孕酮相关基因在绵羊早期妊娠肝脏的表达及在生产上的应用
发布时间:2021-03-01 03:31
胚胎的早期死亡是造成家畜隐性流产的主要原因之一,常引起家畜不孕、产仔数减少、繁殖性能降低等,给畜牧业生产造成严重的经济损失。绵羊的胚胎死亡率为40%左右,其中70%到80%的胚胎是在配种受精后的8-16天死亡的。在不孕的绵羊中,妊娠的第0到7天和8到17天这两个时期,胚胎死亡率分别为30%和40%。因此,绵羊的胚胎死亡主要发生在妊娠早期。为了探讨早期胚胎丢失的原因以及降低胚胎丢失率,我们做了以下三个试验:试验一:本试验以繁殖机能正常的绵羊为试验动物,首先对绵羊进行同期发情处理,进而试情并配种(对照组不配种)。然后采集发情后第16天未妊娠的,以及妊娠后第13、16和25天的绵羊肝脏组织,通过实时荧光定量PCR分析、蛋白免疫印迹分析及免疫组织化学染色分析,研究孕激素受体(PGR)和孕酮诱导阻断因子(PIBF)在绵羊肝脏中的表达。结果:妊娠母羊肝脏中分子量约为60kDa(PGR60)和89kDa(PGR89)的PGR亚型表达较强(P<0.05),而分子量约为55kDa(PIBF55)的PIBF亚型在妊娠第13天的母羊肝脏中则无表达。PGR蛋白主要局限于肝动脉和肝门静脉的内皮细胞。这表明...
【文章来源】:河北工程大学河北省
【文章页数】:72 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
前列腺素化学结构
Fig.2-1.PCR amplified electrophoresis图 2-1.PCR 扩增电泳图总 RNA 的 5S 条带可见,28S 和 18S 条带清晰,性好,符合试验要求。光定量 PCR 的目的片段的扩增产物的鉴定R 试验的产物放在 1%的琼脂糖凝胶内进行电泳到单一的特异性条带,并且特异性引物扩增的目。
Fig.2-1.PCR amplified electrophoresis图 2-1.PCR 扩增电泳图结果表明:总 RNA 的 5S 条带可见,28S 和 18S 条带清晰,那么表示提取的 RNA 的完整性好,符合试验要求。.8.2 实时荧光定量 PCR 的目的片段的扩增产物的鉴定取 RT-qPCR 试验的产物放在 1%的琼脂糖凝胶内进行电泳。得出的结果是每引物都能扩增到单一的特异性条带,并且特异性引物扩增的目的基因的片段大与预期的一致。
【参考文献】:
期刊论文
[1]利用Onapristone研究绵羊子宫内膜组织中孕酮对PGF2α分泌以及COX-2表达的影响[J]. 闫乐艳,GEORGE Mann,施振旦. 江苏农业学报. 2017(03)
[2]母—胎免疫耐受研究进展[J]. 王松存,杜美蓉,李大金. 科学通报. 2016(27)
[3]应用Real Time PCR法进行mRNA表达量相对定量分析方法的探讨[J]. 管健. 现代园艺. 2014(05)
[4]反刍动物妊娠识别基因IFNT的发现及其抑制黄体溶解的分子机制[J]. 张金凤,侯振中. 黑龙江畜牧兽医. 2014(01)
[5]孕激素受体发挥作用的机制及其调控因素[J]. 刘颖,谢梅青. 国际妇产科学杂志. 2012(06)
[6]绵羊胚胎附植分子调控研究进展[J]. 熊燊源,万鹏程,石文艳,代蓉,周平,石国庆,曾申明. 生命科学. 2012(10)
[7]前列腺素E2对免疫细胞及炎症相关疾病的调控作用[J]. 薛瑞,苗一非,杨吉春,管又飞. 生理科学进展. 2011(03)
[8]蛋白质免疫印迹技术的实验研究[J]. 张燕婉,叶珏,时那,孟宪敏,王来元. 实验技术与管理. 2008(10)
[9]Sphincter of Oddi hypomotility and its relationship with duodenal-biliary reflux,plasma motilin and serum gastrin[J]. Zhen-Hai Zhang, Department of Hepatobiliary Surgery, Shandong Provincial Hospital, Jinan 250021, Shandong Province, China Zhen-Hai Zhang, Shuo-Dong Wu, Yang Su, Jun-Zhe Jin, Jing Kong, Hao-Lin Wang, Department of Hepatobiliary, The Second Affiliated Hospital, China Medical University, Shenyang 110004, Liaoning Province, China Bing Wang, Department of Ophthalmology, Shandong Provincial Hospital, Jinan 250021, Shandong Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2008(25)
