的和意义
第二章 PRV感染小鼠三叉神经节细胞的研究
1 材料
1.1 病料与细胞
1.2 主要试剂
1.3 主要溶液的配制
1.4 主要实验仪器
2 方法
2.1 PRV增毒培养
2.2 小鼠三叉神经节细胞培养
2.3 PRV感染小鼠三叉神经节细胞的病变观察
2.4 细胞间接免疫荧光法检测PRV在TG细胞内的增殖情况
2.5 小鼠三叉神经节细胞感染PRV以后的增殖情况
3 结果
3.1 PRV增毒培养结果
3.2 成年小鼠三叉神经节细胞的分离培养结果
3.3 TG细胞接毒PRV后出现的CPE现象
3.4 细胞间接免疫荧光法检测PRV在TG细胞内的增殖结果
3.5 小鼠三叉神经节细胞感染PRV以后的增殖情况
4 讨论
5 结论
第三章 PRV对三叉神经节细胞NF-кB通路影响的研究
1 材料
1.1 病料与细胞
1.2 主要试剂
1.3 主要溶液的配制
1.4 主要实验仪器
2 方法
2.1 利用双抗夹心法ELISA检测样本中IL-1的含量
2.2 MyD88和TRIF基因沉默实验
3 结果
3.1 Vero细胞接PRV后IL-1含量检测（浓度pg/mL）结果
3.2 TG细胞接毒PRV后IL-1检测（浓度pg/mL）结果
3.3 TG细胞接毒PRV后IL-6检测（浓度pg/mL）结果
3.4 沉默MyD88和TRIF后IL-1检测结果（浓度pg/mL）
4 讨论
5 结论
第四章 PRV对细胞NF-КB通路影响研究的体内验证
1 材料
1.1 病料与细胞
1.2 主要试剂和配方
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 小鼠脑内接毒PRV实验
2.2 小鼠脑组织中IL-1含量检测
2.3 实时荧光定量PCR检测p65转录因子
2.4 Western Blot实验检测p65表达蛋白量
3 结果
3.1 小鼠接毒PRV到脑组织后出现的瘙痒症状
3.2 PRV接毒到小鼠脑组织后IL-1的含量检测结果
3.3 实时荧光定量PCR检测NF-кB p65 转录因子含量的结果
3.4 Western Blot实验检测p65 表达蛋白量的结果
4 讨论
5 结论
主要参考文献
附录一 研究生期间参与的课题
附录二 攻读硕士学位期间参与发表的论文
附录三 本文用到的部分英文缩写及含义说明
致谢
本文编号：3050637
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3050637.html
