温泉中耐高温木聚糖酶产生菌的分离纯化与产酶能力评价

发布时间：2021-03-03 12:05

　　即墨温泉位于即墨市温泉镇的西南侧,温泉平均水温为66℃,最高水温可达93℃,是一种含多种化学元素的地下热水资源。地热水中阴离子Cl-和阳离子Na+的含量很高,为氯化钠型水质,矿化度可达12 g/L。鉴于即墨温泉的上述特点,本文拟从即墨温泉地热水中筛选的具有耐高温耐高渗透压的特性微生物菌株。本课题首先利用降解等方法制备得到半纤维素,并将其添加到培养基中评价筛选菌株产木聚糖酶的效果,对半纤维素的制备产量进行评价,发现半纤维素的制备效率约为13%,基本达到了预期目标。从即墨温泉的水样中,进过初步培养,我们发现培养基上有菌落生长,并且部分菌落周围有透明圈出现,这说明从温泉水中我们是能分离到产木聚糖酶的菌株的。进一步对上述菌株通过稀释、划线培养等方式进行分离纯化,并挑选透明圈较大的菌落。从透明圈较大的菌株中,选取3株透明圈最大的菌株分别接入双层培养基,每株点3个重复,50℃培养48h后,测量菌斑的直径d及透明圈的直径D,对其菌株产酶能力进行粗测。结果显示,这3株菌的菌斑直径平均值分别为4.67,6.0,5.67,相对应的透明圈平均直径分别为20.67,25.67,22。这3株菌的透明圈与菌斑直径... 

【文章来源】：山东农业大学山东省

【文章页数】：36 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
English Abstract
1 前言
    1.1 概述
    1.2 木聚糖的功能及水解产物
        1.2.1 木糖
        1.2.2 低聚木糖
    1.3 木聚糖酶
        1.3.1 木聚糖酶的应用
        1.3.2 耐热的木聚糖酶
    1.4 研究进展
    1.5 获得耐热和耐碱的木聚糖酶的途径
        1.5.1 从极端环境中筛选木聚糖酶产生菌株
    1.6 前景展望
    1.7 创新点及特色
2 材料与方法
    2.1 实验样品
    2.2 主要实验试剂
    2.3 主要仪器设备
    2.4 实验用培养基
    2.5 常用存储液
    2.6 半纤维素的制备
    2.7 细菌的分离与纯化
        2.7.1 涂布分纯
        2.7.2 划线分纯
        2.7.3 透明圈检查
        2.7.4 菌种的斜面保存
    2.8 酶活的测定
        2.8.1 分析原理
        2.8.2 木糖标准溶液的绘制
        2.8.3 酶活力测定方法
    2.9 高产木聚糖酶菌株的保存
3 结果与分析
    3.1 菌种的分离、纯化
        3.1.1 半纤维素的制备
        3.1.2 菌种的初始培养
        3.1.3 菌种的分离
        3.1.4 菌种的纯化
        3.1.5 菌株产酶能力粗测
    3.2 分离菌种产酶能力评价
        3.2.1 标准曲线绘制结果
        3.2.2 酶活的测定结果
4 讨论
    4.1 酶制剂中高耐热菌株分离的优势
        4.1.1 单酶制剂
        4.1.2 复合酶制剂
        4.1.3 耐热酶制剂的优势
    4.2 菌株的分离、纯化
    4.3 菌种酶活性评价和应用
5 结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]产耐高温木聚糖酶菌株的筛选及其产酶条件优化[J]. 孙明哲,郑宏臣,孙君社,裴海生,刘逸寒,张璟,韩杨,路福平.  中国酿造. 2013(08)
[2]微生物酸性木聚糖酶及其应用的研究进展[J]. 王雅珍,李秀婷,孙宝国,朱运平,滕超.  食品与发酵工业. 2012(08)
[3]木聚糖酶产生菌——类芽孢杆菌的筛选及其酶学性质研究[J]. 包怡红,李雪龙.  中国食品学报. 2008(02)
[4]碱性木聚糖酶产生菌的筛选与产酶条件[J]. 许君,任艳丽,陈红歌,张世敏,许世朋,贾新成.  生物技术. 2004(03)
[5]木聚糖酶产生菌的选育及发酵条件研究[J]. 李用芳,李学梅,张建新,聂国兴,黄艳琴,赵利霞.  生物技术. 2004(01)
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[9]木聚糖酶高产微生物的筛选和鉴定[J]. 黄运红,龙中儿,李素珍,裴丽丽,王水兴,于敏.  江西师范大学学报(自然科学版). 2002(03)
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硕士论文
[1]木聚糖酶产生菌株Fusarium oxysporum sp.MJ-23的分离鉴定、酶学特性及产酶条件优化[D]. 郄卫那.南京农业大学 2013
[2]产碱性木聚糖酶菌株的选育[D]. 宋玉伟.山东轻工业学院 2012
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[4]成年母猪后肠道木聚糖酶产生菌的筛选及其产酶条件的研究[D]. 吴兴群.南京农业大学 2010
[5]产木聚糖酶菌株的选育及酶学性质的研究[D]. 阮同琦.山东轻工业学院 2008
[6]木聚糖酶产生菌的筛选、酶学性质及宏基因组文库的构建与筛选[D]. 郭清吉.青岛科技大学 2008
[7]木聚糖酶产生菌的筛选与发酵条件的初步优化[D]. 葛方兰.四川师范大学 2008
[8]细菌性木聚糖酶高产菌株的筛选及其酶学性质研究[D]. 李雪龙.东北林业大学 2008
[9]两株耐碱性木聚糖酶产生菌的筛选及产酶条件研究[D]. 孙丰慧.中国科学院研究生院（成都生物研究所） 2007
[10]高产木聚糖酶芽孢杆菌的分离筛选及其酶性质研究[D]. 秦玉花.四川农业大学 2006



本文编号：3061234