猪萨佩罗病毒原位杂交检测方法的建立

发布时间：2021-03-08 17:09

　　为了直观、原位且特异性的检测猪萨佩罗病毒（porcine sapelovirus,PSV）在感染仔猪后器官和组织中病毒核酸的分布,本研究根据GenBank中PSV的5′端非编码区基因的保守序列设计并合成1对引物,利用PCR地高辛探针合成的方法制备成原位杂交检测探针,建立了PSV原位杂交组织切片检测的方法。应用该方法检测PSV感染仔猪小肠组织,结果表明阳性信号主要存在与在于肠绒毛上皮细胞和固有层淋巴细胞中,阴性对照无显色。该方法可以用于组织切片中的PSV核酸的定位,为猪萨佩罗病毒在感染仔猪后器官和组织中病毒核酸分布及致病机理研究奠定基础。 

【文章来源】：中国兽医学报. 2020,40(07)北大核心

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

PSV组织免疫组化结果

PCR扩增目的条带结果

对ISH检测阳性的连续切片进行免疫组化染色。结果显示,阳性信号呈棕黄色,位于小肠绒毛上皮细胞的胞质中。观察染色结果可以发现这2种方法对PSV定位具有相同的结果(图3)。图3 PSV组织免疫组化结果

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]伪狂犬病毒变异株与经典株滴鼻感染小鼠后时空分布规律的研究[D]. 付祖权.华中农业大学 2017
[2]猪腹泻病原多重PCR检测方法的建立及主要病毒进化分析[D]. 孟丽.上海海洋大学 2017



本文编号：3071362