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靶向DEC-205的猪圆环病毒Capsid疫苗的设计及其免疫应答研究

发布时间:2021-02-27 08:47
  猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是一种导致猪群免疫力下降的病毒,并与猪断奶后多系统衰弱综合症(Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome,PMWS)、猪皮炎及肾病综合症(Porcine Dermatitis and Nephropathy Syndrome,PDNS)等多种疾病有着联系。疫苗是预防和控制猪群PCV感染的有效方式,目前已研发出病毒灭活苗、亚单位疫苗等多种PCV疫苗,但存在疫苗制备工艺复杂,减毒疫苗的低安全性、亚单位疫苗低免疫原性免疫保护效力局限等一些问题。猪圆环病毒主要由衣壳蛋白Cap蛋白和基因组构成,其中Cap蛋白是公认的主要免疫保护性抗原,将是PCV疫苗研制的有效候选抗原。DEC-205是一种表达于大多数APCs表面的受体,属于甘露糖受体家族,在抗原内化、处理及提呈的过程中扮演重要角色,尤其在对外源性抗原交叉提呈的过程中受到广大研究者的关注。目前国内外许多研究表明:将病毒的主要保护性抗原,如gag(Human Immunodeficiency Virus,HIV),EDⅢ(Dengue Virus,D... 

【文章来源】:重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:120 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

靶向DEC-205的猪圆环病毒Capsid疫苗的设计及其免疫应答研究


猪圆环病毒平面示意图(A)、三维立体示意图(B)和电子显微镜图片(C)(图

示意图,预冷,重组载体构建,重链可变区


基不添加任何抗生素;培养大肠杆菌 DH5α(contain vector pTARA)、TOP10(containvector pTARA)、BL21(plus)和 Rosetta(DE3) plysS 的 LB 培养基添加终浓度为34ug/ml 的氯霉素),37℃,160 rpm 培养,待细菌生长至对数生长早期(OD600=0.4)。将菌液放置冰上预冷 20min,随后 4℃,4000 rpm/min 离心 10 min,弃上清,用 1%体积(1ml)预冷的CaCl2溶液重悬细菌沉淀,随后继续4℃,4000 rpm/min离心10 min,弃上清。最后添加预冷的 CaCl2溶液,冰浴 24-48h,最后添加终浓度为 20%的甘油,放置-80℃保存备用。2.3.2 载体构建示意图

质粒


图 2.2 构建重组克隆质粒 pUC57-scFvDEC205-Cap2.2 The construction of recombinant clone vector pUC57-scFvDEC20

【参考文献】:
期刊论文
[1]负载重组口蹄疫病毒VP4蛋白的树突状细胞启动的T细胞应答[J]. 安鹏丽,李娜,李丽敏,张丽,张雷,高云欢,王家鑫.  畜牧兽医学报. 2012(10)



本文编号:3053984

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