枯草芽孢杆菌与鼠李糖乳杆菌融合子制备及其对三黄鸡免疫功能及肠道菌群的影响

发布时间：2021-03-04 08:30

　　枯草芽孢杆菌具有产生芽孢和消化酶的性能，鼠李糖乳杆菌具有产生乳酸和乳酸菌素的性能，二种菌均为益生菌，但各有优缺点。本研究以枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌为亲本菌株，制备出原生质体后进行融合，以获得兼具两亲本优良性状的融合子，并进行动物试验，探讨其对三黄鸡免疫功能及肠道菌群的影响。将两株菌分别接种于枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌活化培养基中，36℃培养至对数生长中期，添加适量的青霉素和甘氨酸，继续培养至对数生长末期；将培养物离心，收集菌体细胞，用不同浓度的溶菌酶处理，测定原生质体的形成率；将两株菌的原生质体接种于再生培养基，37℃培养24h，测定原生质体的再生率。结果表明，两株菌培养时，甘氨酸添加量为4mg/mL，作用时间2h；枯草芽孢杆菌培养时，青霉素添加量为6U/mL，作用时间2h；鼠李糖乳杆菌培养时，青霉素添加量为4U/mL，作用时间2h；当溶菌酶浓度为2mg/mL、酶解温度为37℃、酶解时间为30min时，枯草芽孢杆菌的原生质体形成率和再生率最高，分别为63.1%和56.0%、91.2%和88.5%、78.3%和91.2%，当溶菌酶溶液pH值为7.5时，枯草芽孢杆菌的原生质体形成率最高，... 

【文章来源】：广东海洋大学广东省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

枯草芽孢杆菌原生质体Fig.2-9ProtoplastofBacillussubtilis

15图 2-10 鼠李糖乳杆菌原生质体Fig. 2-10 Protoplast of Lactobacillus rhamnosus度对原生质体形成率和再生率的影响对枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌原生质体形成率和再生2-2，由表可以看出，在 4~37 ℃时，枯草芽孢杆菌和鼠和再生率均逐渐上升，42 ℃时稍微下降，而 56 ℃时则活性的影响有关。由表 2-1 可以看出，当酶解温度为 3体的形成率由 4 ℃时的 29.5 %上升至 91.2 %，再生率则 56 ℃时形成率则下降至 73.7 %，再生率下降至 56.0 %温度为 37 ℃时，鼠李糖乳杆菌原生质体的形成率由 4 ℃再生率则由 18.7 %上升至 85.3 %，而 56 ℃时形成率则

及 pH 值对原生质体融合率的影响体混合液中加入不同浓度和不同 pH 的 PEG，处理后，下计数，取 0.1 mL 于再生固体培养基上倒平板，37 ℃培算融合率。及融合时间对原生质体融合率的影响原生质体混合液的分别置于不同温度下进行融合，每经 10 倍系列稀释后在显微镜下计数，取 0.1 mL 于再生养 24~36 h 后计算菌落数，计算融合率。存质体融合子悬浮于高渗液中，并于 4 ℃条件下保存，合如图 3-1，原生质体之间在外力的作用下相互接触，通合，最后形成一个新的融合子。


本文编号：3062900