牛源抗金黄色葡萄球菌β溶血素单链抗体的鉴定及其生物学特性

发布时间：2021-03-04 03:38

　　β溶血素（β-hemolysin,Hlb）在金黄色葡萄球菌感染奶牛乳腺的致病过程中起到了重要的作用,但是关于牛源抗β溶血素的免疫制剂研究较少。本研究首先以金黄色葡萄球菌ATCC25923的DNA为模板,利用PCR技术扩增编码β溶血素的基因hlb,构建原核表达质粒pET32a-hlb,并在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达重组Hlb蛋白。以纯化的重组Hlb蛋白为包被抗原,从牛源噬菌体单链抗体表达文库中筛选到了一株针对β溶血素高亲和力单链抗体（single-chain variable fragment, scFv）,通过构建原核表达质粒pET32a-scFv在大肠杆菌Transetta中诱导表达。结果表明,重组Hlb蛋白具有良好的溶解奶牛红细胞的能力,抗β溶血素单链抗体可以显著抑制重组Hlb蛋白和金色葡萄球菌培养物上清的溶血作用。本研究一方面为研制抗金色葡萄球菌所致奶牛乳腺炎新型抗体制剂提供参考,另一方面也为深入研究β溶血素在金色葡萄球菌致病过程的作用奠定基础。 

【文章来源】：畜牧与兽医. 2020,52(04)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

单链抗体蛋白的纯化

Ni-NTA柱纯化重组Hlb蛋白

重组质粒pET32a-hlb经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后可见5 900 bp的载体片段和891 bp左右的目的片段(图1),且测序结果显示与ATCC25923基因序列同源性达100%,说明重组质粒构建成功。2.2 重组Hlb蛋白的诱导表达及纯化

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3062492