PCV2对体外培养猪肺泡巨噬细胞TLRs的影响

发布时间：2021-03-01 01:16

　　PCV2是断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原,传播性广泛,导致的经济损失巨大。PCV2感染后,可引起仔猪严重的免疫抑制。Toll样受体（TLR）可识别一种或多种病原相关分子模式（PAMP）,能连接适应性免疫和先天性免疫。PCV2在幼猪体内主要侵袭巨噬细胞,它是病毒增殖和传播的关键细胞；同时巨噬细胞具有强大的吞噬功能,在固有免疫中发挥重要的作用；肺脏是PCV2感染后损伤的主要器官,因此,对PCV2感染猪肺泡巨噬细胞（PAMs）后TLRs变化的研究,有利于揭示PCV2引起免疫抑制的机制。选用12头猪圆环病毒2型（PCV2）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）血清抗体和抗原均为阴性的普通断奶仔猪,无菌分离PAMs,分为对照组和PCV2感染组（PCV2组）进行体外培养,分别在培养0、6、12、24和48 h收集PAMs。采用间接免疫荧光法检测PCV2感染PAMs情况；荧光定量PCR法检测TLR2、TLR3、TLR4、 TLR7、TLR8和TLR9 mRNA表达情况。Western blot方法检测TLR3、TLR4 和 TLR9蛋白的表达。结果表明,TLR2 mRNA的表达量在感... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
部分缩写的中英文对照
第一篇 文献综述
    第一章 PCV2与TLR的研究进展
        1 PCV2致感染仔猪免疫抑制的研究进展
            1.1 PCV2的发现
            1.2 PCV2的病原学特征
            1.3 PMWS的基本表现
            1.4 PCV2对巨噬细胞的影响
            1.5 PCV2与免疫抑制
        2 TLR的研究近况
            2.1 TLR的发现
            2.2 TLR结构特征
            2.3 TLR的分布
            2.4 TLR的分类及配体
            2.5 TLRs介导的信号传导通路
            2.6 TLRs信号传导的负调控机制
            2.7 与病毒相关的TLRs
        3 研究的目的和意义
第二篇 试验研究
    第二章 PCV2感染仔猪肺泡巨噬细胞TOLL样受体mRNA转录的变化
        摘要
        ABSTRACT
        1 材料与方法
            1.1 主要仪器与试剂
            1.2 病毒
            1.3 实验动物及处理
            1.4 PAMs感染PCV2情况的检测
            1.5 体外培养PAMs TLRs mRNA转录变化
            1.6 统计学处理
        2 结果与分析
            2.1 PCV2感染体外培养PAMs情况
            2.2 总RNA提取结果
            2.3 cDNA的纯度测定
            2.4 RT-PCR标准曲线的建立
            2.5 PCV2对PAMs TLRs mRNA水平的影响
        3 讨论
    第三章 PCV2对体外培养PAMs TLR3、TLR4和TLR9蛋白表达的影响
        摘要
        ABSTRACT
        1 材料与方法
            1.1 主要仪器与试剂
            1.2 病毒
            1.3 实验动物及处理
            1.4 Western blot法检测TLR3、TLR4和TLR9蛋白的表达
            1.5 数据处理和分析
        2 结果
            2.1 PCV2对PAMs TLR3蛋白含量的影响
            2.2 PCV2对PAMs TLR4蛋白含量的影响
            2.3 PCV2对PAMs TLR9蛋白含量的影响
        3 讨论
参考文献
全文总结
硕士期间发表论文
致谢



本文编号：3056733