[10]妊娠免疫耐受机制的研究认识[J]. 秦明春,王若光. 实用预防医学. 2007(02)
硕士论文
[1]IUGR对新生仔猪肝脾免疫功能的影响[D]. 黄雪新.南京农业大学 2011
[2]孕激素受体亚型PR-A、PR-B在乳腺癌中的表达及意义[D]. 郭旭辉.中南大学 2007
本文编号:3056900
【文章来源】:河北工程大学河北省
【文章页数】:72 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
前列腺素化学结构
Fig.2-1.PCR amplified electrophoresis图 2-1.PCR 扩增电泳图总 RNA 的 5S 条带可见,28S 和 18S 条带清晰,性好,符合试验要求。光定量 PCR 的目的片段的扩增产物的鉴定R 试验的产物放在 1%的琼脂糖凝胶内进行电泳到单一的特异性条带,并且特异性引物扩增的目。
Fig.2-1.PCR amplified electrophoresis图 2-1.PCR 扩增电泳图结果表明:总 RNA 的 5S 条带可见,28S 和 18S 条带清晰,那么表示提取的 RNA 的完整性好,符合试验要求。.8.2 实时荧光定量 PCR 的目的片段的扩增产物的鉴定取 RT-qPCR 试验的产物放在 1%的琼脂糖凝胶内进行电泳。得出的结果是每引物都能扩增到单一的特异性条带,并且特异性引物扩增的目的基因的片段大与预期的一致。
【参考文献】:
期刊论文
[1]利用Onapristone研究绵羊子宫内膜组织中孕酮对PGF2α分泌以及COX-2表达的影响[J]. 闫乐艳,GEORGE Mann,施振旦. 江苏农业学报. 2017(03)
[2]母—胎免疫耐受研究进展[J]. 王松存,杜美蓉,李大金. 科学通报. 2016(27)
[3]应用Real Time PCR法进行mRNA表达量相对定量分析方法的探讨[J]. 管健. 现代园艺. 2014(05)
[4]反刍动物妊娠识别基因IFNT的发现及其抑制黄体溶解的分子机制[J]. 张金凤,侯振中. 黑龙江畜牧兽医. 2014(01)
[5]孕激素受体发挥作用的机制及其调控因素[J]. 刘颖,谢梅青. 国际妇产科学杂志. 2012(06)
[6]绵羊胚胎附植分子调控研究进展[J]. 熊燊源,万鹏程,石文艳,代蓉,周平,石国庆,曾申明. 生命科学. 2012(10)
[7]前列腺素E2对免疫细胞及炎症相关疾病的调控作用[J]. 薛瑞,苗一非,杨吉春,管又飞. 生理科学进展. 2011(03)
[8]蛋白质免疫印迹技术的实验研究[J]. 张燕婉,叶珏,时那,孟宪敏,王来元. 实验技术与管理. 2008(10)
[9]Sphincter of Oddi hypomotility and its relationship with duodenal-biliary reflux,plasma motilin and serum gastrin[J]. Zhen-Hai Zhang, Department of Hepatobiliary Surgery, Shandong Provincial Hospital, Jinan 250021, Shandong Province, China Zhen-Hai Zhang, Shuo-Dong Wu, Yang Su, Jun-Zhe Jin, Jing Kong, Hao-Lin Wang, Department of Hepatobiliary, The Second Affiliated Hospital, China Medical University, Shenyang 110004, Liaoning Province, China Bing Wang, Department of Ophthalmology, Shandong Provincial Hospital, Jinan 250021, Shandong Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2008(25)
[10]妊娠免疫耐受机制的研究认识[J]. 秦明春,王若光. 实用预防医学. 2007(02)
硕士论文
[1]IUGR对新生仔猪肝脾免疫功能的影响[D]. 黄雪新.南京农业大学 2011
[2]孕激素受体亚型PR-A、PR-B在乳腺癌中的表达及意义[D]. 郭旭辉.中南大学 2007
本文编号:3056900
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3056900.html