脂质体包被ALV-J gp85蛋白疫苗制备及其免疫效果研究
发布时间：2021-03-04 14:06
J亚群禽白血病病毒（Subgroup J Avian leukosis Virus，ALV-J）是上世纪90年代从肉用型鸡群中分离的一种新型禽白血病病毒，主要引起骨髓细胞瘤。1999年中国首次从白羽肉鸡中分离到ALV-J，近年来研究表明ALV-J已传播到我国不同地区的地方品系鸡及蛋用型鸡群中，给我国养鸡业造成严重的经济损失。本课题旨在通过脂质体包被ALV-J gp85蛋白疫苗制备及其免疫效果研究，为临床应用脂质体蛋白疫苗预防ALV-J的科学前景提供有力的实验依据。采用原核诱导表达方法制备重组gp85蛋白：首先将gp85基因重组于表达载体PET-28a，然后将构建好的重组载体PET-28a-gp85转化入Rosetta（DE3）菌株，以0.5mMIPTG于37℃诱导6h后收获菌体蛋白，并对包涵体蛋白通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白印迹（Western-blot）方法进行验证，最后对gp85蛋白进行纯化及浓度的测定。蛋白浓度测定结果为2mg/mL。采用逆相蒸发法制备gp85蛋白脂质体疫苗，并应用鱼精蛋白法检测其包封率。结果显示：卵磷脂/胆固醇（摩尔比）为1：...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
重组表达载体的双酶切鉴定结果
15000500025001000250100007500 1 重组表达载体的双酶酶切的重组表达载体；) identification using doud digested by double enzbp
3 重组蛋白 gp85 的 SDS-PAGE 结果8a 载体诱导结果；1：重组表达载体 PETmbinant gp85 protein(unpurified) expressedein expression of empty plasmid(PET-28a);ecombinant plasmid(PET-28a-gp85).M 0 1202025120855035
【参考文献】：
期刊论文
[1]An Evaluation of the Infection Status and Source of Subgroup J Avian Leukosis Virus in Cloned Free-Range Layers[J]. ZHANG Pei-pei,LIU Shao-qiong,WANG Jian,WANG Bo,ZHAO Cheng-di,ZHANG Yong-guang,SUN Shu-hong. Journal of Integrative Agriculture. 2013(04)
[2]ALV-Jgp85重组蛋白与免疫佐剂联合接种雏鸡诱导免疫保护的研究[J]. 窦文文,李宏梅,成子强,刘建柱,刘海港,井维芳,崔治中,郭慧君. 中国预防兽医学报. 2013(03)
[3]脂质体作为抗生素载体的研究进展[J]. 杨杜明,徐永清,李福兵,刘华. 中国修复重建外科杂志. 2012(11)
[4]乙醇注入法制备莪术醇脂质体[J]. 张晓丽,吴品昌,刘宇,李铁福. 中国实验方剂学杂志. 2012(04)
[5]阿霉素脂质体的研究进展[J]. 贾晋斌,韦青燕. 中国肿瘤. 2011(05)
[6]兽用疫苗佐剂的研究及应用现状[J]. 任锐,吕雪峰,孟宪奎. 吉林畜牧兽医. 2011(05)
[7]诱发血管瘤型J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达[J]. 邱波,刘功振,王晓伟,王峰,陈洪博,成子强. 病毒学报. 2011(02)
[8]正交试验优选黄芪多糖脂质体的制备工艺[J]. 范云鹏,王德云,胡元亮,刘家国,高焕,王远垒,郭利伟. 中草药. 2011(03)
[9]我国近10年鸡白血病流行病学报道与研究分析[J]. 王洪进,张青禅,赵冬敏,柴家前,常维山,崔治中,郭慧君. 中国兽医学报. 2011(02)
[10]J亚群禽白血病毒gp85基因表达及初步应用[J]. 张伟伟,杨宗伟,陈宗艳,王超,李传峰,刘光清. 中国动物传染病学报. 2011(01)
博士论文
[1]J亚群禽白血病病毒Env蛋白分子生物学特性研究[D]. 叶建强.扬州大学 2005
硕士论文
[1]中国株J亚群禽白血病病毒全基因组序列的测定与分析[D]. 吴永平.山东农业大学 2004
[2]鸡新城疫基因工程亚单位疫苗的研究[D]. 刘长梅.山东师范大学 2001
本文编号：3063346
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
重组表达载体的双酶切鉴定结果
15000500025001000250100007500 1 重组表达载体的双酶酶切的重组表达载体；) identification using doud digested by double enzbp
3 重组蛋白 gp85 的 SDS-PAGE 结果8a 载体诱导结果；1：重组表达载体 PETmbinant gp85 protein(unpurified) expressedein expression of empty plasmid(PET-28a);ecombinant plasmid(PET-28a-gp85).M 0 1202025120855035
【参考文献】：
期刊论文
[1]An Evaluation of the Infection Status and Source of Subgroup J Avian Leukosis Virus in Cloned Free-Range Layers[J]. ZHANG Pei-pei,LIU Shao-qiong,WANG Jian,WANG Bo,ZHAO Cheng-di,ZHANG Yong-guang,SUN Shu-hong. Journal of Integrative Agriculture. 2013(04)
[2]ALV-Jgp85重组蛋白与免疫佐剂联合接种雏鸡诱导免疫保护的研究[J]. 窦文文,李宏梅,成子强,刘建柱,刘海港,井维芳,崔治中,郭慧君. 中国预防兽医学报. 2013(03)
[3]脂质体作为抗生素载体的研究进展[J]. 杨杜明,徐永清,李福兵,刘华. 中国修复重建外科杂志. 2012(11)
[4]乙醇注入法制备莪术醇脂质体[J]. 张晓丽,吴品昌,刘宇,李铁福. 中国实验方剂学杂志. 2012(04)
[5]阿霉素脂质体的研究进展[J]. 贾晋斌,韦青燕. 中国肿瘤. 2011(05)
[6]兽用疫苗佐剂的研究及应用现状[J]. 任锐,吕雪峰,孟宪奎. 吉林畜牧兽医. 2011(05)
[7]诱发血管瘤型J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达[J]. 邱波,刘功振,王晓伟,王峰,陈洪博,成子强. 病毒学报. 2011(02)
[8]正交试验优选黄芪多糖脂质体的制备工艺[J]. 范云鹏,王德云,胡元亮,刘家国,高焕,王远垒,郭利伟. 中草药. 2011(03)
[9]我国近10年鸡白血病流行病学报道与研究分析[J]. 王洪进,张青禅,赵冬敏,柴家前,常维山,崔治中,郭慧君. 中国兽医学报. 2011(02)
[10]J亚群禽白血病毒gp85基因表达及初步应用[J]. 张伟伟,杨宗伟,陈宗艳,王超,李传峰,刘光清. 中国动物传染病学报. 2011(01)
博士论文
[1]J亚群禽白血病病毒Env蛋白分子生物学特性研究[D]. 叶建强.扬州大学 2005
硕士论文
[1]中国株J亚群禽白血病病毒全基因组序列的测定与分析[D]. 吴永平.山东农业大学 2004
[2]鸡新城疫基因工程亚单位疫苗的研究[D]. 刘长梅.山东师范大学 2001
本文编号：3063346
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