猪MOV10基因克隆表达及其对PRRSV增殖的影响

发布时间：2021-03-02 14:51

　　为了研究猪MOV10基因功能及其在猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）感染过程中的作用,试验成功克隆出猪MOV10基因并进行序列比对,在细胞水平上过表达猪MOV10基因并检测其在细胞中的表达和定位,通过双荧光报告系统检测试剂盒和实时荧光定量PCR检测猪MOV10基因诱导Ⅰ型干扰素的表达,以及Western-blot和空斑试验检测MOV10基因对PRRSV增殖的影响。结果表明:猪MOV10基因氨基酸序列与人MOV10基因的同源性为92.1%,猪MOV10基因能在细胞中表达,且为胞浆定位蛋白; PK-15细胞过表达猪MOV10基因可诱导IFN-β的表达,Marc-145细胞过表达猪MOV10基因可显著抑制PRRSV的增殖。说明猪的免疫系统与人的相似度较高,有可能成为研究人类免疫更好的动物模型,MOV10基因可抑制PRRSV的增殖,也为PRRSV防治药物的开发提供了新药物靶标。 

【文章来源】：黑龙江畜牧兽医. 2020,(09)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

PRRSV增殖的空斑试验检测结果

NSP2蛋白表达情况的Western-blot检测结果见图7,过表达的猪MOV10基因可显著抑制NSP2蛋白的表达;进一步通过空斑试验检测PRRSV增殖情况,结果同样证实过表达的猪MOV10基因可显著抑制PRRSV的增殖,见图8。图8 PRRSV增殖的空斑试验检测结果

PRRS给养猪业造成了巨大的经济损失,截止目前仍无有效的控制措施。猪MOV10基因的功能及其在PRRSV感染中的作用未见报道,本试验首先对猪源MOV10基因进行克隆,通过序列比对分析发现猪MOV10基因氨基酸序列与人MOV10基因氨基酸序列的同源性高达92.1%,显著高于小鼠与人的同源性,该结果也进一步证实与小鼠相比,猪的免疫系统与人的相似度更高,有可能成为研究人类免疫更好的动物模型;随后的亚细胞定位也证实猪MOV10基因与人MOV10基因的亚细胞定位相同;最后探究了猪MOV10基因在PRRSV增殖中的作用,证实猪MOV10基因可以抑制PRRSV增殖,这也为PRRSV防治药物开放提供了新的药物靶标。


本文编号：3059455